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1、 FastTALETM TALEN 快速构 建试剂盒介绍及使用说明王涛涛 18321083786 上海斯丹赛生物技术有限公司上海张江蔡伦路720弄1号楼http:/上海斯丹赛生物技术有限公司试剂盒介绍1.外观模块感受态SOC溶液1/2/3/4/5/vector、ddH2O试剂盒介绍2.内容试剂盒介绍溶液1/2/3/4/5/vector、ddH2O感受态SOC规规格感受态态SOC15次15支15支30次30支30支60次60支60支试剂盒介绍操作流程1.设计2.添加模块3.加样A1T2TC3TG4CT5AA6CT7CA8TA9载体、溶液1、溶液2、溶液3、ddH2O注意事项： 1、为了避免污染
2、，所有加样过程尽量在无菌操作间进行，若无条件 也应在超净工作台中操作。 2、由于模块数量较多，为了避免出现错误。建议加样时两个人操作 3、溶液3必须完全溶解才能用（可放入37度水浴溶解）体系：溶液1 1L 溶液2 1L 溶液3 2L 载体 1.5L ddH2O 1L模块 1.5L总体积 20L9操作流程连接过程137 5min 16 10min80 10min12 2min15cycle连接过程2溶液4、溶液537孵育60min溶液4 1 L 溶液5 0.5 L连接过程1体积 20 L总体积 21.5 L注意事项：溶液5必须完全溶解才能用操作流程转化1.取出试剂盒中的感受态，冰上放置5-10m
3、in使其融化。2.取10 L连接产物加入中，混匀。3.冰上静置20min。4.42热激45s-60s。5.冰浴23min。6.加入500 L SOC，37摇床复苏30min。7.4000rpm，离心5min，将上清倒掉大部分（留约100-150L）。8.将菌体重悬，均匀涂布在kna抗性的LB平板上。9.37培养16h。注意：以上过程尽量在无菌操作室中进行，若没条件也可在超净工作台操作。操作流程挑选正确质粒1.在培养好的平板上挑10个克隆，在37摇床中培养过夜（超过16h）。 2.将培养过夜的菌液抽提质粒。 3.进行酶切鉴定。（我们构建的TALEN 质粒一律用Pst I+BamH I进行酶切）4.测序（引物是试剂盒中提供的305、306）操作流程测序结果比对标准序列测序结果操作流程谢谢！上海斯丹赛生物技术有限公司订购：021-58950719 市场部：021-58959719 技术支持：021-38723968
