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1、实验七 真菌的形态观察*1兽医微生物与免疫一、实验目的1、掌握真菌水浸片的制作过程。2、掌握观察真菌形态的基本方法。Date2兽医微生物与免疫二、实验原理霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多，分为基内菌丝和 气生菌丝。气生菌丝生长到一定阶段又可 分化出繁殖菌丝。不同霉菌的繁殖菌丝可 以形成不同的孢子。霉菌菌丝体（尤其是 繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同 种类霉菌的重要依据。 Date3兽医微生物与免疫霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌 粗得多，用低倍显微镜即可观察。制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。用此 染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌 、防腐作用，不易干燥
2、，能保持较长时间，能防 止孢子四处飞散，棉蓝具有一定的染色作用，染 液的蓝色能增大反差。（如果用水封片，常因渗 透作用而膨胀，水也易使菌丝、孢子和气泡混为 一团，影响观察。）Date4兽医微生物与免疫三、实验材料1、菌种：根霉、曲霉、酵母菌的固体培养物2、乳酸石炭酸棉蓝染液、50%酒精、蒸馏水3、载玻片、盖玻片、接种环、解剖针、酒精灯、显微镜等。Date5兽医微生物与免疫四、实验内容1、霉菌、酵母菌菌落特征观察。2、霉菌、酵母菌水浸片的制备和观察。Date6兽医微生物与免疫1、真菌菌落特征观察（1）霉菌菌落观察各种霉菌菌落的形态、大小、菌丝高矮、生长紧密度、孢子颜色和菌落表面等情况。因霉菌的菌
3、丝较粗且长，故形成的菌落较疏松，常成绒毛状、絮状、蜘蛛网状或毡毯状，一般比细菌和放线菌菌落大几倍到几十倍。Date7兽医微生物与免疫在固体培养基上菌落最初往往是浅色或白色，当菌落上长出各种颜色的孢子后，由于孢 子具有不同形状、构造和颜色，使菌落表面呈 现肉眼可见的不同结构和色泽，如黄、绿、青 、黑、橙等。Date8兽医微生物与免疫根 霉Date9兽医微生物与免疫（2）、酵母菌菌落特征在固体培养基上形成的菌落多为在固体培养基上形成的菌落多为乳白色，少数，少数黄色或红色。表面湿润，光滑，黏。表面湿润，光滑，黏稠，比细菌菌落大而厚。稠，比细菌菌落大而厚。Date10兽医微生物与免疫Date11兽医微
4、生物与免疫Date12兽医微生物与免疫2 2、真菌水浸片的制备和观察、真菌水浸片的制备和观察（1 1）霉菌）霉菌在干净载玻片中央，滴加在干净载玻片中央，滴加1-21-2滴乳酸石炭酸棉蓝滴乳酸石炭酸棉蓝 染液染液，然后，用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取，然后，用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取 少量带有孢子的霉菌菌丝，用少量带有孢子的霉菌菌丝，用50%50%的乙醇的乙醇浸润，再浸润，再 用用蒸馏水蒸馏水将浸过的菌丝洗一下，然后放入载玻片上将浸过的菌丝洗一下，然后放入载玻片上 的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来。盖上的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来。盖上 盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动
5、盖玻片）。盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片）。用用低倍镜低倍镜（必要时可转换（必要时可转换高倍镜镜检）高倍镜镜检）观察并观察并 记录结果。记录结果。Date13兽医微生物与免疫注意观察菌丝有无隔膜，有无假根、足细胞等特殊形态。注意其无性繁殖器官的形状和构造，孢子着生的方式和孢子的形态、大小等。Date14兽医微生物与免疫根 霉Date15兽医微生物与免疫Rhizopus Date16兽医微生物与免疫根霉 Rhizopus 的结合孢子Date17兽医微生物与免疫曲霉Date18兽医微生物与免疫Aspergillus Date19兽医微生物与免疫Aspergillus flavusDate
6、20兽医微生物与免疫曲 霉 孢 子 囊Date21兽医微生物与免疫散 落 的 曲 霉 孢 子Date22兽医微生物与免疫（2 2）酵母菌的形态观察）酵母菌的形态观察在干净载玻片中央，滴加在干净载玻片中央，滴加1 1滴蒸馏水滴蒸馏水，然，然 后，用接种环挑取少量酵母菌，在后，用接种环挑取少量酵母菌，在蒸馏水蒸馏水中中 涂匀，小心盖上盖玻片（勿使产生气泡，且涂匀，小心盖上盖玻片（勿使产生气泡，且 不要再移动盖玻片）。不要再移动盖玻片）。用用低倍镜低倍镜或或高倍镜镜检高倍镜镜检观察并记录结果观察并记录结果 。Date23兽医微生物与免疫酵母菌的形态多为球形、卵形、椭圆形、腊肠形、圆 筒形，少数为瓶形，柠檬形和假丝状形等 。比细菌大，在高倍镜下可清楚看到。Date24兽医微生物与免疫酵母菌的形态构造(P38)线粒体线粒体 芽体液泡芽体液泡细胞壁细胞壁核核芽体芽体液泡膜液泡膜细胞膜细胞膜Date25兽医微生物与免疫五、实验结果和作业 绘出你所观察到的酵母菌、霉菌个体形态，并注明各部分名称。Date26兽医微生物与免疫
