牛种布鲁氏菌弱毒疫苗株s19与构建株δs19全菌蛋白的比较蛋白质组研究

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2、巨大 经济损失,严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚,相关的毒力因 子主要包括:脂多糖(LPS),整和宿主因子(IHF),外膜蛋白,胞浆蛋白 BP26,Cu/Zn 超氧化物歧化酶,热休克蛋白,型分泌系统等。已有相对有效 的疫苗,但是感染后的家畜很难区分是自然感染还是免疫接种感染。为了区分 是自然感染还是疫苗接种感染,在 s19 的基础上构建了基因突变株s19,用于 区分是自然感染还是疫苗接种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证 明该菌株构建成功,出于前基因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情 况。基于此,应用蛋白质组学的方法,对改造后的蛋白质进行了验证。 对两 株菌进行培养、

3、收集、全菌蛋白提取,利用双向电泳技术,质谱鉴定和生物信 息学三大技术比较分析s19 与 s19 蛋白质变化情况。 对两菌株的双向电泳 图谱进行 Image Master6.0 软件分析和比较,结果发现:两菌株均约有 65010 个蛋白点可被检测到,蛋白质差异表达量 1.5 倍以上的点 63 个。As19 上调蛋白点 35 个,下调蛋白点 27 个。挑去差异明显的蛋白点:As19 上 11 个 蛋白点和 s19 上 9 个蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 或/和 MALDI-TOF/TOF-MS 质谱鉴 定、分析、其中相同的蛋白质 4 种,差异蛋白 10 种。 结果表明所鉴定的蛋 白其功能主

4、要与物质运输,代谢和毒力相关。正文内容正文内容布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广 泛分布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触 感染的家畜,病期可长达数月、数年,甚至几十年,严重时可致残,丧失劳动 能力,家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳腺炎和睾丸炎等,造成巨大经 济损失,严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚,相关的毒力因子 主要包括:脂多糖(LPS),整和宿主因子(IHF),外膜蛋白,胞浆蛋白 BP26,Cu/Zn 超氧化物歧化酶,热休克蛋白,型分泌系统等。已有相对有效 的疫苗,但是感染后的家畜很难区分是自然感染还是免疫接种感染

5、。为了区分 是自然感染还是疫苗接种感染,在 s19 的基础上构建了基因突变株s19,用于 区分是自然感染还是疫苗接种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证 明该菌株构建成功,出于前基因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情 况。基于此,应用蛋白质组学的方法,对改造后的蛋白质进行了验证。 对两 株菌进行培养、收集、全菌蛋白提取,利用双向电泳技术,质谱鉴定和生物信 息学三大技术比较分析s19 与 s19 蛋白质变化情况。 对两菌株的双向电泳 图谱进行 Image Master6.0 软件分析和比较,结果发现:两菌株均约有 65010 个蛋白点可被检测到,蛋白质差异表达量 1.5 倍以上的点

6、63 个。As19 上调蛋白点 35 个,下调蛋白点 27 个。挑去差异明显的蛋白点:As19 上 11 个 蛋白点和 s19 上 9 个蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 或/和 MALDI-TOF/TOF-MS 质谱鉴 定、分析、其中相同的蛋白质 4 种,差异蛋白 10 种。 结果表明所鉴定的蛋 白其功能主要与物质运输,代谢和毒力相关。 布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广泛分 布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触感染 的家畜,病期可长达数月、数年,甚至几十年,严重时可致残,丧失劳动能力, 家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳腺炎和

7、睾丸炎等,造成巨大经济损失, 严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚,相关的毒力因子主要包括: 脂多糖(LPS),整和宿主因子(IHF),外膜蛋白,胞浆蛋白 BP26,Cu/Zn 超氧化 物歧化酶,热休克蛋白,型分泌系统等。已有相对有效的疫苗,但是感染后 的家畜很难区分是自然感染还是免疫接种感染。为了区分是自然感染还是疫苗 接种感染,在 s19 的基础上构建了基因突变株s19,用于区分是自然感染还是 疫苗接种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证明该菌株构建成功, 出于前基因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情况。基于此,应用蛋 白质组学的方法,对改造后的蛋白质进行了验证。 对两

8、株菌进行培养、收集、 全菌蛋白提取,利用双向电泳技术,质谱鉴定和生物信息学三大技术比较分析 s19 与 s19 蛋白质变化情况。 对两菌株的双向电泳图谱进行 Image Master6.0 软件分析和比较,结果发现:两菌株均约有 65010 个蛋白点可被 检测到,蛋白质差异表达量 1.5 倍以上的点 63 个。As19 上调蛋白点 35 个,下 调蛋白点 27 个。挑去差异明显的蛋白点:As19 上 11 个蛋白点和 s19 上 9 个蛋 白点进行 MALDI-TOF-MS 或/和 MALDI-TOF/TOF-MS 质谱鉴定、分析、其中相同的 蛋白质 4 种,差异蛋白 10 种。 结果表明所鉴

9、定的蛋白其功能主要与物质运 输,代谢和毒力相关。 布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广泛分 布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触感染的家畜,病期可长达数月、数年,甚至几十年,严重时可致残,丧失劳动能力, 家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳腺炎和睾丸炎等,造成巨大经济损失, 严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚,相关的毒力因子主要包括: 脂多糖(LPS),整和宿主因子(IHF),外膜蛋白,胞浆蛋白 BP26,Cu/Zn 超氧化 物歧化酶,热休克蛋白,型分泌系统等。已有相对有效的疫苗,但是感染后 的家畜很难区分是自然感染还是免疫接种

10、感染。为了区分是自然感染还是疫苗 接种感染,在 s19 的基础上构建了基因突变株s19,用于区分是自然感染还是 疫苗接种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证明该菌株构建成功, 出于前基因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情况。基于此,应用蛋 白质组学的方法,对改造后的蛋白质进行了验证。 对两株菌进行培养、收集、 全菌蛋白提取,利用双向电泳技术,质谱鉴定和生物信息学三大技术比较分析 s19 与 s19 蛋白质变化情况。 对两菌株的双向电泳图谱进行 Image Master6.0 软件分析和比较,结果发现:两菌株均约有 65010 个蛋白点可被 检测到,蛋白质差异表达量 1.5 倍以上的

11、点 63 个。As19 上调蛋白点 35 个,下 调蛋白点 27 个。挑去差异明显的蛋白点:As19 上 11 个蛋白点和 s19 上 9 个蛋 白点进行 MALDI-TOF-MS 或/和 MALDI-TOF/TOF-MS 质谱鉴定、分析、其中相同的 蛋白质 4 种,差异蛋白 10 种。 结果表明所鉴定的蛋白其功能主要与物质运 输,代谢和毒力相关。 布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广泛分 布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触感染 的家畜,病期可长达数月、数年,甚至几十年,严重时可致残,丧失劳动能力, 家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳

12、腺炎和睾丸炎等,造成巨大经济损失, 严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚,相关的毒力因子主要包括: 脂多糖(LPS),整和宿主因子(IHF),外膜蛋白,胞浆蛋白 BP26,Cu/Zn 超氧化 物歧化酶,热休克蛋白,型分泌系统等。已有相对有效的疫苗,但是感染后 的家畜很难区分是自然感染还是免疫接种感染。为了区分是自然感染还是疫苗 接种感染,在 s19 的基础上构建了基因突变株s19,用于区分是自然感染还是 疫苗接种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证明该菌株构建成功, 出于前基因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情况。基于此,应用蛋 白质组学的方法,对改造后的蛋白质进行了验证。

13、 对两株菌进行培养、收集、 全菌蛋白提取,利用双向电泳技术,质谱鉴定和生物信息学三大技术比较分析 s19 与 s19 蛋白质变化情况。 对两菌株的双向电泳图谱进行 Image Master6.0 软件分析和比较,结果发现:两菌株均约有 65010 个蛋白点可被 检测到,蛋白质差异表达量 1.5 倍以上的点 63 个。As19 上调蛋白点 35 个,下 调蛋白点 27 个。挑去差异明显的蛋白点:As19 上 11 个蛋白点和 s19 上 9 个蛋 白点进行 MALDI-TOF-MS 或/和 MALDI-TOF/TOF-MS 质谱鉴定、分析、其中相同的 蛋白质 4 种,差异蛋白 10 种。 结果表

14、明所鉴定的蛋白其功能主要与物质运 输,代谢和毒力相关。 布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广泛分 布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触感染 的家畜,病期可长达数月、数年,甚至几十年,严重时可致残,丧失劳动能力, 家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳腺炎和睾丸炎等,造成巨大经济损失, 严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚,相关的毒力因子主要包括: 脂多糖(LPS),整和宿主因子(IHF),外膜蛋白,胞浆蛋白 BP26,Cu/Zn 超氧化物歧化酶,热休克蛋白,型分泌系统等。已有相对有效的疫苗,但是感染后 的家畜很难区分是自然感染还是免

15、疫接种感染。为了区分是自然感染还是疫苗 接种感染,在 s19 的基础上构建了基因突变株s19,用于区分是自然感染还是 疫苗接种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证明该菌株构建成功, 出于前基因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情况。基于此,应用蛋 白质组学的方法,对改造后的蛋白质进行了验证。 对两株菌进行培养、收集、 全菌蛋白提取,利用双向电泳技术,质谱鉴定和生物信息学三大技术比较分析 s19 与 s19 蛋白质变化情况。 对两菌株的双向电泳图谱进行 Image Master6.0 软件分析和比较,结果发现:两菌株均约有 65010 个蛋白点可被 检测到,蛋白质差异表达量 1.5 倍

16、以上的点 63 个。As19 上调蛋白点 35 个,下 调蛋白点 27 个。挑去差异明显的蛋白点:As19 上 11 个蛋白点和 s19 上 9 个蛋 白点进行 MALDI-TOF-MS 或/和 MALDI-TOF/TOF-MS 质谱鉴定、分析、其中相同的 蛋白质 4 种,差异蛋白 10 种。 结果表明所鉴定的蛋白其功能主要与物质运 输,代谢和毒力相关。 布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广泛分 布于世界各地,在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触感染 的家畜,病期可长达数月、数年,甚至几十年,严重时可致残,丧失劳动能力, 家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳腺炎和睾丸炎等,造成巨大经济损失, 严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚,相关的毒力因子主要包括: 脂多糖(LPS),整和宿主因子(IHF),外膜蛋白,胞浆蛋白 BP26,Cu/Zn 超氧化 物歧化酶,热休克蛋白,型分泌

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