人的幽门螺杆菌IgG(HPIgG)ELISA试剂盒使用说明书

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1、1人的幽门螺杆菌 P 剂盒使用说明书我司 剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人幽门螺杆菌 P 量。实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人的幽门螺杆菌 P 平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入幽门螺杆菌 P ,再与 记的抗原结合,形成抗原过彻底洗涤后加底物 色。 的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的幽门螺杆菌 P 正相关。用酶标仪在 450长下测定吸光度() ,通过标准曲线计算样品中人的幽门螺杆菌 P 度。试剂

2、盒组成:试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片(48) 2 片(96)密封袋 1 个 1 个酶标包被板 148 196 2存标准品:90 瓶 瓶 2存标准品稀释液 瓶 瓶 2存酶标试剂 3 瓶 6 瓶 2存样品稀释液 3 瓶 6 瓶 2存显色剂 A 液 3 瓶 6 瓶 2存显色剂 B 液 3 瓶 6 瓶 2存终止液 3 瓶 6 瓶 2存浓缩洗涤液 (200 倍)1 瓶 (200 倍)1 瓶 2存样本处理及要求:温血液自然凝固 10钟,离心 20 分钟左右(2000) 。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。根据标本的要求选择 柠檬酸钠或肝素作

3、为抗凝剂,混合 10钟后,离心 20 分钟左右(2000) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000) 。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万/右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右(2000) 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。割标本后,称取重量。加入一定量的 液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2温度。加

4、入一定量的 ,用手工或匀浆器将2标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000) 。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。操作步骤1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在第一、第二孔中分别加标准品 100l,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50l,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取 100l 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50l,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50l 弃掉,再各取 50l 分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50匀;混匀后从第五、第六孔中各取 50l 分别加到第七、第八孔中,再在第七、

5、第八孔中分别加标准品稀释液 50l,混匀后从第七、第八孔中分别取 50l 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50l,混匀后从第九第十孔中各取 50l 弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50l,浓度分别为 60 ,40 ,20 ,10 ,5 ) 。2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40l,然后再加待测样品10l(样品最终稀释度为 5 倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。4. 配液:将 30(48T 的

6、20 倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30(48T 的 20 倍)倍稀释后备用。5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50l,空白孔除外。7. 温育:操作同 3。8. 洗涤:操作同 5。9. 显色:每孔先加入显色剂 加入显色剂 轻震荡混匀,37避光显色 15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液 50l,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。11. 测定:以空白空调零,450长依序测量各孔的吸光度() 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。注意事项:1 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15钟后方可使用

7、,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 大于标准品孔第一孔的 ) ,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(n5) 。5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6 底物请避光保存。7 严格按照说明书的操作进行,所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9 本试剂不同批号组分不得混用。310. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,为纵坐标, 在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释 倍数;或用标准物的浓度与 计算出标 准曲线的直线回归方程式,将样品的 代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释 倍数,即为样品的实际浓度。 (此图仅供参考)试剂盒性能: 值为 上。%和 11%检测范围: 3 保存条件及有效期:22有效期:6 个月

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