《磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立》由会员分享，可在线阅读，更多相关《磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立（37页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、药理学专业毕业论文药理学专业毕业论文 精品论文精品论文 磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立制备及免疫学检测方法的建立关键词：磺胺二甲基嘧啶关键词：磺胺二甲基嘧啶 单克隆抗体单克隆抗体 胶体金试纸条胶体金试纸条 微球微球- -悬液芯片悬液芯片摘要：目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学 检测方法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免 疫的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀 释法进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为
2、 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并进行纯化。利用制备 的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液 芯片、三种检测 SMZ 残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为 0.3mg/ml，效价为 1：32000。(2)间接竞争 ELISA 的检测限为 0.4ng/ml，IC50 为 4.6ng/ml，检测范围为 1-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、 磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、庆大霉素)交叉反应率小于 0.01，10ng/ml 添加时回收率为 86.0；50ng/ml 添加时回收率为 96.6。(
3、3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为 25ng/ml。(4)通过微球-悬 浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到 0.05ng/ml，检测 范围为 0.1-5ng/ml，10ng/ml 添加时回收率为 113.9；50ng/ml 添加时回收率 为 80.5。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效 价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶牛奶样品中残留检测方法。正文内容正文内容目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检 测方法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫 的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞
4、与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释 法进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并进行纯化。利用制备 的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液 芯片、三种检测 SMZ 残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为 0.3mg/ml，效价为 1：32000。(2)间接竞争 ELISA 的检测限为 0.4ng/ml，IC50 为 4.6ng/ml，检测范围为 1-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、 磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、
5、庆大霉素)交叉反应率小于 0.01，10ng/ml 添加时回收率为 86.0；50ng/ml 添加时回收率为 96.6。(3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为 25ng/ml。(4)通过微球-悬 浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到 0.05ng/ml，检测 范围为 0.1-5ng/ml，10ng/ml 添加时回收率为 113.9；50ng/ml 添加时回收率 为 80.5。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效 价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶牛奶样品中残留检测方法。 目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检测方 法。
6、 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释法 进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并进行纯化。利用制备 的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液 芯片、三种检测 SMZ 残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为 0.3mg/ml，效价为 1：32000。(2)间接竞争 ELISA 的检测限为 0.4ng/ml，IC50 为 4.6ng/ml，检测范围为 1
7、-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、 磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、庆大霉素)交叉反应率小于 0.01，10ng/ml 添加时回收率为 86.0；50ng/ml 添加时回收率为 96.6。(3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为 25ng/ml。(4)通过微球-悬 浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到 0.05ng/ml，检测 范围为 0.1-5ng/ml，10ng/ml 添加时回收率为 113.9；50ng/ml 添加时回收率 为 80.5。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效 价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶
8、牛奶样品中残留检测方法。 目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检测方 法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释法 进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并进行纯化。利用制备 的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液 芯片、三种检测 SMZ 残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为 0.3mg/ml，效价为 1：32000
9、。(2)间接竞争 ELISA 的检测限为 0.4ng/ml，IC50 为 4.6ng/ml，检测范围为 1-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、 磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、庆大霉素)交叉反应率小于0.01，10ng/ml 添加时回收率为 86.0；50ng/ml 添加时回收率为 96.6。(3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为 25ng/ml。(4)通过微球-悬 浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到 0.05ng/ml，检测 范围为 0.1-5ng/ml，10ng/ml 添加时回收率为 113.9；50ng/ml 添加时回收率 为 80
10、.5。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效 价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶牛奶样品中残留检测方法。 目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检测方 法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释法 进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并进行纯化。利用制备 的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液 芯片、
11、三种检测 SMZ 残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为 0.3mg/ml，效价为 1：32000。(2)间接竞争 ELISA 的检测限为 0.4ng/ml，IC50 为 4.6ng/ml，检测范围为 1-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、 磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、庆大霉素)交叉反应率小于 0.01，10ng/ml 添加时回收率为 86.0；50ng/ml 添加时回收率为 96.6。(3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为 25ng/ml。(4)通过微球-悬 浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到 0.05ng/ml，检测 范围为
12、 0.1-5ng/ml，10ng/ml 添加时回收率为 113.9；50ng/ml 添加时回收率 为 80.5。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效 价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶牛奶样品中残留检测方法。 目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检测方 法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释法 进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水
13、并进行纯化。利用制备 的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液 芯片、三种检测 SMZ 残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为 0.3mg/ml，效价为 1：32000。(2)间接竞争 ELISA 的检测限为 0.4ng/ml，IC50 为 4.6ng/ml，检测范围为 1-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、 磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、庆大霉素)交叉反应率小于 0.01，10ng/ml 添加时回收率为 86.0；50ng/ml 添加时回收率为 96.6。(3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为 25ng/ml。
14、(4)通过微球-悬 浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到 0.05ng/ml，检测 范围为 0.1-5ng/ml，10ng/ml 添加时回收率为 113.9；50ng/ml 添加时回收率 为 80.5。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效 价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶牛奶样品中残留检测方法。 目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检测方 法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释法 进行一次亚克隆，得
15、到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并进行纯化。利用制备 的抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金试纸条、微球-悬液芯片、三种检测 SMZ 残留的方法。 结果：(1)经纯化后抗体浓度为 0.3mg/ml，效价为 1：32000。(2)间接竞争 ELISA 的检测限为 0.4ng/ml，IC50 为 4.6ng/ml，检测范围为 1-100ng/ml。与其他药物(磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嗪、 磺胺甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲(口恶)唑、庆大霉素)交叉反应率小于 0.01，10ng/ml 添加时回收率为 86.
16、0；50ng/ml 添加时回收率为 96.6。(3)用该抗体制备的胶体金试纸条检测限为 25ng/ml。(4)通过微球-悬 浮芯片技术建立的竞争性微球检测方法确定的检测限可达到 0.05ng/ml，检测 范围为 0.1-5ng/ml，10ng/ml 添加时回收率为 113.9；50ng/ml 添加时回收率 为 80.5。 结论：本课题制备的磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体特异性强、效 价高；使用制备的抗体建立了磺胺二甲基嘧啶牛奶样品中残留检测方法。 目的：制备小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SMZ)单克隆抗体并建立其免疫学检测方 法。 方法：选用经磺胺二甲基嘧啶-牛血清白蛋白偶联物(SMZ-BSA)免疫的 Ballb/c 小鼠，取其脾细胞与 SP2/O 骨髓瘤细胞进行细胞融合。用有限稀释法 进行一次亚克隆，得到一株特异性分泌 SMZ 抗体的杂交瘤细胞，定名为 4A6E6。通过体内诱生腹水法制备单克隆抗体，收集腹水并
