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1、实验2 胡萝卜愈伤组织的诱导培养 实验内容: 2-1 胡萝卜愈伤组织诱导培养基的配制 2-2 胡萝卜愈伤组织的诱导 2-3 胡萝卜愈伤组织继代培养基的配制 2-4 胡萝卜愈伤组织的继代培养实验2-1 胡萝卜愈伤组织诱导 培养基的配制 1 实验目的 通过本次实验,使学生进一步熟悉配制培 养基的流程及操作中应注意的事项,学会 设计和筛选胡萝卜愈伤组织诱导培养基配 方。 2 实验原理 将事先配制好的培养基母液按一定比例稀 释至浓度为培养基中规定的使用浓度,再 加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等,制备 成符合要求的培养基。3 主要实验用具和仪器 冰箱、普通天平、三角瓶、果酱瓶、移液 管、量筒、烧杯、容量瓶
2、、玻璃棒、医用 口杯、精密pH试纸(pH5.47.0)、药勺 、称量纸、标签纸、封口膜、橡皮筋、棉 线、电炉、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉等。4 药品和试剂 MS培养基母液、琼脂、蔗糖、生长调 节物质、蒸馏水、1molL-1HCl、 1molL-1NaOH5 胡萝卜愈伤组织诱导培养基 的配方及配制体积 培养基配方设计:(1)根据培养的目的选 择一种培养基为基本培养基。(2)确定培 养基中各种激素的浓度及相对比例 配方: MS基本培养基 1mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA0.7琼脂3蔗糖 配制体积:每小组配制0.5L,每人用100ml 三角瓶分装5瓶,每瓶约装25ml培养基。6 胡萝卜愈伤组织诱导 培养基的配制步骤 (1)药品及用具的准备 (2)培养基配制 (3)调节培养基的酸碱性至pH5.8 (4)培养基的分装 (5)培养基的灭菌 (6)无菌蒸馏水和接种工具准备