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1、临床医生如何开展科研工作北京大学第一医院中心实验室戚 豫 研究员 66551122ext2044 dxy用户：qiyu0724 基本科研训练 如何选题和进行科研设计 如何建立实验程序和做实验记录 如何分析结果得出结论 合作、交流、实验室安全 如何撰写论文 如何申请基金基本科研训练（1）“六能力”： 1. 文献处理能力 2. 实验设计能力 3. 实验操作能力 4. 写作能力 5. 合作交流能力 6. 申请基金能力重塑知识结构： “三三之比” “敲门砖”和 “金钥匙” 临床医师与科 研素养 择业基本科研训练（2）“三定” 定方向 定领域 定课题“四要点” 目的明确 依据充分 设计合理 方法恰当如
2、何选题和进行科研设计？“五性” 先进性(advance) 独创性(originality) 实用性(practicality) 可行性(feasibility) 影响力(citation)五“R”： Real(reliable) Respect(your patients and animals) Repeatable Record(complete) Relationship(others)选题出发点 从临床来和回到临床去 短平快与长深久 抓住本人和本单位优势 强强组合 力所能及研究对象的选取 以人为本 差异和多样性 动物模型和细胞模型的目的 动物模型和细胞模型的选择 群体研究和个体研究设定
3、指标与实验分组 根据目的设定指标：以少为佳 对照(组)的必要性 按照统计要求分组 从设计开始正确选择统计方法 人：多因素分析 动物和细胞模型：单因素分析如何建立实验程序和实验记录1、实验程序的建立 根据研究目标确定研究内容 根据研究内容确定研究方法 方法的选择 预实验的必要性经验和教训 首先观察！别人操作的细节，为什么 要这样操作。 其次，不要在没有弄清楚原因的情况下， 盲目再进行相同的实验操作。做一次试验 ，就要排除一个可能的因素。 最重要的：留出时间思考！不要怕导师说 你实验少，就开一大堆试验陷于大量 的体力劳动。经验和教训 不要查到一篇文献，就马上按照文献方法去试。 看一看，要得到目标，
4、有哪些方法，每种方法的 优点和缺点是什么，选择最方便的开始。 对于每一个细节，要问问什么这么做？如果不这 样做，后果是什么？能不能用其他方法代替？参 考其他相同类文献，看看别人做了什么改动？为 什么要这样改动？ 提高工作效率的捷径这种方法一开始“累” ，但绝对有效。 培养你的判断能力，也是在积累你的经验和知识 。毕业的时候，你会脱胎换骨。 2、方法的选择方法选择原则 针对性强：一对 一解决问题 简为上 不求全推荐 A 照搬现成方法 B 重新建立方法 C 改动已有方法 D 改动中容易出现 的问题如何做实验记录实验记录表格化：便于统计和随时 总结 1. 原始记录表 2. 单项归纳表 3. 汇总表
5、推荐使用Excel表和SPSS表1、原始记录表（流水账） No指 标标NameSexAgeHeightWeightBMIBP123456789102、单项归纳表（阶段小结/3m）No指标标NameSexAgeHeightWeightBMIBPX均值值S标标准差N个数组别组别3、汇总表（论文中的表）No指标标组组数个数AgeHeightWeightBMIBP组组1 X均值值 S标标准差 X2卡方值值 P值值 df自由度 组组2 X均值值 S标标准差 X2卡方值值 P值值 df自由度 X均值值S X2 P dfAge Height Weight BMI BP TGFmRNA TGF蛋白如何分析结果
6、得出结论如何面对结果 与预计相符的结果 与预计不符的结果- 禁止舍弃部分数据使 之与设想相符 直观结果与统计结果 补漏 扩充和深化课题如何解释结果 数据核实与误差分析 (区分偶然误差和系 统误差) 方法评估 找到支持或反对自己 论点的主要证据 不怀疑并充分重视新 发现结果无法重现怎么办？我们在实验过程中，确实也发现某些实验数据较难重复。 原因： 1.试剂纯度不符合要求或使用了不同批次、厂商的试剂 ； 2.实验对象有变：动物品系不纯、细胞来源不明 3.反应的操作存在误差：这突出表现在称量、加样等环 节； 4.为了保证实验数据的可重复性，我们必须遵循或者建 立一套标准的反应流程(Manuals o
7、f Operation Protocols Standard, MOPS)。 5.按照一套标准的实验方法进行操作，对于新进实验室 的同学更为重要。因为失败是新手们的常事。 6.研究生通病：改MOP 为什么技术员老师次次都能做出来的实验我不能？ 发表论文时，详写操作，试剂，目的是为保证别人重 现结果。因此，自己的实验在同一条件下进行。 事实上，很多文献的处理方法是不完善的，也在不断 变化的。所以才会有专门的丛书来总结。进入实验室 时间较长的人，都会发现有些文献的结果是很难重复 的仔细研究他们的实验方法，你会发现有些操作是完 全没有必要的，有些是错误的，当然也有可能作者有 所保留。 提高我们的实验
8、室素养，其中之一就在于判断文献的 正确与否，而不是盲从。实验室三宝：笔、本、签1.记号笔要随身带。试管，试剂瓶等用一个编 号一个，不要怕麻烦，一目了然，总比绞尽 脑汁好。 2.小本或纸，最好用原始记录本。作一步写一 步，有了灵感马上记下来。下班前往记录本 上写。不要明日复明日。 签（最好多种颜色）。有时记号笔写不了， 或是需要保存，最好贴上签，并在本上记录 好。最后，细节决定成败！ 比如实验中如果要用酸度计,务必遵守酸度计 的使用条件如温度湿度等。 实验结束了，分析结果不对，我从缓冲液试 剂一路找来，最后竟发现只是天气变冷了而已 ； 每一次错误后都要认真找原因，再没有找到原 因前不要急着进行下
9、一次试验。 “郁闷啊” 错误发生后不要气急败坏 ，这样不利于吸取教训。也可能传染他人合 作 Always think of others! Its a small world! Be popular! 各有所长、分工合作 帮助别人等于帮助自己 有团队就有纪律团队精神体现在每天离开实验室应该注意： 该放回冰箱的东西是否放回了？冰箱门是否 关严了？ 公用的东西是否还原了？要清洗的仪器、瓶 子是否泡上了？试验台面是否清理了？ 仪器的使用记录是否及时写了？电源是否关 掉了？ 门窗是否关好了？交流和表达 习惯表现自己 学会口头表达 表达欲是思考的开始，迫使自己不断 整理、归纳、总结 No silent
10、English! Try to ask questions in English Improved your written ability by E- mail表达三境界 第一境界 “千呼万唤始出来，犹抱琵琶半遮面”： 背对听众，按照精心准备的ppt内容，朗读。 第二境界 “删繁就简三秋树，领异标新二月花”： 提纲式ppt，讲演内容完全背下来，面对听众侃侃 而谈，但无眼神交流。 第三境界 “攻书破万卷，张口/下笔如有神” ：完全 脱离文稿，用简明而通俗的语言表达自己的理解 。安全与个人防护基本原则： 1. “以人为本” 2. 物归原处 3. 保护他人就是爱护自己 4. 环保：公共空间+环境
11、5. 杜绝不良操作 6. 实验室十大安全隐患爱护设备，切忌自作主张 有个同学上学作核磁的时候，一不小心把核磁管打断了 。按学校规定要赔一半，要400多元。好伤心啊！没完 另一个同学看断掉的半根核磁管很好玩，就把它放 进核磁仪里，然后就再也拿不出来了。那可是日本进口 的人来了，又是飞机，又是宾馆。更伤心 有个博士生特自信，不服指导，结果把超速离心机的中 轴“离” 弯了这次惨了，分析中心的主任不干了。最后 中心、导师和小两口各掏2万多；郁闷啊 所以，高级仪器可不是好玩的！如何撰写论文论文类型 综述 论著 论著摘要和快报 病例报告 技术和方法 专论 讲座杂志种类 权威杂志 一级期刊 学报 专业杂志
12、地方性刊物 综述性刊物 国际期刊论文评价SCI 引用情况：SCI (science citation index) 被收录情况（Medline; PubMed; BA; CA etc)：影响面扩大 论文类型评价：论著第一；快报第二； 新病种或亚型第三、新方法或新改进第 四 有价值的病例报告：新病种、新变异病 例、罕见病大家系或新疗法首报如何写综述文献准备 书、综述、论著、快报、 摘要 5年以内占2/3；当年1-2 篇； 立论关键要求出自权威刊 物；最新内容可出自快报 、文摘和个人交流；网络 内容须辩真伪 归类、整理、与自己体会 和资料对比文献阅读方法 复习综述 浏览摘要 精读经典的和新的论著
13、吸取部分：结论明； 结果新；方法略 关键要准确理解，寻找 和立论的有机联系写综述的步骤 前言讲义式语言：主题和相关背景、存 在问题、本题在该领域的地位 正文描述性语言：引用文献确切；排列 资料整齐：提示可能机制：推测将来方向 小结明确简练：“已解决有争议.待 解决.关键在于”撰写论著步骤 前言：概略背景、存在问题、引出课题 对象和方法：叙述简明，他人所创方法仅标出 处，新方法详述（包括试剂来源），注明统计 学方法。 结果：详述，但不必罗列所有的原始数据，总 结结果有条理。尽量使用图（示范图和示意图 ）、表（结果统计表） 讨论：与前人相符、不符、新发现，解释和推 测（最有 个人色彩，最体现作者功
14、力） 致谢：良好的习惯临床研究（选自NEJM ）例1：191例急性横纹肌溶解症回顾性波士顿儿 童医院 Pediatrics, 2006, 118(5):2119 表现：肌病45%；发热40%；病毒感染39% 病因：病毒性肌炎38%；外伤26%；结缔组织病 5% 中位年龄：11y；急性肾衰4.7%-而首次尿液亚铁 血红素2+者，无一例肾衰！ 其他有统计学意义的检查：肌酐激酶 提示：急性横纹肌溶解症病因，儿童与成人不同 ，急性肾衰比例远低临床研究（选自NEJM ）例2：联合用药治疗非伤寒沙门菌感染1例，台湾 Pharmacotherapy, 2006, 26(1):1617 已有：单用三代头孢，氟
15、喹诺酮类治疗非伤寒沙 门菌感染失败！ 已有：联合二种治疗其他感染成功 尚无：联合二种治疗非伤寒沙门菌感染 第一例成功：男，60y，表现 ，经验性治疗不奏 效 ；血培养-霍乱沙门菌，单药治疗 无效； 药敏试验（纸片扩散） ，联合用药 OK!如何申请基金基金种类与来源 国家自然科学基金 国家教委基金 其他部委特设项目 国家863和九五攻关 地方省市级科委 企业横向课题/个人 名义人才基金 国际组织和民间基金 会中标基金特点 新、高、特、小 有我国特色 国家投资热点 有潜在应用前景 有连续性 与国际合作 跨大学科申报程序和注意事项 程序：每年1月下达，3月上报。一式9份，无高 级职称者需2名高职推荐。 仔细阅读填表说明，格式不符预审落选：1/3 立论：了解最新进展，避免低水平重复，注意学 科发展方向和鼓励研究领域 根据课题内容、性质分类归口申请：扬长避短和 注意学科交叉 文字：通俗化。对标题、摘
