《[医学保健]角蛋白结构功能与角蛋白遗传病》由会员分享，可在线阅读，更多相关《[医学保健]角蛋白结构功能与角蛋白遗传病（126页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改。 http:/ http:/ http:/ http:/ http:/ /1角蛋白角蛋白结构功能结构功能 与角蛋白遗传病与角蛋白遗传病西安交通大学第二附属医院皮肤科西安交通大学第二附属医院皮肤科2角蛋白结构与功能角蛋白遗传病基因突变和临床系列研究3角蛋白简介角蛋白是上皮细胞的主要结构蛋白,构成细胞骨架中间丝(微丝、微管、中间丝)4角蛋白目前已知49种,34种细胞角蛋白,15种毛 发角蛋白n型或酸性角蛋白(细胞角蛋白K9-10, K12-20,K23;毛细胞角蛋白Ha)Ha1-8 ,共25种n型或碱性角蛋白(细胞角蛋白K1-K8;毛细胞角蛋白Hb)
2、Hb1-6 ,共24种 5研究背景K1,K10 角化上皮的基底上层 BCIE/EH,DNEPPK K2e 角化上皮基底上层的终末分化细胞IBS K2p 硬腭特异性角蛋白 未发现 K3,K12角膜特异性角蛋白 MCD K4,K13非角化的复层鳞状上皮 如食道 WSN K5,K14表皮基底角质形成细胞,复层上皮 EBS K6a,K6c-f,K16掌跖,粘膜,伤口愈合时,表皮附属器 PC-1 K8,K18 单层上皮 如肝,肾 隐匿性肝硬化 K9掌跖表皮 EPPK K15基底角质形成细胞 未发现 K17,K6b表皮附属器,甲床,掌跖 PC-2 K19单层上皮,表皮附属器 未发现 K20胃肠道上皮 未发
3、现 hHb6,hHb1皮质毛细胞 念珠状发角蛋白 主要表达组织 疾病7角蛋白的结构 nI型:nII型:nL1、L2、L12 连接区(Linker domains)n1A、1B、2A、2B 螺旋区(Helical domains)nV1、V2 可变区(Variable domains)nH1、H2 同源区( Homology regions)nISIS ISIS基元 (ISIS motif)nS 反向螺旋序列(Stutter sequence)n HIP/HTP2A2A研究背景角蛋白基因结构nI型:nII型:exonsexons 1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8in
4、tronsintrons 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 exonsexons 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9intronsintrons 1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8 研究背景101112角蛋白不同结构区氨基酸数统计角角 蛋蛋 白白V V1 1HH1 11A1AL L1 11B1BL L12122A2AL L2 22B2BHH2 2V V2 2K16441443635111021719812120131K26451483635121011719812120128K3629162363514101
5、171981222095K4534115363511102171981212050K5590132363512101171981212089K105611327351410116198121 108K144721087351110116198121 46K17432777351110116198121 3713n角蛋白序列的保守性1. 不同个体之间的保守性:1A起始部和2B末端 15-20aa2. 不同角蛋白之间的保守性螺旋起始区: I型 1A区第7个aa始 LNDRLASYII型 LNNKFASY螺旋终止区: EIATYRKLLEGE(如K1 2B末 端倒数第5个氨基酸)14角蛋白功能n参与
6、上皮细胞角化、分化;n机械性支持维持细胞形态;n细胞内物质运输、信息传递15角蛋白基因敲除小鼠的表型 角蛋白基因敲除角蛋白基因敲除表 型表 型 K4白色海绵绵状痣 K5表皮基底层细层细 胞溶解 K6a创伤创伤 愈合延迟迟 K6a/K6b舌上皮脆性增加 K8胚胎死亡（C57BL/6小鼠） 大肠肠增生（FVB/N小鼠） K8/K19胎盘盘缺陷，胚胎死亡 K10表型轻轻微异常，无细细胞溶解 K12角膜脆性增加 K14表皮基底层细层细 胞溶解 K17暂时暂时 性脱发发 K18肝脏脏病变变K19无异常表型16角蛋白与疾病角蛋白 疾 病 K1、K10 大疱性鱼鳞病样红皮病 K5、K14 单纯型大疱性表皮松
7、解症 K6、K16、K17 先天性厚甲 K8、K18 隐匿性肝硬化 K9 表皮松解性掌跖角化症 hHb6、 hHb1 念珠状发 K7、K15、K19、K20 不清楚17讨论角蛋白中间丝的装配讨论角蛋白遗传病基因突变和临床系列研究20技术路线和实验方案n患者家系基因突变分析收集患者家系临床资料、病理标本、采集外周血 提取外周血基因组DNA PCR扩增外显子 DNA序列分析 患者正常人同源性分析 确定基因突变位点 排除多态性 21n先天性厚甲症(Pachyonychia congenita,PC)是一组常染色体显性遗传病,特点是甲营养不良和不同程度的外胚叶发育不良。22根据临床表现主要分为两型根据
8、临床表现主要分为两型nPC-1表现为厚甲伴有局灶性掌跖角化、口腔粘膜白斑等。nPC-2除具有PC-1的特征外还伴有胎生牙和多发性脂囊瘤。多发性脂囊瘤是PC-2最好的鉴别特征。23nPC患者的厚甲通常是在出生后头几个月出现 。一些PC患者甲改变发生较晚,称为迟发性先天性厚甲。 n多发性脂囊瘤通常在青春期发生。n研究发现,PC-1由于角蛋白K16、K6a基因突变所致,PC-2由于角蛋白K17、K6b基因突变所致。24先证者及其子的厚甲25先证者头部多发性脂囊瘤 26先证者及其子的多发性脂囊瘤27先证者及其子的局灶性掌跖角化 282930研研 究究 方方 法法311. 血样采集采集家系成员(包括9例
9、患者、1例正常人)外周血35ml,2EDTA抗凝,-70冷冻保存。另外抽取正常对照50人份外周血做同样处理。322. 外周血基因组DNA提取用全血基因组DNA纯化试剂盒提取基因组DNA。 333. 聚合酶链反应(PCR) n选择并合成引物:引物合成参照Mclean WH等在 Nature Genetics 上的文献。上游引物K17p8和下 游引物K17p10。n这对引物可使角蛋白K17基因外显子1及其侧翼 序列得到选择性扩增,扩增出978bp的DNA片段,并且避免了扩增两个假基因K17B和K17C。 34K17P8和K17P10扩增的DNA片段稀释1:10000倍作为巢式PCR模板。巢式PCR
10、的上游引物序列为: 5-GCTGCTACAGCTTTGGCTCT- 3;下游引物序列为5-CACGACGTTGTAAA ACGACCAGTCACGGATCTTCACC- 3。 35nPCR反应:总体积为50l,反应液成分包括5l 缓冲液,10mmol/L dNTP 1l,25mol/L上、下 游引物各1l, Taq酶0.5l(2.5U),25 mmol/L MgCl2 5l,模板10l。n反应条件:36上个世纪末,本世纪初，1996 年,清华学界对中医气本质，经络实质，阴阳，五行，藏象，中医哲学观等都有了新的全面整体创造性的认识和解说。如，邓宇等发现的:气是流动着的信息能量物质的混合统一体；分
11、形分维的经络解剖结构；数理阴阳；中医分形集：分形阴阳集阴阳集的分形分维数，五行分形集五行集的分维数；分形藏象五系统暨心系统、肝系统、脾系统、肺系统、肾系统；中医三个哲学观新提出的第三哲学观：相似观分形论等。 还包括近代针灸经络的发展史,近代中医气的进展简史,中西医结合史,中医中药史等.在明朝（1368 年1644 ），著名医学家李时珍的医学巨著本草纲目成书，这本书不仅是药物学专着，还包括植物学、动物学、（45传染病q566 丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）矿物学、化学等方面的知识。本草纲目刊行后很快传入日本、朝鲜及越南等亚洲地区，（df肺 25s血液f369血小板t5172 红血球gdf55m 白血球fd2）在公元17、18世纪先后被翻译成多种欧洲语言。另一方面，李时珍是世界上第一个提出大脑负责精神感觉、又发现胆结石病、利用冰敷替高热病人降温以及发明消毒技术的医学家。此外还有王叔和的脉经、皇甫谧的针灸甲乙经、陶弘景的本草经集注、葛洪的肘后备急方、巢元方的诸病源候论、苏敬的新修本草 （df肺25s血液f369血小板t5172 红血球gdf55m 白血球fd2）、王焘的外台秘要、元丹贡布的四部医典、太平圣惠方、王惟一的铜人腧穴针灸图经等大量医学典籍问世。自明朝中医发展已经达到了顶峰，（45传染病q566 丙肝964jo乙肝28jgsx
