血球计数板使用及相关计算

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1、 血球计数板的使用方法步骤1镜检计数室。在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。 若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;2加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的 盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻片边缘 ,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生气 泡,多余培养液可用滤纸吸去;3计数。稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部沉降到 计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下 找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。1每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计 数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。2从试管中吸出培养液进行计数之前,要将

2、试管轻轻震荡 几下,这样使酵母菌分布均匀,求得的培养液中的酵母菌数 量误差小。3如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当对培养 液进行稀释。具体方法是:摇匀试管,取1mL酵母菌培养液 ,加入成倍的无菌水稀释,稀释n倍后,再用血球计数板计 数,所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有45个酵母 细胞为宜。4活酵母有芽殖现象,若芽体达到母细胞大小的一半时, 即可作为两个菌体计数,若芽体小于母细胞一半时为1个酵 母细胞。5对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上 的菌体数,一般可采取“数上线不数下线,数左线不数右线 ”的原则处理,另两边不计数。6计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计

3、算 ,对每个样品可计数三次,再取其平均值。7血球计数板的清洁 血球计数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗 后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇、无水乙醇 、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内 是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复清洗 直到干净为止。例1、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若 计数室为1mm1mm0.1mm方格,由400个小方格组成 ,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先 后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有 5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。 (参考答案:稀释;2108)5400100001021

4、08 。例2、 检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法 检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管 吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余 液体。已知每个计数室由2516400个小格组成,容纳 液体的总体积为01 mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个mL 。 (参考答案:5n105 )解析三:从例4来看,是按照血球计数板的原理进 行设计试题的,还添加了相应的图示,题意一目 了然。按照前面所述的公式,不难得出正确答案 :酵母细胞个数1mL80个小方格细胞总数/ 80 40010000稀释倍数n/804001000010 5n105 。例3、(2008江苏高考31) (4)在整个实验过程中,直接从静置的培养瓶中取培 养原液计数的做法是错误的,正确的方法是 和 。(5)实验结束后,用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板 的做法是错误的,正确的方法是 。(参考答案(4)摇匀培养液后再取样 样液稀释后再计 数(5)浸泡和冲洗)

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