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1、国家自然科学基金申报攻略复旦大学 分子医学教育部重点实验室 复旦大学出生缺陷研究中心 复旦大学儿童发育与疾病转化医学研究中心 马端 2011.2本人主持和合作的国家自然科学基金n2003. 新型组织因子/VIIa抑制物抗凝和抗炎作用研究（TFPI-1）n2007. TFPI-1参与MsC细胞凋亡及其肾炎治疗作用的实验研究n2007. TFPI-2影响斑马鱼中枢神经系统发育的机制研究n2009. 圆锥动脉干异常所致先天性心脏病的致病基因分析与确证（重点）n2009. TFPI-2在稳定动脉粥样硬化斑块中的作用及其机制研究n2009. TFPI-2基因在子痫前期发病机制中的作用n2010. TFP
2、I-2降低鼻内翻性乳头状瘤血管生成的信号通路研究 n2010. 应用条件基因敲除小鼠研究TFPI-1对血管内皮细胞功能的影响研究方向 出生缺陷的病因、发病机制、早期诊断与干预 疾病的遗传学与表观遗传学 生物技术新药研制讲座内容n2010年基金申请及批准情况n2011年申请政策的重要变动n申请的基本要求n申请的体会及建议2010年总体情况n申请量继续增长 n医学部首次受理项目申请，占全委26% n接收后“不予受理”项目：3.6% n各类项目资助强度和资助率均有增长 2011年重大变动n面上项目：平均资助强度60万元/项，资助期限由3年延长为4年。n重点项目：平均资助强度300万元/项，资助期限由
3、4年延长为5年。n青年科学基金项目：平均资助强度将达到约25万元/项，资助期限仍为3年。女性申请人的年龄限制推迟至未满40周岁；男性申请人的年龄限制维持未满35周岁不变。n科学仪器基础研究研究专款项目：资助强度原则上不超过300万元/项，资助期限由3年延长为4年。n重大国际（地区）合作研究项目：预计平均资助强度将达到约300万元/项左右，资助期限由3年延长为5年。特殊说明n为防范学术不端行为，避免重复资助，自然科学基金委自2011年起将通过计算机软件对申请书内容进行比对，特提醒申请人注意：n不得将内容相同或相近的项目，向同一科学部或不同科学部申请不同类型项目的资助；n受聘于一个以上依托单位的申
4、请人，不得将内容相同或相近的项目，通过不同依托单位提出申请；n不得将内容相同或相近的项目，以不同申请人的名义提出申请。申请人条件n具有承担基础研究课题或其他从事基础研究的经历n具有高级专业技术职称n具有博士学位，有2名与其研究领域相同、具有高级专业技术职称的科学技术人员推荐。n正在攻读研究生学位的人员不得作为申请人申请各类项目。n在职攻读博士研究生学位的人员：可申请面上项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目及部分联合基金项目。条件：通过受聘单位申请，导师同意函，说明申请项目与其学位论文的关系，承担项目后的工作时间和条件保证等。n在职攻读硕士研究生学位人员：不得申请青年科学基金项目。n博士后人
5、员：面上项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目，不得申请其他类型项目。限项申请规定n限项申请：申请人（不含参与者）同年只能申请1项同类型项目。 n申请和承担项目总数限为3项：面上项目、重点项目、重大项目、重大研究计划项目、联合基金项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目、国家杰出青年 科学基金项目（申请时不限项）、国际（地区）合作研究项目、科学仪器基础 研究专款项目、优秀国家重点实验室研究专项项目，以及资助期限超过1年的委主任基金项目、科学部主任基金项目等。n作为负责人限获得1次资助的项目：青年科学基金项目、国家杰出青年基金。n非高级专业技术职称人员的限项规定：作为申请人申请和作为负责人正在
6、承担 的项目数合计限为1项；在保证有足够时间和精力参与项目研究工作的前提下，作为主要参与者申请或者承担各类型项目数量不限。n处于评审阶段（自然科学基金委做出资助与否决定之前）的申请，计入本限项 申请规定范围之内。n申请人即使受聘于多个依托单位，通过不同依托单位申请和承担项目，其申请 和承担项目数量仍然适用于本限项申请规定。 面上项目申报要求n充分了解国内外相关研究领域发展现状与动态n能领导一个研究组开展创新研究工作n依托单位应当具备必要的实验研究条件n申请的项目有重要的科学意义和研究价值，理论依据充分，学术思想新颖，研究目标明确，研究内容具体，研究方案可行。面上项目合作研究单位不得超过2个。医
7、学科学二处n生殖系统和围生医学/新生儿(HO4)：主要资助人类生殖系统功能异常、各种相关的非肿瘤性疾病的研究和胎儿发育异常、新生儿疾病以及辅助生殖、产前诊断、避孕与节育相关研究等。n2010年度受理项目申请789项，基本覆盖了上述研究领域，主要集中在新生儿相关疾病（13%）、妊娠及妊娠相关性疾病（12%）；其次是胎儿发育与产前诊断（7%）及子宫内膜异位症（7%）。n研究的主要科学问题是疾病的发病机制以及治疗的新靶点新技术，在胚胎表观遗传学研究、辅助生殖安全性研究方面已备受关注，申请项目占该领域申请总数的26%。申请数较少或无的领域有女性性功能障碍、乳腺发育异常与疾病、生殖器官移植、生殖系统遗传
8、性疾病、先天性发育缺陷、男性生殖系统炎症。n本科学处继续鼓励有良好前期积累、探讨与提高人口质量及影响妇女、胎儿、新生儿及生殖健康相关的创新性的基础研究。医学科学五处n主要资助肿瘤学（H16）基础研究n本科学处资助有关肿瘤的发生、发展、转归和各类肿瘤（白血病除外）的病因、发病机理、诊断、治疗的基础研究。n资助范围包括：肿瘤研究的各个层面。病因、肿瘤发生、肿瘤遗传、肿瘤免疫、肿瘤预防、肿瘤复发与转移、肿瘤干细胞、肿瘤诊断、肿瘤化学药物治疗、肿瘤物理治疗、肿瘤生物治疗、肿瘤综合治疗、肿瘤康复(包括社会心理康复)、肿瘤研究体系新技术，以及各系统器官肿瘤。 n本科学处重点支持学术思想具有创新、已形成稳定
9、的研究方向、具备坚实研究基础。鼓励申请人从前期研究和临床实践中发现并凝练科学问题，进行深入系统的机制探讨，开展旨在提高临床诊疗水平及向临床实践转化的基础研究；鼓励对肿瘤学研究领域新技术新方法的探讨；鼓励申请人利用我国临床资源的优势开展与临床有机结合的基础研究；鼓励申请人开展基于已有临床数据和临床标本而开展围绕具体科学目标进行的相关研究。青年基金申报要求n青年科学基金项目申请、评审和管理机制与面上项目基本相同，重点评价申请人本人的创新潜力。n申请人应当按照青年科学基金项目申请书撰写提纲撰写申请书。n青年科学基金项目的合作研究单位不得超过2个，资助期限为3年。 n板块：人才基金 n强调：是否受过良
10、好且严格的科研训练 n判断：项目申请人是否具备良好的培养潜力 n成员：不必(刻意)将资深专家作为研究成员 n基础：实事求是，不必过于在意工作积累 n独立：作为独立PI(?)，充分和认真思考 存在的主要问题n一般性的跟踪研究，缺乏创新n无明显科学意义和应用前景 n立论依据不够充分 n研究结果的预期性较差 n对国内外研究现状了解和分析不充分，分析有偏差，未能抓住关键问题 n重复研究，不完全了解前人的工作 n未认真阅读项目指南 n研究内容甚至项目名称都和前一两年资助项目雷同 n工作无持续性做好“功课”n项目申请指南 n同行评议意见 n历年相关领域已资助项目情况 n国内外同行研究工作(历史、最新进展等
11、) n基金委资助领域、优先资助内容 n与国家其他研究计划的关系 标书撰写原则n新颖性：不重复他人研究成果。n重要性：学术界共识或有特殊理由。n可行性：研究基础，实验条件，人员，时间。n问题导向：精练，概括；提出假说。n目标集中：可信，连贯。n深度合适：点状深入，不要面上铺开。n逻辑清晰：注意区别平行关系和因果关系。标书撰写技巧n题目q不可过大、过长、语法错误和逻辑错误。q必要时使用英文缩写q高度概括，针对性强n举例q应用条件基因敲除小鼠研 究TFPI-1对血管内皮细胞功能的影响摘要n充分利用400字的空间n简单背景介绍，存在问题。n研究基础n研究内容n目标或可能达到的目的，意义。n关键词准确n
12、注意：充分展示，不可夸大！举例（400字）n内容摘要：组织因子途径抑制物-1（TFPI-1）属丝氨酸蛋白酶抑制物家族成员，主要功能是抗凝血，也有一定的抗炎、抗平滑肌细胞增殖和诱导肾小球细胞凋亡等功能。TFPI-1基因敲除小鼠胚胎期即因卵黄囊或脑出血死亡，使得对它的生理功能研究缺乏了有效的工具。鉴于TFPI-1在动脉粥样硬化、血栓性疾病、恶性肿瘤、严重感染和弥漫性血管内凝血中变化明显，因此有必要进一步明确TFPI-1在血管内皮细胞中的功能。目前我们已经成功制备了TFPI-1 LoxP小鼠，并获得了血管内皮细胞Tek Cre小鼠。本课题拟完成：1.制备血管内皮细胞TFPI-1基因条件敲除小鼠；2.
13、应用病理学方法观察该小鼠血管内皮及血管的形态学变化；3.静脉注射不同剂量的脂多糖和乳腺癌细胞，观察小鼠炎症发生和肿瘤转移情况。通过上述研究，力图阐明TFPI-1在血管内皮细胞中的生理功能，明确它对炎症和恶性肿瘤转移的作用，为这两类疾病的防治提供理论依据。n关键词： TFPI-1；条件基因敲除；血管内皮细胞；生理功能项目组成成员n不可过多或过少，一般6-8人比较合适。n研究队伍组成要合理，包括职称、年龄、知识结构等n其它单位合作者n不要超项n项目分工和工作时间合理经费申请n单项合理：实事求是。n协作费指外单位协作承担自然科学基金项目部分研究试验工作的费用。n合作费指由两个或两个以上单位合作，共同
14、承担自然科学基金项目研究工作的费用。n劳务费只能用于直接参加项目研究的研究生、博士后人员的劳务费用。项目类型国际合作与交流经费劳务费管理费面上项目15155各支出科目最高比例表立项依据与研究内容（4000-8000字） 项目的立项依据n关键科学问题是什么？问题的来源？目前有谁在研究？他们解决了什么问题？是如何进行研究的？还有哪些问题没解决？他们的研究对你要开展的研究有什么启发？n为什么要进行本项研究？为什么要由你来研究？前期工作基础如何？是否有科学假说？如何完成研究？n对研究方案的简介及依据。n对新颖性、重要性和可行性的分析。n准确评价自己的工作、同行的工作。n研究的重要性和意义。对本科学、分
15、支领域、研究方向的发展有何贡献？对科技、经济、社会发展有何重要意义及应用前景？n注意参考文献的时效性研究目标n目标明确：2-3个 成功制备血管内皮细胞TFPI-1条件基因敲除的小鼠； 通过明确血管内皮细胞TFPI-1条件基因敲除的小鼠的血管形态学和功能学变化，确定TFPI-1的部分生理功能； 确定TFPI-1在血管内皮细胞参与炎症反应和恶性肿瘤转移中的作用和地位。研究内容 n做什么？n围绕研究目标进行n小题大做n要有层次：如基因转录水平、蛋白质表达水平、细胞水平、动物模型、人体。n内容要细化制备血管内皮细胞TFPI-1条件基因敲除小鼠：将TFPI-1 LoxP小鼠和血管内皮细胞Tie2-Cre
16、转基因小鼠交配，获得血管内皮细胞TFPI-1基因条件敲除杂合子和纯合子小鼠，应用Southern Blot和PCR方法进行基因型鉴定。血管内皮细胞TFPI-1条件基因敲除小鼠不同发育阶段血管内皮细胞表型和血管形成变化分析：取E12小鼠胚胎、出生后当天小鼠、3.5周龄幼鼠和7周龄性发育成熟小鼠，处死后分别取主动脉、心脏、肺脏和大脑，分别对各部位血管进行病理学和电子显微镜检测。应用TUNEL法原位检测血管内皮细胞的凋亡情况。血管内皮细胞TFPI-1条件基因敲除小鼠对细菌内毒素的反应：选择6-7周龄发育成熟小鼠，静脉注射小、中和大剂量细菌脂多糖LPS，取血处死小鼠，检测血液中关键炎症因子NF-B、TNF-和IL-1水平，病理学检测肺脏和大脑的炎症情况。乳腺癌细胞在血管内皮细胞TFPI-1条件基因敲除小鼠血液中转移能力的评价：选择6-7周龄发育成熟小鼠，静脉注射三种不同数量的MDA-MB-231乳腺癌细胞，饲养4-6周后处死，取肺脏进行病理学检测，观察乳腺癌转移情况。拟解决的关键问题n关键科学问题与关键的技术问题n与研究目标和研究内
