《中国药科大学 药物分析课件（第六版） 第四章 药物定量分析与分析方法验证》由会员分享，可在线阅读，更多相关《中国药科大学 药物分析课件（第六版） 第四章 药物定量分析与分析方法验证（27页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第四章 药物定量分析与分析方法验证China Pharmaceutical University 中国药科大学药物分析教研室中国药科大学药物分析教研室第四章 药物定量分析与分析方法验证定量分析样品前处理方法定量分析方法特点 药品质量标准分析方法验证123中国药科大学药物分析教研室一、定量分析样品前处理方法Pretreatment of sample used in quantitative analysis定量分析样品前处理方法概 述12中国药科大学药物分析教研室泛影酸碘番酸碘苯酯概 述中国药科大学药物分析教研室概 述磺溴酞钠三氯叔丁醇中国药科大学药物分析教研室酒石酸锑钾富马酸亚铁概 述中国药
2、科大学药物分析教研室概 述含金属有机药物卡巴胂 金属有机药物中国药科大学药物分析教研室定量分析样品前处理方法直接测定法含金属或C-M不牢固的有机金属 经水解后测定法卤素联脂肪碳链（溶于适当溶剂再水解 ）直接回流后测定碱化回流后测定硫酸水解后测定 经氧化还原后测定法卤素联芳环牢固（一般用于测碘）碱性还原后测定法如泛影酸酸性还原后测定法如碘番酸利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量不经有机破坏的分析方法:中国药科大学药物分析教研室经有机破坏的分析方法湿法破坏HNO3-HClO4HNO3-H2SO4H2SO4-MSO4 金属以高价态存在干法破坏：无水碳酸钠或氧化镁，注意温度 氧瓶燃烧法中国药科大
3、学药物分析教研室空心A.燃烧瓶 B.铂丝网 C.D.盛固体样品滤纸及其折叠法 E.F.G.称取液体样品方法7mm50mm30mm尾部 7mm13mm 20mm25mm356mm166mm滤纸滤纸AGFEDCB氧瓶燃烧装置及称样方法中国药科大学药物分析教研室氧瓶燃烧法样品 吸收液 测定方法含氟有机药物 H2O pH4.3 HAc-NaAc Buffer 茜素氟蓝分光光度法含氯有机药物 NaOH溶液 银量法 汞量法 分光法含溴有机药物 H2O2-NaOH液或NaOH液- 银量法 分光法硫酸肼饱和液含碘有机药物 NaOH液- 银量法 碘量法硫酸肼饱和液 汞量法 分光法中国药科大学药物分析教研室碘苯酯
4、含量测定取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破 坏，用NaOH T.S. 2ml与H2O 10ml为吸收液，待吸收完全 后，加溴醋酸溶液10 ml，密塞，振摇放置数分钟，加甲酸 约1ml，用水洗涤瓶口，并通入空气流约35min，以除去 剩余的溴蒸气，加KI 2g，密塞，摇匀，用Na2S2O3液 (0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定 至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的 硫代硫酸钠液(0.02mol/L)相当于1.388mg的C19H29IO2中国药科大学药物分析教研室二、药品质量标准分析方法验证p 指导原则p 药品质量标准分析方法验证p 药
5、物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则p 药物稳定性试验指导原则p 缓释、控释制剂指导原则p 微囊、微球与脂质体制剂指导原则p 细菌内毒素检查法应用指导原则中国药科大学药物分析教研室第三节 药品质量标准分析方法验证目的： 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求效能指标：评价分析方法的尺度效能指标包括: 精密度, 准确度, 检测限,定量限,选择性,线性与范围, 耐用性中国药科大学药物分析教研室(1)准确度（accuracy）：测量值与真实值接近的程度表 示: 回收率测定方法：回收试验加样回收试验中国药科大学药物分析教研室(2)精密度（precision ）：定 义: 同一样品多次测量值之
6、间相互接近的程度 表 示：标准偏差(s), 相对标准偏差(RSD) 重复性: 同一实验室,同一人多次测定的精密度 中间精密度: 同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度 重现性:不同实验室，不同人测定的精密度中国药科大学药物分析教研室(3)专属性（specificity）:指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性)。中国药科大学药物分析教研室(4) 检测限（limit of detection， LOD）：药物能被检出的最低浓度(g/ml)测 定: 信噪比法(S:N=3:1)(5) 定量限（1imit of quantitation，LOQ）：药物能
7、被定量测出的最低浓度(g/ml)测 定: 信噪比法(S:N=10:1)第三节 药品质量标准分析方法验证-性能指标中国药科大学药物分析教研室(6) 线性与范围（linearity and range）：待测物浓度与响应值成线性关系的浓度范围 线性关系：Y=a+bx （r=0.9999)线性程度：相关系数 (7) 耐用性（robustness）: 测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和 pH，商品柱的品牌，柱温等第三节 药品质量标准分析方法验证-性能指标中国药科大学药物分析教研室检验项目和验证内容：项目内容 鉴别杂质测定含量测定及溶出 量测定定量限度准确
8、度精密度重复性中间精密度 专属性检测限 定量限线性范围耐用性 已有重现 性验证， 不需验证 中间精密 度 如一种方 法不够专 属，可用 其他分析 方法予以 补充 视具体情 况予以验 证中国药科大学药物分析教研室第四节 生物样品分析的基本步骤1. 药物从蛋白结合或缀合物中释出 蛋白变性：如应用三氯醋酸、HClO4、有机溶 剂(乙醇、丙酮、乙腈)使蛋白沉淀 盐酸水解 酶消化法：最常使用蛋白水解酶中枯草菌溶 素(一种细菌性蛋白分解酶，可在pH 7.011.0 使肽键降解)中国药科大学药物分析教研室中国药科大学药物分析教研室定量分析方法的验证-生物样品分析（一）特异性内源性物质不得干扰原药、代谢物（二
9、）标准曲线r0.9900，至少5个浓度，不许外延（三）精密度和准确度RSD15、20相对回收率85115（80120）中国药科大学药物分析教研室（四）最低定量限LOQ35倍t1/2，或1/101/20倍Cmax（五）样品稳定性室温、冻融、冰冻长期（六）提取回收率（绝对回收率）一般低于100，须稳定（七）质控样品已知浓度样品均匀放入待测生物样品序列中，以 确保定量测定的准确度定量分析方法的验证-生物样品分析中国药科大学药物分析教研室样品 固相净化 及 反相高效液相色谱法 测定血浆中茶碱伍朝筼等 药学学报,1989,24(10):769773中国药科大学药物分析教研室血浆样品 净化后空白血浆 净化前空白血浆Column Zorbax C18 5m 2.5cm4.6mm 254nm Precolumn YWG-ODS 9-11m 54.6mm Mobile Phase:甲醇-醋酸钠(0.05mol/L pH3.0)500512 8 4 0min茶碱咖啡因12 8 4 0min12 8 4 0min中国药科大学药物分析教研室50 100 150 200252015105茶碱(g/ml)(min) 五例病人血浆茶碱 浓度测定6.412.8 19.225.6 3232.41.81.20.60 茶碱(g/ml) 标准曲线Y=9.56610-2X+6.15310-3 r=0.9995
