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1、水产品加工及贮藏工程专业优秀论文水产品加工及贮藏工程专业优秀论文 神经干细胞移植修复小鼠谷神经干细胞移植修复小鼠谷氨酸神经损伤的实验研究氨酸神经损伤的实验研究关键词：脑神经修复关键词：脑神经修复 神经干细胞神经干细胞 兴奋性脑损伤兴奋性脑损伤摘要：背景和目的： 谷氨酸(Glutamate，Glu)是人及哺乳动物中枢神经系统 内兴奋性神经递质中最重要的氨基酸。过量的谷氨酸对神经元有损伤作用，即 兴奋性毒(Excitotoxicity)。大量研究已证实多种神经系统疾病如缺血及缺氧 性脑损伤、帕金森氏病、亨亭顿氏病、阿尔茨海默氏病、肌萎缩脊髓侧索硬化 症等均与谷氨酸在神经系统内的堆积或过量释放有关。
2、目前对这些神经系统疾 病还没有令人满意的治疗药品。神经干细胞(neural stem cells，NSCs)是神经 系统中能够增殖分化成神经元和神经胶质细胞的特定原始神经细胞，它具有高 度的自我更新能力、低免疫源性、多潜能分化、迁移功能及良好的组织融合性 等特性。虽然这类细胞终身存在，但由于绝对数量和局部微环境所限，损伤神 经组织的自我修复作用微乎其微。采用外源性的神经干细胞移植已被认为是治 疗神经系统疾病最具前景的治疗方法之一。 本文探讨神经干细胞经侧脑室及 尾静脉注射修复成年小鼠谷氨酸神经损伤的可能性。 方法： 1神经干细 胞的分离及鉴定自孕 15 日的 KM 鼠取胚胎，取出胎鼠脑组织，胰
3、蛋白酶消化成 单细胞后，用 Nestin 免疫荧光法鉴定神经干细胞。 2成年小鼠谷氨酸损伤 模型谷氨酸单钠(4.0 g/kg)灌胃，连续 10 天。 3神经干细胞的移植谷氨酸 单钠灌胃结束后第 1、10 天，将 Hoechst 33342 标记的神经干细胞 (10lt;#39;6gt;/鼠)经侧脑室或尾静脉移植入小鼠体内，MSG 组和 Control 组用 DMEM 代替。 4免疫荧光染色神经干细胞先用 Hoechst 33342 标记，然后将其移植入小鼠体内，10 天后牺牲小鼠，分离鼠脑，行脑组 织冰冻切片，并进行 Nestin 免疫荧光染色，用 DMIRB 免疫荧光显微镜观察结果。5行为学
4、实验用 Y 迷宫，爬绳及自主活动来检测实验组和对照组损伤后的 神经功能恢复情况。 6病理检查行为学结束后牺牲所有小鼠，小心分离出 脑组织，10福尔马林固定 1 周，石蜡包埋后，制成 4m 厚的切片，并进行 H.E 染色。 结果： 1神经干细胞的鉴定 Nestin 是神经干细胞的特异性抗原， 我们采用免疫荧光技术来检测分离提取的细胞中 Nestin 的表达。结果显示，细 胞被染成绿色，即 Nestin 表达阳性，提示分离得到的细胞是神经干细胞。 2免疫荧光染色 NSCs 移植 10 天后免疫荧光染色结果显示，小鼠胚胎神经干 细胞移植入成体小鼠脑内呈区域特异性存活。 3行为学实验 MSG 组小鼠的
5、 学习记忆能力和高空协调运动能力较 Control 组及 MSG+NSCs 组弱，而 MSG+NSCs 组小鼠的习记忆能力和高空协调运动能力均与 Control 组接近。 4神经干细胞移植对 MSG 引起的组织损伤的影响实验结果显示，谷氨酸引起的 海马损伤有神经细胞水肿，变性、坏死及细胞增生。然而，MSG+NSCs 组小鼠脑 海马区未发现神经元损伤。提示经侧脑室及尾静脉移植的 NSCs 能明显促进谷氨 酸诱导的兴奋性损伤的修复。 结论： 本实验结果表明，神经干细胞侧脑 室和尾静脉移植可以修复疾病或损伤的脑组织，特别是兴奋性脑组织损伤。正文内容正文内容背景和目的： 谷氨酸(Glutamate，G
6、lu)是人及哺乳动物中枢神经系统内 兴奋性神经递质中最重要的氨基酸。过量的谷氨酸对神经元有损伤作用，即兴 奋性毒(Excitotoxicity)。大量研究已证实多种神经系统疾病如缺血及缺氧性 脑损伤、帕金森氏病、亨亭顿氏病、阿尔茨海默氏病、肌萎缩脊髓侧索硬化症 等均与谷氨酸在神经系统内的堆积或过量释放有关。目前对这些神经系统疾病 还没有令人满意的治疗药品。神经干细胞(neural stem cells，NSCs)是神经系 统中能够增殖分化成神经元和神经胶质细胞的特定原始神经细胞，它具有高度 的自我更新能力、低免疫源性、多潜能分化、迁移功能及良好的组织融合性等 特性。虽然这类细胞终身存在，但由于
7、绝对数量和局部微环境所限，损伤神经 组织的自我修复作用微乎其微。采用外源性的神经干细胞移植已被认为是治疗 神经系统疾病最具前景的治疗方法之一。 本文探讨神经干细胞经侧脑室及尾 静脉注射修复成年小鼠谷氨酸神经损伤的可能性。 方法： 1神经干细胞 的分离及鉴定自孕 15 日的 KM 鼠取胚胎，取出胎鼠脑组织，胰蛋白酶消化成单 细胞后，用 Nestin 免疫荧光法鉴定神经干细胞。 2成年小鼠谷氨酸损伤模 型谷氨酸单钠(4.0 g/kg)灌胃，连续 10 天。 3神经干细胞的移植谷氨酸单 钠灌胃结束后第 1、10 天，将 Hoechst 33342 标记的神经干细胞 (10lt;#39;6gt;/鼠)
8、经侧脑室或尾静脉移植入小鼠体内，MSG 组和 Control 组用 DMEM 代替。 4免疫荧光染色神经干细胞先用 Hoechst 33342 标记，然后将其移植入小鼠体内，10 天后牺牲小鼠，分离鼠脑，行脑组 织冰冻切片，并进行 Nestin 免疫荧光染色，用 DMIRB 免疫荧光显微镜观察结果。5行为学实验用 Y 迷宫，爬绳及自主活动来检测实验组和对照组损伤后的 神经功能恢复情况。 6病理检查行为学结束后牺牲所有小鼠，小心分离出 脑组织，10福尔马林固定 1 周，石蜡包埋后，制成 4m 厚的切片，并进行 H.E 染色。 结果： 1神经干细胞的鉴定 Nestin 是神经干细胞的特异性抗原，
9、我们采用免疫荧光技术来检测分离提取的细胞中 Nestin 的表达。结果显示，细 胞被染成绿色，即 Nestin 表达阳性，提示分离得到的细胞是神经干细胞。 2免疫荧光染色 NSCs 移植 10 天后免疫荧光染色结果显示，小鼠胚胎神经干 细胞移植入成体小鼠脑内呈区域特异性存活。 3行为学实验 MSG 组小鼠的 学习记忆能力和高空协调运动能力较 Control 组及 MSG+NSCs 组弱，而 MSG+NSCs 组小鼠的习记忆能力和高空协调运动能力均与 Control 组接近。 4神经干细胞移植对 MSG 引起的组织损伤的影响实验结果显示，谷氨酸引起的 海马损伤有神经细胞水肿，变性、坏死及细胞增生
10、。然而，MSG+NSCs 组小鼠脑 海马区未发现神经元损伤。提示经侧脑室及尾静脉移植的 NSCs 能明显促进谷氨 酸诱导的兴奋性损伤的修复。 结论： 本实验结果表明，神经干细胞侧脑 室和尾静脉移植可以修复疾病或损伤的脑组织，特别是兴奋性脑组织损伤。 背景和目的： 谷氨酸(Glutamate，Glu)是人及哺乳动物中枢神经系统内兴奋 性神经递质中最重要的氨基酸。过量的谷氨酸对神经元有损伤作用，即兴奋性 毒(Excitotoxicity)。大量研究已证实多种神经系统疾病如缺血及缺氧性脑损 伤、帕金森氏病、亨亭顿氏病、阿尔茨海默氏病、肌萎缩脊髓侧索硬化症等均 与谷氨酸在神经系统内的堆积或过量释放有关
11、。目前对这些神经系统疾病还没 有令人满意的治疗药品。神经干细胞(neural stem cells，NSCs)是神经系统中 能够增殖分化成神经元和神经胶质细胞的特定原始神经细胞，它具有高度的自我更新能力、低免疫源性、多潜能分化、迁移功能及良好的组织融合性等特性。 虽然这类细胞终身存在，但由于绝对数量和局部微环境所限，损伤神经组织的 自我修复作用微乎其微。采用外源性的神经干细胞移植已被认为是治疗神经系 统疾病最具前景的治疗方法之一。 本文探讨神经干细胞经侧脑室及尾静脉注 射修复成年小鼠谷氨酸神经损伤的可能性。 方法： 1神经干细胞的分离 及鉴定自孕 15 日的 KM 鼠取胚胎，取出胎鼠脑组织，胰
12、蛋白酶消化成单细胞后， 用 Nestin 免疫荧光法鉴定神经干细胞。 2成年小鼠谷氨酸损伤模型谷氨酸 单钠(4.0 g/kg)灌胃，连续 10 天。 3神经干细胞的移植谷氨酸单钠灌胃结 束后第 1、10 天，将 Hoechst 33342 标记的神经干细胞 (10lt;#39;6gt;/鼠)经侧脑室或尾静脉移植入小鼠体内，MSG 组和 Control 组用 DMEM 代替。 4免疫荧光染色神经干细胞先用 Hoechst 33342 标记，然后将其移植入小鼠体内，10 天后牺牲小鼠，分离鼠脑，行脑组 织冰冻切片，并进行 Nestin 免疫荧光染色，用 DMIRB 免疫荧光显微镜观察结果。5行为学
13、实验用 Y 迷宫，爬绳及自主活动来检测实验组和对照组损伤后的 神经功能恢复情况。 6病理检查行为学结束后牺牲所有小鼠，小心分离出 脑组织，10福尔马林固定 1 周，石蜡包埋后，制成 4m 厚的切片，并进行 H.E 染色。 结果： 1神经干细胞的鉴定 Nestin 是神经干细胞的特异性抗原， 我们采用免疫荧光技术来检测分离提取的细胞中 Nestin 的表达。结果显示，细 胞被染成绿色，即 Nestin 表达阳性，提示分离得到的细胞是神经干细胞。 2免疫荧光染色 NSCs 移植 10 天后免疫荧光染色结果显示，小鼠胚胎神经干 细胞移植入成体小鼠脑内呈区域特异性存活。 3行为学实验 MSG 组小鼠的
14、 学习记忆能力和高空协调运动能力较 Control 组及 MSG+NSCs 组弱，而 MSG+NSCs 组小鼠的习记忆能力和高空协调运动能力均与 Control 组接近。 4神经干细胞移植对 MSG 引起的组织损伤的影响实验结果显示，谷氨酸引起的 海马损伤有神经细胞水肿，变性、坏死及细胞增生。然而，MSG+NSCs 组小鼠脑 海马区未发现神经元损伤。提示经侧脑室及尾静脉移植的 NSCs 能明显促进谷氨 酸诱导的兴奋性损伤的修复。 结论： 本实验结果表明，神经干细胞侧脑 室和尾静脉移植可以修复疾病或损伤的脑组织，特别是兴奋性脑组织损伤。 背景和目的： 谷氨酸(Glutamate，Glu)是人及哺
15、乳动物中枢神经系统内兴奋 性神经递质中最重要的氨基酸。过量的谷氨酸对神经元有损伤作用，即兴奋性 毒(Excitotoxicity)。大量研究已证实多种神经系统疾病如缺血及缺氧性脑损 伤、帕金森氏病、亨亭顿氏病、阿尔茨海默氏病、肌萎缩脊髓侧索硬化症等均 与谷氨酸在神经系统内的堆积或过量释放有关。目前对这些神经系统疾病还没 有令人满意的治疗药品。神经干细胞(neural stem cells，NSCs)是神经系统中 能够增殖分化成神经元和神经胶质细胞的特定原始神经细胞，它具有高度的自 我更新能力、低免疫源性、多潜能分化、迁移功能及良好的组织融合性等特性。 虽然这类细胞终身存在，但由于绝对数量和局部
16、微环境所限，损伤神经组织的 自我修复作用微乎其微。采用外源性的神经干细胞移植已被认为是治疗神经系 统疾病最具前景的治疗方法之一。 本文探讨神经干细胞经侧脑室及尾静脉注 射修复成年小鼠谷氨酸神经损伤的可能性。 方法： 1神经干细胞的分离 及鉴定自孕 15 日的 KM 鼠取胚胎，取出胎鼠脑组织，胰蛋白酶消化成单细胞后， 用 Nestin 免疫荧光法鉴定神经干细胞。 2成年小鼠谷氨酸损伤模型谷氨酸 单钠(4.0 g/kg)灌胃，连续 10 天。 3神经干细胞的移植谷氨酸单钠灌胃结 束后第 1、10 天，将 Hoechst 33342 标记的神经干细胞(10lt;#39;6gt;/鼠)经侧脑室或尾静脉移植入小鼠体内，MSG 组和 Control 组用 DMEM 代替。 4免疫荧光染色
