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1、蔬菜学专业优秀论文蔬菜学专业优秀论文 萝卜游离小孢子培养技术的研究萝卜游离小孢子培养技术的研究关键词：萝卜关键词：萝卜 植物育种植物育种 游离小孢子培养游离小孢子培养 单倍体诱导单倍体诱导 花药预处理花药预处理 胚胎发生胚胎发生摘要：游离小孢子培养技术在植物育种以及相关的基础研究中具有广泛的应用 前景。它是在花药培养基础上发展而来的一种单倍体诱导技术。萝卜是我国栽 培的第三大蔬菜作物，研究萝卜游离小孢子培养对品种改良、加速育种进程具 有重要意义。对萝卜游离小孢子培养研究表明，萝卜属是十字花科作物中最不 容易进行游离小孢子培养成功的材料之一。为了建立高效的萝卜游离小孢子培 养再生体系，本试验对其
2、进行了系统研究。主要研究了基因型、植株生长条件、 花药预处理、胚性小孢子选择、培养基及培养条件对萝卜小孢子培养中胚胎发 生及再生的影响。 通过研究得出如下结论： (1)基因型是限制萝卜游离小 孢子培养成胚的主要因素，在所研究的 38 个基因型中，共在 9 个基因型中获得 了胚状体及再生苗，占全部材料的 23.68；这些基因型分属于秋青、春白、 心里美 3 种类型。 (2)植株生长条件影响萝卜小孢子培养的成胚率，春季取 材进行培养比冬季取材成胚率高。 (3)适合小孢子培养的时期为单核晚期， 花蕾大小在 24mm 之间，而且不同萝卜品种适合培养的花蕾大小不同；正确地 选择适合胚胎发生能力高的小孢子
3、是萝卜游离小孢子培养得到小孢子胚的关键 所在，即选择胚性小孢子是小孢子培养成功的关键，试验中发现利用 Percoll 密度梯度离心法分离胚性小孢子是有效的方法，萝卜胚性小孢子主要集中在浓 度为 1.055g/cmlt;#39;3gt;和 1.068 g/cmlt;#39;3gt;之间。 (4) 4z低温条件下处理 3 天的小 孢子可保持较高的存活率；培养基中添加活性炭、蔗糖可以提高萝卜小孢子存 活率。 (5)花药预处理可以提高成胚率：预处理对萝卜游离小孢子培养的影 响最大，是萝卜游离小孢子成胚的关键因素，未经预处理时 38 个基因型的萝卜 中，仅有 4 种基因型得到了胚状体，占 10.53，经
4、对花药进行不同的预处理 后有 9 种基因型的萝卜得到了小孢子胚，占 23.68，提高了 13.15 个百分点， 并且以 Blt;,5gt;培养基中添加甘露醇或秋水仙素对萝卜花药进行 预处理效果更明显，但不同的基因型对处理的时间及甘露醇、秋水仙素的浓度 要求有差异。 (6)培养条件也是影响萝卜游离小孢子培养成功的重要因素， 本试验中 33热激 24h 或 48h 有利于萝卜小孢子培养成胚。 (7)2,4-D、6- BA 对萝卜游离小孢子培养成胚有促进作用，但不是关键因素。 (8)发育正常 的子叶期胚能够成苗，成苗率达到 100，而畸形胚的成苗率仅有 50。 (9)本 试验筛选出萝卜小孢子成苗培养
5、基：B5-2+0.2mg/L6-BA+0.8琼脂；萝卜小孢 子苗生根培养基为：B5-2+0.2mg/LNAA+0.5琼脂。 (10)萝卜小孢子苗有一 定的自然加倍率，其中秋水仙素预处理花药可以提高萝卜游离小孢子培养再生 苗的加倍率。 (11)再生株以二倍体为主，其比率为 60左右。通过上述研 究，建立了萝卜游离小孢子培养的技术体系。正文内容正文内容游离小孢子培养技术在植物育种以及相关的基础研究中具有广泛的应用前 景。它是在花药培养基础上发展而来的一种单倍体诱导技术。萝卜是我国栽培 的第三大蔬菜作物，研究萝卜游离小孢子培养对品种改良、加速育种进程具有 重要意义。对萝卜游离小孢子培养研究表明，萝卜
6、属是十字花科作物中最不容 易进行游离小孢子培养成功的材料之一。为了建立高效的萝卜游离小孢子培养 再生体系，本试验对其进行了系统研究。主要研究了基因型、植株生长条件、 花药预处理、胚性小孢子选择、培养基及培养条件对萝卜小孢子培养中胚胎发 生及再生的影响。 通过研究得出如下结论： (1)基因型是限制萝卜游离小 孢子培养成胚的主要因素，在所研究的 38 个基因型中，共在 9 个基因型中获得 了胚状体及再生苗，占全部材料的 23.68；这些基因型分属于秋青、春白、 心里美 3 种类型。 (2)植株生长条件影响萝卜小孢子培养的成胚率，春季取 材进行培养比冬季取材成胚率高。 (3)适合小孢子培养的时期为单
7、核晚期， 花蕾大小在 24mm 之间，而且不同萝卜品种适合培养的花蕾大小不同；正确地 选择适合胚胎发生能力高的小孢子是萝卜游离小孢子培养得到小孢子胚的关键 所在，即选择胚性小孢子是小孢子培养成功的关键，试验中发现利用 Percoll 密度梯度离心法分离胚性小孢子是有效的方法，萝卜胚性小孢子主要集中在浓 度为 1.055g/cmlt;#39;3gt;和 1.068 g/cmlt;#39;3gt;之间。 (4) 4z低温条件下处理 3 天的小 孢子可保持较高的存活率；培养基中添加活性炭、蔗糖可以提高萝卜小孢子存 活率。 (5)花药预处理可以提高成胚率：预处理对萝卜游离小孢子培养的影 响最大，是萝卜
8、游离小孢子成胚的关键因素，未经预处理时 38 个基因型的萝卜 中，仅有 4 种基因型得到了胚状体，占 10.53，经对花药进行不同的预处理 后有 9 种基因型的萝卜得到了小孢子胚，占 23.68，提高了 13.15 个百分点， 并且以 Blt;,5gt;培养基中添加甘露醇或秋水仙素对萝卜花药进行 预处理效果更明显，但不同的基因型对处理的时间及甘露醇、秋水仙素的浓度 要求有差异。 (6)培养条件也是影响萝卜游离小孢子培养成功的重要因素， 本试验中 33热激 24h 或 48h 有利于萝卜小孢子培养成胚。 (7)2,4-D、6- BA 对萝卜游离小孢子培养成胚有促进作用，但不是关键因素。 (8)发
9、育正常 的子叶期胚能够成苗，成苗率达到 100，而畸形胚的成苗率仅有 50。 (9)本 试验筛选出萝卜小孢子成苗培养基：B5-2+0.2mg/L6-BA+0.8琼脂；萝卜小孢 子苗生根培养基为：B5-2+0.2mg/LNAA+0.5琼脂。 (10)萝卜小孢子苗有一 定的自然加倍率，其中秋水仙素预处理花药可以提高萝卜游离小孢子培养再生 苗的加倍率。 (11)再生株以二倍体为主，其比率为 60左右。通过上述研 究，建立了萝卜游离小孢子培养的技术体系。 游离小孢子培养技术在植物育种以及相关的基础研究中具有广泛的应用前景。 它是在花药培养基础上发展而来的一种单倍体诱导技术。萝卜是我国栽培的第 三大蔬菜
10、作物，研究萝卜游离小孢子培养对品种改良、加速育种进程具有重要 意义。对萝卜游离小孢子培养研究表明，萝卜属是十字花科作物中最不容易进 行游离小孢子培养成功的材料之一。为了建立高效的萝卜游离小孢子培养再生 体系，本试验对其进行了系统研究。主要研究了基因型、植株生长条件、花药 预处理、胚性小孢子选择、培养基及培养条件对萝卜小孢子培养中胚胎发生及 再生的影响。 通过研究得出如下结论： (1)基因型是限制萝卜游离小孢子培养成胚的主要因素，在所研究的 38 个基因型中，共在 9 个基因型中获得了胚 状体及再生苗，占全部材料的 23.68；这些基因型分属于秋青、春白、心里 美 3 种类型。 (2)植株生长条
11、件影响萝卜小孢子培养的成胚率，春季取材进 行培养比冬季取材成胚率高。 (3)适合小孢子培养的时期为单核晚期，花蕾 大小在 24mm 之间，而且不同萝卜品种适合培养的花蕾大小不同；正确地选择 适合胚胎发生能力高的小孢子是萝卜游离小孢子培养得到小孢子胚的关键所在， 即选择胚性小孢子是小孢子培养成功的关键，试验中发现利用 Percoll 密度梯 度离心法分离胚性小孢子是有效的方法，萝卜胚性小孢子主要集中在浓度为 1.055g/cmlt;#39;3gt;和 1.068 g/cmlt;#39;3gt;之间。 (4) 4z低温条件下处理 3 天的小 孢子可保持较高的存活率；培养基中添加活性炭、蔗糖可以提高
12、萝卜小孢子存 活率。 (5)花药预处理可以提高成胚率：预处理对萝卜游离小孢子培养的影 响最大，是萝卜游离小孢子成胚的关键因素，未经预处理时 38 个基因型的萝卜 中，仅有 4 种基因型得到了胚状体，占 10.53，经对花药进行不同的预处理 后有 9 种基因型的萝卜得到了小孢子胚，占 23.68，提高了 13.15 个百分点， 并且以 Blt;,5gt;培养基中添加甘露醇或秋水仙素对萝卜花药进行 预处理效果更明显，但不同的基因型对处理的时间及甘露醇、秋水仙素的浓度 要求有差异。 (6)培养条件也是影响萝卜游离小孢子培养成功的重要因素， 本试验中 33热激 24h 或 48h 有利于萝卜小孢子培养
13、成胚。 (7)2,4-D、6- BA 对萝卜游离小孢子培养成胚有促进作用，但不是关键因素。 (8)发育正常 的子叶期胚能够成苗，成苗率达到 100，而畸形胚的成苗率仅有 50。 (9)本 试验筛选出萝卜小孢子成苗培养基：B5-2+0.2mg/L6-BA+0.8琼脂；萝卜小孢 子苗生根培养基为：B5-2+0.2mg/LNAA+0.5琼脂。 (10)萝卜小孢子苗有一 定的自然加倍率，其中秋水仙素预处理花药可以提高萝卜游离小孢子培养再生 苗的加倍率。 (11)再生株以二倍体为主，其比率为 60左右。通过上述研 究，建立了萝卜游离小孢子培养的技术体系。 游离小孢子培养技术在植物育种以及相关的基础研究中
14、具有广泛的应用前景。 它是在花药培养基础上发展而来的一种单倍体诱导技术。萝卜是我国栽培的第 三大蔬菜作物，研究萝卜游离小孢子培养对品种改良、加速育种进程具有重要 意义。对萝卜游离小孢子培养研究表明，萝卜属是十字花科作物中最不容易进 行游离小孢子培养成功的材料之一。为了建立高效的萝卜游离小孢子培养再生 体系，本试验对其进行了系统研究。主要研究了基因型、植株生长条件、花药 预处理、胚性小孢子选择、培养基及培养条件对萝卜小孢子培养中胚胎发生及 再生的影响。 通过研究得出如下结论： (1)基因型是限制萝卜游离小孢子 培养成胚的主要因素，在所研究的 38 个基因型中，共在 9 个基因型中获得了胚 状体及
15、再生苗，占全部材料的 23.68；这些基因型分属于秋青、春白、心里 美 3 种类型。 (2)植株生长条件影响萝卜小孢子培养的成胚率，春季取材进 行培养比冬季取材成胚率高。 (3)适合小孢子培养的时期为单核晚期，花蕾 大小在 24mm 之间，而且不同萝卜品种适合培养的花蕾大小不同；正确地选择 适合胚胎发生能力高的小孢子是萝卜游离小孢子培养得到小孢子胚的关键所在， 即选择胚性小孢子是小孢子培养成功的关键，试验中发现利用 Percoll 密度梯 度离心法分离胚性小孢子是有效的方法，萝卜胚性小孢子主要集中在浓度为 1.055g/cmlt;#39;3gt;和 1.068 g/cmlt;#39;3gt;之
16、间。 (4) 4z低温条件下处理 3 天的小孢子可保持较高的存活率；培养基中添加活性炭、蔗糖可以提高萝卜小孢子存 活率。 (5)花药预处理可以提高成胚率：预处理对萝卜游离小孢子培养的影 响最大，是萝卜游离小孢子成胚的关键因素，未经预处理时 38 个基因型的萝卜 中，仅有 4 种基因型得到了胚状体，占 10.53，经对花药进行不同的预处理 后有 9 种基因型的萝卜得到了小孢子胚，占 23.68，提高了 13.15 个百分点， 并且以 Blt;,5gt;培养基中添加甘露醇或秋水仙素对萝卜花药进行 预处理效果更明显，但不同的基因型对处理的时间及甘露醇、秋水仙素的浓度 要求有差异。 (6)培养条件也是影响萝卜游离小孢子培养成功的重要因素， 本试验中 33热激 24h 或 48h 有利于萝卜小孢子培养成胚。 (7)2,4-
