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1、园林植物与观赏园艺专业毕业论文园林植物与观赏园艺专业毕业论文 精品论文精品论文 短葶山麦冬离体短葶山麦冬离体培养及多糖动态变化研究培养及多糖动态变化研究关键词：短葶山麦冬关键词：短葶山麦冬 茎尖培养茎尖培养 快速繁殖快速繁殖 愈伤组织培养愈伤组织培养 悬浮细胞培养悬浮细胞培养 多糖变多糖变 化化摘要：麦冬是园林中常见的地被植物，也是重要的中草药。本研究以短葶山麦 冬 Liriope muscari(Desne.) Bailey 为试验材料，进行短葶山麦冬快速繁殖、 愈伤组织诱导与继代保持、细胞悬浮培养、愈伤组织多糖提取的方法及多糖的 动态变化研究，同时也进行愈伤组织、组培苗和田间自然生长状态下
2、麦冬多糖 含量比较。其主要研究结果如下： 1 短葶山麦冬快速繁殖技术研究 短葶 山麦冬茎尖分化培养基 MS+BA2.0 mg/L+ NAA0.2mg/L，茎尖分化率高，最高分 化率达到 90。丛生芽增殖培养基选择 MS+BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L 为佳，一定 高浓度的 BA 对麦冬茎尖丛生芽分化起着促进作用。添加了椰子汁的培养基效果 明显好于对照组和添加香蕉泥的培养基。不同蔗糖浓度对短葶山麦冬丛生芽增 殖的差异不大，蔗糖浓度的选择在 20g/L 时较佳。短葶山麦冬壮苗生根培养基 选择 1/2MS+IBA0.5mg/L 时最佳，生根系数达到 6.87。泥炭土为最佳的移栽基 质，福州
3、地区的移栽时间宜选择在 4 月份。 2 短葶山麦冬茎尖愈伤组织的诱 导及其植株再生 通过对不同的外植体(茎尖，块根，叶片，果实)进行诱导发 现，茎尖愈伤组织的诱导率最高达到 80。短葶山麦冬茎尖愈伤组织诱导的培 养基是 MS+2，4-D2.0mg/L+BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L 和 MS+2，4-D1.5 mg/L+BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L，诱导率可以为 87.5。愈伤组织增殖培养基 为 MS+2，4-D0.5-1.0mg/L 时，其增殖系数为 6.53。通过比较选择蔗糖浓度在 20g/L 为佳，在生产成本考虑选择以自来水为水质进行愈伤组织培养。光培养 和暗培
4、养对短葶山麦冬愈伤组织保持的差别不大，以暗培养为主。短葶山麦冬 愈伤组织在培养过程中其愈伤组织生长趋势呈“S” ，在培养过程中，含水率变 化总体呈下降趋势，增殖系数呈上升趋势。 愈伤组织转化的的培养基为未添 加生长调节剂的空白培养基，不同蔗糖浓度下均能出现愈伤组织诱导诱导成体 胚，蔗糖浓度在 30g/L 时为佳。胚性愈伤组织分化与再生植株上，选择 MS+ BA2.0mg/L+IBA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L 的培养基诱导分化率最高，达到 92。 3 短葶山麦冬悬浮培养细胞系的建立与保持 短葶山麦冬茎尖诱导的愈伤组织 为松散型颗粒状，接种量为 0.45g 达到最大增长量的时间短，四
5、种碳源(蔗糖、 葡萄糖、甘露醇和山梨醇)对短葶山麦冬悬浮细胞培养的影响差别不是很大，其 中蔗糖的增殖率最高，达到 252，从成本上考虑，在以后的培养过程适合添 加蔗糖作为碳源。短葶山麦冬悬浮细胞系的生长动态大致呈“S”形。短葶山麦 冬悬浮细胞系培养选择的时间为 10d。 4 短葶山麦冬愈伤组织的多糖提取工 艺优化研究及多糖动态变化研究 短葶山麦冬愈伤组织于 60烘干箱至恒重， 加石油醚，在 65水浴锅中脱色 30min，挥干溶剂，加 12 倍水提取 2 次，每次 30min，加乙醇至浓度为 90。绘制标准曲线为 y=215.78x+0.7977，R2=0.9964。取短葶山麦冬粗多糖样品溶液
6、0.4mL 置干燥试 管中，加入 5苯酚溶液 0.8mL，浓硫酸 4.0mL 摇匀，显色 30min 后，490nm 处 测定吸光值。愈伤组织中多糖的含量总体随着培养时间的增加，多糖含量也随 着增加，在培养时间超过 60d 后，愈伤组织中多糖的含量趋近于稳定。短葶山麦冬愈伤组织在培养 40d-60d 后所得到的多糖含量较好，这个时候的愈伤组织 生长量达到最高速率。通过组织培养所得到的短葶山麦冬块根中多糖的含量要 高于在基地田间自然生长状态下的短葶山麦冬。正文内容正文内容麦冬是园林中常见的地被植物，也是重要的中草药。本研究以短葶山麦冬 Liriope muscari(Desne.) Bailey
7、 为试验材料，进行短葶山麦冬快速繁殖、愈 伤组织诱导与继代保持、细胞悬浮培养、愈伤组织多糖提取的方法及多糖的动 态变化研究，同时也进行愈伤组织、组培苗和田间自然生长状态下麦冬多糖含 量比较。其主要研究结果如下： 1 短葶山麦冬快速繁殖技术研究 短葶山 麦冬茎尖分化培养基 MS+BA2.0 mg/L+ NAA0.2mg/L，茎尖分化率高，最高分化 率达到 90。丛生芽增殖培养基选择 MS+BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L 为佳，一定高 浓度的 BA 对麦冬茎尖丛生芽分化起着促进作用。添加了椰子汁的培养基效果明 显好于对照组和添加香蕉泥的培养基。不同蔗糖浓度对短葶山麦冬丛生芽增殖 的差异不
8、大，蔗糖浓度的选择在 20g/L 时较佳。短葶山麦冬壮苗生根培养基选 择 1/2MS+IBA0.5mg/L 时最佳，生根系数达到 6.87。泥炭土为最佳的移栽基质， 福州地区的移栽时间宜选择在 4 月份。 2 短葶山麦冬茎尖愈伤组织的诱导及 其植株再生 通过对不同的外植体(茎尖，块根，叶片，果实)进行诱导发现， 茎尖愈伤组织的诱导率最高达到 80。短葶山麦冬茎尖愈伤组织诱导的培养基 是 MS+2，4-D2.0mg/L+BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L 和 MS+2，4-D1.5 mg/L+BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L，诱导率可以为 87.5。愈伤组织增殖培养基为 MS+
9、2，4- D0.5-1.0mg/L 时，其增殖系数为 6.53。通过比较选择蔗糖浓度在 20g/L 为佳， 在生产成本考虑选择以自来水为水质进行愈伤组织培养。光培养和暗培养对短 葶山麦冬愈伤组织保持的差别不大，以暗培养为主。短葶山麦冬愈伤组织在培 养过程中其愈伤组织生长趋势呈“S” ，在培养过程中，含水率变化总体呈下降 趋势，增殖系数呈上升趋势。 愈伤组织转化的的培养基为未添加生长调节剂 的空白培养基，不同蔗糖浓度下均能出现愈伤组织诱导诱导成体胚，蔗糖浓度 在 30g/L 时为佳。胚性愈伤组织分化与再生植株上，选择 MS+ BA2.0mg/L+IBA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L 的
10、培养基诱导分化率最高，达到 92。 3 短葶山麦冬悬浮培养细胞系的建立与保持 短葶山麦冬茎尖诱导的愈伤组织 为松散型颗粒状，接种量为 0.45g 达到最大增长量的时间短，四种碳源(蔗糖、 葡萄糖、甘露醇和山梨醇)对短葶山麦冬悬浮细胞培养的影响差别不是很大，其 中蔗糖的增殖率最高，达到 252，从成本上考虑，在以后的培养过程适合添 加蔗糖作为碳源。短葶山麦冬悬浮细胞系的生长动态大致呈“S”形。短葶山麦 冬悬浮细胞系培养选择的时间为 10d。 4 短葶山麦冬愈伤组织的多糖提取工 艺优化研究及多糖动态变化研究 短葶山麦冬愈伤组织于 60烘干箱至恒重， 加石油醚，在 65水浴锅中脱色 30min，挥干
11、溶剂，加 12 倍水提取 2 次，每次 30min，加乙醇至浓度为 90。绘制标准曲线为 y=215.78x+0.7977，R2=0.9964。取短葶山麦冬粗多糖样品溶液 0.4mL 置干燥试 管中，加入 5苯酚溶液 0.8mL，浓硫酸 4.0mL 摇匀，显色 30min 后，490nm 处 测定吸光值。愈伤组织中多糖的含量总体随着培养时间的增加，多糖含量也随 着增加，在培养时间超过 60d 后，愈伤组织中多糖的含量趋近于稳定。短葶山 麦冬愈伤组织在培养 40d-60d 后所得到的多糖含量较好，这个时候的愈伤组织 生长量达到最高速率。通过组织培养所得到的短葶山麦冬块根中多糖的含量要 高于在基地
12、田间自然生长状态下的短葶山麦冬。 麦冬是园林中常见的地被植物，也是重要的中草药。本研究以短葶山麦冬 Liriope muscari(Desne.) Bailey 为试验材料，进行短葶山麦冬快速繁殖、愈伤组织诱导与继代保持、细胞悬浮培养、愈伤组织多糖提取的方法及多糖的动 态变化研究，同时也进行愈伤组织、组培苗和田间自然生长状态下麦冬多糖含 量比较。其主要研究结果如下： 1 短葶山麦冬快速繁殖技术研究 短葶山 麦冬茎尖分化培养基 MS+BA2.0 mg/L+ NAA0.2mg/L，茎尖分化率高，最高分化 率达到 90。丛生芽增殖培养基选择 MS+BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L 为佳，一定
13、高 浓度的 BA 对麦冬茎尖丛生芽分化起着促进作用。添加了椰子汁的培养基效果明 显好于对照组和添加香蕉泥的培养基。不同蔗糖浓度对短葶山麦冬丛生芽增殖 的差异不大，蔗糖浓度的选择在 20g/L 时较佳。短葶山麦冬壮苗生根培养基选 择 1/2MS+IBA0.5mg/L 时最佳，生根系数达到 6.87。泥炭土为最佳的移栽基质， 福州地区的移栽时间宜选择在 4 月份。 2 短葶山麦冬茎尖愈伤组织的诱导及 其植株再生 通过对不同的外植体(茎尖，块根，叶片，果实)进行诱导发现， 茎尖愈伤组织的诱导率最高达到 80。短葶山麦冬茎尖愈伤组织诱导的培养基 是 MS+2，4-D2.0mg/L+BA0.1mg/L+
14、NAA0.5mg/L 和 MS+2，4-D1.5 mg/L+BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L，诱导率可以为 87.5。愈伤组织增殖培养基为 MS+2，4- D0.5-1.0mg/L 时，其增殖系数为 6.53。通过比较选择蔗糖浓度在 20g/L 为佳， 在生产成本考虑选择以自来水为水质进行愈伤组织培养。光培养和暗培养对短 葶山麦冬愈伤组织保持的差别不大，以暗培养为主。短葶山麦冬愈伤组织在培 养过程中其愈伤组织生长趋势呈“S” ，在培养过程中，含水率变化总体呈下降 趋势，增殖系数呈上升趋势。 愈伤组织转化的的培养基为未添加生长调节剂 的空白培养基，不同蔗糖浓度下均能出现愈伤组织诱导诱
15、导成体胚，蔗糖浓度 在 30g/L 时为佳。胚性愈伤组织分化与再生植株上，选择 MS+ BA2.0mg/L+IBA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L 的培养基诱导分化率最高，达到 92。 3 短葶山麦冬悬浮培养细胞系的建立与保持 短葶山麦冬茎尖诱导的愈伤组织 为松散型颗粒状，接种量为 0.45g 达到最大增长量的时间短，四种碳源(蔗糖、 葡萄糖、甘露醇和山梨醇)对短葶山麦冬悬浮细胞培养的影响差别不是很大，其 中蔗糖的增殖率最高，达到 252，从成本上考虑，在以后的培养过程适合添 加蔗糖作为碳源。短葶山麦冬悬浮细胞系的生长动态大致呈“S”形。短葶山麦 冬悬浮细胞系培养选择的时间为 10d。
16、 4 短葶山麦冬愈伤组织的多糖提取工 艺优化研究及多糖动态变化研究 短葶山麦冬愈伤组织于 60烘干箱至恒重， 加石油醚，在 65水浴锅中脱色 30min，挥干溶剂，加 12 倍水提取 2 次，每次 30min，加乙醇至浓度为 90。绘制标准曲线为 y=215.78x+0.7977，R2=0.9964。取短葶山麦冬粗多糖样品溶液 0.4mL 置干燥试 管中，加入 5苯酚溶液 0.8mL，浓硫酸 4.0mL 摇匀，显色 30min 后，490nm 处 测定吸光值。愈伤组织中多糖的含量总体随着培养时间的增加，多糖含量也随 着增加，在培养时间超过 60d 后，愈伤组织中多糖的含量趋近于稳定。短葶山 麦冬愈伤组织在培养 40d-60d 后所得到的多糖含量较好，这个时候的愈伤组织 生长量达到最高速率。通过组织培养所得到的短葶山麦冬块根中多糖的含量要 高于在基地田间自然生长状态下的短葶山麦
