糖尿病大鼠肾脏中cb、cc表达变化及虫草菌粉干预作用的研究

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1、内科学内科学( (肾病肾病) )专业优秀论文专业优秀论文 糖尿病大鼠肾脏中糖尿病大鼠肾脏中 CBCB、CCCC 表达变化及表达变化及虫草菌粉干预作用的研究虫草菌粉干预作用的研究关键词：糖尿病肾病关键词：糖尿病肾病 组织蛋白酶组织蛋白酶 虫草菌粉虫草菌粉 抑制因子胱抑素抑制因子胱抑素 免疫组化免疫组化摘要：目的：研究糖尿病肾病（DN）肾组织中组织蛋白酶 B（CB）及其抑制因 子胱抑素 C（CC）随病程进展的变化情况，并探讨虫草菌粉干预对 CB、CC 表达 的影响。 方法：第一部分：将 wistar 大鼠分成正常组（N 组 n=30）和糖尿 病组（M 组 n=35） ，糖尿病组给予 STZ55mg

2、/kg 腹腔内注射，72 小时后随机血糖 大于 167 m mol/L 为造模成功。两组分别在第 4、8、16 周各处死 10 只大鼠， 在处死前留取 24 小时尿液测 24h 尿蛋白定量，留取血清标本测血肌酐，留取肾 脏标本进行免疫组化和实时荧光定量 PCR 测 CC，CB，CollV，FN 的表达情况。 第二部分：将 100 只健康 wistar 大鼠随机分成正常组（N 组 n=30）和糖尿病 组（n=70） ，糖尿病组造模方法同第一部分，成模后随机分为模型组（M 组 n=30）和治疗组（T 组 n=30） 。并在第 4、8、16 周每组各处死 10 只大鼠，处死 前留取 24h 尿和血标

3、本用以测 24 尿白蛋白、尿肌酐和血肌酐，留取肾脏标本用 免疫组化和实时荧光定量 PCR 检测。 结果：N 大鼠肾组织中 CC、CB、coIIV、FN 的表达随着饲养时间的延长并没有出现明显的变化； CB 在 DN 早期表达增加，随着病程的进展，病情的加重，其表达量下降； CoIIV、FN 随着病程的进展表达逐渐增加；24h 尿蛋白定量逐渐增加。第 8 周 M 组大鼠内生肌酐清除率和 24h 尿蛋白较第 4 周显著上调，免疫组化和 PCR 结果 显示 CB、CC、CoIIV、FN 表达上调。第 16 周时 CB 表达下调，而 CC 显著上调。 相关分析显示 CB 的表达与 24 小时尿蛋白、C

4、oIIV、FN 蛋白表达和 mRNA 表达呈 负相关。 虫草菌粉干预治疗后，对各组大鼠的血糖水平影响不明显，但能延 缓 DN 大鼠肾重和肾重指数的增加，延缓 DN 大鼠体重的下降。在干预的前 4 周， CB、CC、CoIIV、FN 在 N、M、T 的表达无明显的差异，当干预到第 8 周后，各 指标才出现有统计学意义的变化。较 N 组，M 和 T 组大鼠内生肌酐清除率和 24h 尿蛋白第 4 周开始升高，免疫组化和 PCR 结果显示 CB、CC、CoIIV、FN 表 达在第 8 周出现明显上调，M 组 CB 在 16 周下调；T 组的 CB、CC、CoIIV，FN 在 前 8 周较 M 组无显著

5、变化，CC、CoIIV、FN 第 16 周表达下调，CB 的表达上调。 结论：DN 大鼠早期出现尿蛋白排泄量增加，内生肌酐清除率增加；随着病程的 进展，ECM 蓄积增加，DN 大鼠肾脏的病理改变肾小球基底膜弥漫变厚肾小球系 膜基质增多，最终形成小球硬化和纤维化；CC 表达增加，使 CB 的表达减少， 使 ECM 的降解减少，这是引起 DN 肾脏病理改变的主要原因之一。 虫草菌粉 能延缓 DN 大鼠的肾脏肥大，使体重下降速度减缓；并能增加 DN 大鼠肾脏 CB 的表达，降低 CC 的表达，使 ECM 的蓄积减少，这是延缓 DN 肾脏纤维化，延 缓肾功能衰竭的作用机制之一。虫草菌粉对肾脏的保护作用

6、与干预时间成正相 关。正文内容正文内容目的：研究糖尿病肾病（DN）肾组织中组织蛋白酶 B（CB）及其抑制因子 胱抑素 C（CC）随病程进展的变化情况，并探讨虫草菌粉干预对 CB、CC 表达的 影响。 方法：第一部分：将 wistar 大鼠分成正常组（N 组 n=30）和糖尿病 组（M 组 n=35） ，糖尿病组给予 STZ55mg/kg 腹腔内注射，72 小时后随机血糖大 于 167 m mol/L 为造模成功。两组分别在第 4、8、16 周各处死 10 只大鼠， 在处死前留取 24 小时尿液测 24h 尿蛋白定量，留取血清标本测血肌酐，留取肾 脏标本进行免疫组化和实时荧光定量 PCR 测 C

7、C，CB，CollV，FN 的表达情况。 第二部分：将 100 只健康 wistar 大鼠随机分成正常组（N 组 n=30）和糖尿病 组（n=70） ，糖尿病组造模方法同第一部分，成模后随机分为模型组（M 组 n=30）和治疗组（T 组 n=30） 。并在第 4、8、16 周每组各处死 10 只大鼠，处死 前留取 24h 尿和血标本用以测 24 尿白蛋白、尿肌酐和血肌酐，留取肾脏标本用 免疫组化和实时荧光定量 PCR 检测。 结果：N 大鼠肾组织中 CC、CB、coIIV、FN 的表达随着饲养时间的延长并没有出现明显的变化； CB 在 DN 早期表达增加，随着病程的进展，病情的加重，其表达量下

8、降； CoIIV、FN 随着病程的进展表达逐渐增加；24h 尿蛋白定量逐渐增加。第 8 周 M 组大鼠内生肌酐清除率和 24h 尿蛋白较第 4 周显著上调，免疫组化和 PCR 结果 显示 CB、CC、CoIIV、FN 表达上调。第 16 周时 CB 表达下调，而 CC 显著上调。 相关分析显示 CB 的表达与 24 小时尿蛋白、CoIIV、FN 蛋白表达和 mRNA 表达呈 负相关。 虫草菌粉干预治疗后，对各组大鼠的血糖水平影响不明显，但能延 缓 DN 大鼠肾重和肾重指数的增加，延缓 DN 大鼠体重的下降。在干预的前 4 周， CB、CC、CoIIV、FN 在 N、M、T 的表达无明显的差异，

9、当干预到第 8 周后，各 指标才出现有统计学意义的变化。较 N 组，M 和 T 组大鼠内生肌酐清除率和 24h 尿蛋白第 4 周开始升高，免疫组化和 PCR 结果显示 CB、CC、CoIIV、FN 表 达在第 8 周出现明显上调，M 组 CB 在 16 周下调；T 组的 CB、CC、CoIIV，FN 在 前 8 周较 M 组无显著变化，CC、CoIIV、FN 第 16 周表达下调，CB 的表达上调。 结论：DN 大鼠早期出现尿蛋白排泄量增加，内生肌酐清除率增加；随着病程的 进展，ECM 蓄积增加，DN 大鼠肾脏的病理改变肾小球基底膜弥漫变厚肾小球系 膜基质增多，最终形成小球硬化和纤维化；CC

10、表达增加，使 CB 的表达减少， 使 ECM 的降解减少，这是引起 DN 肾脏病理改变的主要原因之一。 虫草菌粉 能延缓 DN 大鼠的肾脏肥大，使体重下降速度减缓；并能增加 DN 大鼠肾脏 CB 的表达，降低 CC 的表达，使 ECM 的蓄积减少，这是延缓 DN 肾脏纤维化，延 缓肾功能衰竭的作用机制之一。虫草菌粉对肾脏的保护作用与干预时间成正相 关。 目的：研究糖尿病肾病（DN）肾组织中组织蛋白酶 B（CB）及其抑制因子胱抑 素 C（CC）随病程进展的变化情况，并探讨虫草菌粉干预对 CB、CC 表达的影响。方法：第一部分：将 wistar 大鼠分成正常组（N 组 n=30）和糖尿病组（M 组

11、 n=35） ，糖尿病组给予 STZ55mg/kg 腹腔内注射，72 小时后随机血糖大于 167 m mol/L 为造模成功。两组分别在第 4、8、16 周各处死 10 只大鼠，在 处死前留取 24 小时尿液测 24h 尿蛋白定量，留取血清标本测血肌酐，留取肾脏 标本进行免疫组化和实时荧光定量 PCR 测 CC，CB，CollV，FN 的表达情况。第 二部分：将 100 只健康 wistar 大鼠随机分成正常组（N 组 n=30）和糖尿病组 （n=70） ，糖尿病组造模方法同第一部分，成模后随机分为模型组（M 组 n=30）和治疗组（T 组 n=30） 。并在第 4、8、16 周每组各处死 1

12、0 只大鼠，处死 前留取 24h 尿和血标本用以测 24 尿白蛋白、尿肌酐和血肌酐，留取肾脏标本用 免疫组化和实时荧光定量 PCR 检测。 结果：N 大鼠肾组织中 CC、CB、coIIV、FN 的表达随着饲养时间的延长并没有出现明显的变化； CB 在 DN 早期表达增加，随着病程的进展，病情的加重，其表达量下降； CoIIV、FN 随着病程的进展表达逐渐增加；24h 尿蛋白定量逐渐增加。第 8 周 M 组大鼠内生肌酐清除率和 24h 尿蛋白较第 4 周显著上调，免疫组化和 PCR 结果 显示 CB、CC、CoIIV、FN 表达上调。第 16 周时 CB 表达下调，而 CC 显著上调。 相关分析

13、显示 CB 的表达与 24 小时尿蛋白、CoIIV、FN 蛋白表达和 mRNA 表达呈 负相关。 虫草菌粉干预治疗后，对各组大鼠的血糖水平影响不明显，但能延 缓 DN 大鼠肾重和肾重指数的增加，延缓 DN 大鼠体重的下降。在干预的前 4 周， CB、CC、CoIIV、FN 在 N、M、T 的表达无明显的差异，当干预到第 8 周后，各 指标才出现有统计学意义的变化。较 N 组，M 和 T 组大鼠内生肌酐清除率和 24h 尿蛋白第 4 周开始升高，免疫组化和 PCR 结果显示 CB、CC、CoIIV、FN 表 达在第 8 周出现明显上调，M 组 CB 在 16 周下调；T 组的 CB、CC、CoI

14、IV，FN 在 前 8 周较 M 组无显著变化，CC、CoIIV、FN 第 16 周表达下调，CB 的表达上调。 结论：DN 大鼠早期出现尿蛋白排泄量增加，内生肌酐清除率增加；随着病程的 进展，ECM 蓄积增加，DN 大鼠肾脏的病理改变肾小球基底膜弥漫变厚肾小球系 膜基质增多，最终形成小球硬化和纤维化；CC 表达增加，使 CB 的表达减少， 使 ECM 的降解减少，这是引起 DN 肾脏病理改变的主要原因之一。 虫草菌粉 能延缓 DN 大鼠的肾脏肥大，使体重下降速度减缓；并能增加 DN 大鼠肾脏 CB 的表达，降低 CC 的表达，使 ECM 的蓄积减少，这是延缓 DN 肾脏纤维化，延 缓肾功能衰

15、竭的作用机制之一。虫草菌粉对肾脏的保护作用与干预时间成正相 关。 目的：研究糖尿病肾病（DN）肾组织中组织蛋白酶 B（CB）及其抑制因子胱抑 素 C（CC）随病程进展的变化情况，并探讨虫草菌粉干预对 CB、CC 表达的影响。方法：第一部分：将 wistar 大鼠分成正常组（N 组 n=30）和糖尿病组（M 组 n=35） ，糖尿病组给予 STZ55mg/kg 腹腔内注射，72 小时后随机血糖大于 167 m mol/L 为造模成功。两组分别在第 4、8、16 周各处死 10 只大鼠，在 处死前留取 24 小时尿液测 24h 尿蛋白定量，留取血清标本测血肌酐，留取肾脏 标本进行免疫组化和实时荧光

16、定量 PCR 测 CC，CB，CollV，FN 的表达情况。第 二部分：将 100 只健康 wistar 大鼠随机分成正常组（N 组 n=30）和糖尿病组 （n=70） ，糖尿病组造模方法同第一部分，成模后随机分为模型组（M 组 n=30）和治疗组（T 组 n=30） 。并在第 4、8、16 周每组各处死 10 只大鼠，处死 前留取 24h 尿和血标本用以测 24 尿白蛋白、尿肌酐和血肌酐，留取肾脏标本用 免疫组化和实时荧光定量 PCR 检测。 结果：N 大鼠肾组织中 CC、CB、coIIV、FN 的表达随着饲养时间的延长并没有出现明显的变化； CB 在 DN 早期表达增加，随着病程的进展，病情的加重，其表达量下降； CoIIV、FN 随着病程的进展表达逐渐增加；24h 尿蛋白定量逐渐增加。第 8 周 M 组大鼠内生肌酐清除率和 24h 尿蛋白较第 4 周显著上调，免疫组化和 PCR 结果 显示 CB、CC、CoIIV、FN 表达上调。第 16 周时 CB 表达下调，而 CC 显著上调。 相