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1、贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室诊断学（第八版）P285第三章 血栓与止血检测医学检验检验学系 孙艳丽孙艳丽 E-mail： Tel: 8462519 贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室教学内容第一节 血管壁检测第二节 血小板检测第三节 凝血因子检测第四节 抗凝系统检测第五节 纤溶活性检测第八节 检测项目的选择和应用贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室教学目的与要求（3学时）掌握内容： 掌握血管、血小板、凝血因子、抗凝系 统、纤溶活性检测项目的临床意义。熟悉内容： 各检测项目的原理
2、、方法及参考值。 DIC检查的项目及临床意义。了解内容：止凝血与抗凝血机制。贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室生理状态下血管中流动的血液为什么不凝固？破损的血管为什么能止血？机体内存在着复杂的止、凝血系统 和抗凝系统贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室正常止凝血过程(止凝血机制)有三大因素参 与 一二三血管血小板凝血因子贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室血 管血小板凝血因子血管收缩血小板血栓形成纤维蛋白凝块形成与维持生理性止凝血机制主要包括三个时相：贵阳医学院医学检验系临床血液学教研
3、室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室正常抗凝过程(抗凝机制)有两大因素参与 一二抗凝系统 纤溶系统第一节血管壁检测P285贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室ECECECECEC1、收缩反应：神经、体液调节管腔收缩管腔收缩 血流变慢血流变慢神经反射 体液中的活性物质 出血出血 / /停止停止血管壁的止血作用复习内皮素、血栓烷A2贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室1、收缩反应：神经、体液调节血管壁的止血作用复习贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室ECECECECEC2、激活血小板（vW
4、F）：vWFvWF胶原-vWF-血小板胶原血小板粘附血管壁的止血作用复习贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室ECECECECEC3、促进血液凝固过程：组织因子外源性凝血途径胶 原激活F内源性凝血途径血管壁的止血作用复习贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室ECECECECEC4、抑制纤维蛋白溶解分泌PAI抑制纤维蛋白溶解PAI：纤溶酶原激活抑制剂血管壁的止血作用复习贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室血管壁检测筛检试验1. 出血时间测定（BT）2. 束臂试验(CRT，毛细血管脆性试验)贵阳
5、医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室1、 出血时间测定（Bleeding time, BT）【原理】测定皮肤受特定条件的外伤后 ，出血自然停止所需的时间即为出血时间 。是反映毛细血管壁 和血小板止血功能 常用的筛选试验。贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室【参考值】出血时间测定器法(6.92.1)min， 超过9min为异常40mmHg(30-60)s【方法】出血时间测定器法贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室受血小板数量和血管壁影响。出血时间延长：血小板数量、功能异常：血小板无力症（ GP
6、IIb/IIIa缺乏或减少）血管壁异常：遗传性毛细血管扩张症综合因素：vWD（血管性血友病）、DIC出血时间缩短：见于某些严重的高凝状态或血栓性疾病 ：脑血栓、心肌梗死、糖尿病、高血脂、下肢 静脉栓塞、DIC高凝期【临床意义】贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室2、束臂试验又叫毛细血管脆性试验（capillary fragility test, CRT） 、毛细血管抵抗试验（capillary resistance test, CRT）。 【原理】 毛细血管的完整性与其本身的结构、功能，血小 板的质、量，以及一些体液因素有关。用加压的方法来部分阻止静脉血液回
7、流，可以根 据一定范围内新出血点的数目及大小来估计毛细血管 的脆性。P285贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室【参考值 】阴性： 5cm直径圆圈中的出血点数：男性少于5个；女性及儿童少于10个(12-13.5)kPa/(90-100)mmHg)8min【操作】 贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室【临床意义】新出血点超过正常为阳性，见于：血管壁的结构和（或）功能缺陷：遗传性毛细血管扩张症、vWD血小板的量、功能异常血小板减少症 、血小板功能缺陷症贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室（一
8、）血管性血友病因子抗原测定（vWF：Ag）【原理】（1）免疫火箭电泳法：在含在含vWF抗体的琼脂糖凝胶板中加入一定量受检血浆（vWF抗原），在电场作用下，泳动一定时间，出现抗原-抗体反应形成的火箭样沉淀线，其高度与受检血浆中vWF的浓度呈正相关，计算出vWF：Ag的含量。（2）酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断试验贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室诊断试验 （一）血管性血友病因子抗原测定（VWF：Ag） 【参考值】94.1%32.5%。【临床意义】减低:见于vWD,是诊断vWD及其分型的指标之一。增高:见于血栓性疾病及血栓前状态,如心肌梗塞、心绞痛、脑血管
9、病变、糖尿病等。第二节血小板检测P287贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室复习血小板结构贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室复习血小板结构贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室vWF胶原 Adhesion内皮细胞 endothelium基 底 膜GPa-aGPb-Resting Platelet血小板粘附模式图（一）黏附功能复习血小板的止血作用贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室vWFResting Platelet ADPGPActivated Pl
10、atelet oneActivated Platelet twoGPb-aAggregation二. 聚 集 功 能 aGPb-aFibrinogen+血小板聚集模式图胶原Ca2+贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室Ca+RestingPlateletADPActivated Platelet releasesa三. 释 放 反 应颗粒： -TGPF4TSP 致密颗粒：ADPP-selectinCa2+血小板释放模式图release贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室四 . 促 凝 作 用a CaaaFgActivated
11、 Plateletaa CaFIBRIN CLOTPF3PF3a- -Ca2+PF3Coagulationa-a Ca2+PF3凝血活酶血小板促凝作用模式图贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室五. 血 块 收 缩 功 能血小板血块收缩功能模式图贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室血小板检测 筛选试验： 血小板计数 血块收缩试验 诊断试验： 血小板相关免疫球蛋白的测定 血小板粘附功能测定 血小板聚集功能测定贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室1、血小板计数 (platelet count,
12、 PC或BPC，PLT)【参考值】 （100-300）109/LP260贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室血小板减少：血小板生成障碍：见于造血功能障碍（再障、 急白、急性放射病）血小板破坏或消耗增多：ITP、DIC、TTP血小板分布异常：脾肿大、血液被稀释血小板增多：原发性增多：骨髓增殖性疾病（真性红细胞增 多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化早期、 慢粒）反应性增多：急性感染、溶血、某些癌症患者【临床意义】贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室2、 血块收缩试验 （clot retraction test, CRT） 【
13、原理】血液凝固后，由于血小板释放的血 小板收缩蛋白，使血块收缩，血清析出。测定析出血清量占全血量的百分数来表示血 块收缩的程度，可间接了解血小板功能情况， 此即血块收缩试验（CRT）。血块收缩率=血清（ml）/全血（ml）(100%-Hct%) 100%P288贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室【正常参考值】 定量法（凝块法）：37，1小时其血块收 率为65.8%11.0%定性试验：37，2小时开始收缩，18-24 小时完全收缩（血清占全血1/3-1/2）。贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室完全收缩 部分收缩 收缩不良
14、 不收缩 【结果判断】定性试验贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室血块收缩主要取决于血小板、纤维蛋白原、红 细胞量等因素。血块收缩不良或不收缩（40%）： 血小板数量、异常：血小板无力症、ITP、血小 板增多症 纤维蛋白原异常：低（无）纤维蛋白原血症 红细胞增加：红细胞增多症血块收缩过度(升高)：先天性/获得性缺乏症(？)【临床意义】贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室3、血小板相关免疫球蛋白测定 （platelet associated immunoglobulin, PAIg） 包括： PAIgG、PAIgM、PAIg
15、A【方法】 ELISA法P298贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室【参考值】 PAIgG：（078.8）ng/107血小板PAIgM：（07.0）ng/107血小板PAIgA：（02.0）ng/107血小板贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室本试验是免疫性血小板减少性紫癜诊断 、疗效及预后评估的重要指标，也有助于其 他血小板疾病的免疫机制研究。PAIg增高：q见于ITP、同种免疫性血小板减少性紫癜、 药物免疫性血小板减少性紫癜等。以ITP阳 性率最高。【临床意义】贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临
16、床血液学教研室4、血小板粘附试验 （platelet adhension test, PAdT）【玻璃珠柱法原理】血小板具有体内粘附于内膜下组织或体外粘附于带负电荷物质的性质。当血液通过玻珠柱时，血小板可 粘附在充满玻珠的塑料管内，血中血小板数会因此而 降低。血小板黏附的本质是血小板膜糖蛋白（GP Ib/V/IX）通过vWF与血管内皮下胶原黏附。P288贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室【正常参考值】玻璃珠柱法：62.5%8.6%贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室贵阳医学院医学检验系临床血液学教研室PAdT增高 血栓前状态和血栓性疾病：心梗、糖尿 病、深静脉血栓形成、妊高症、动脉粥样硬 化 PAdT减低 血小板因素：血小板无力症、抗血小板药 止血综合因素：vWD 其他：尿毒症、肝硬化、MDS、急性白
