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1、1轮叶党参对鼠的抗疲劳作用的实验研究【摘要】 目的观察轮叶党参酒精提取液的抗疲劳作用。方法将 28只健康的 Wistar 大鼠随机分成 4 组，每组 7 只，即对照组，轮叶党参高浓度组、中浓度组 、低浓度组；取 40 只昆明小鼠经测定游泳基础时间后，筛选出 28 只随机分成 4 组，每组 7 只，即对照组，轮叶党参高浓度组、中浓度组、低浓度组；分别灌胃 2 周后，利用RM-6240 系统分析电刺激大鼠坐骨神经对在体比目鱼肌收缩力学指标的影响；测定大鼠比目鱼肌的 SOD 和 MDA 值；观察小鼠负重游泳时间。结果轮叶党参使大鼠比目鱼肌单收缩的潜伏期缩短、最大收缩幅度增强、1/2 舒张时间延长，使
2、强直收缩的潜伏期缩短、最大收缩幅度、疲劳指数增强，使大鼠比目鱼肌的 SOD 活性增强、MDA 值下降，使小鼠负重游泳时间延长。结论轮叶党参酒精提取液具有抗疲劳作用。 【关键词】 党参属； 比目鱼肌； 骨骼肌力学； 自由基轮叶党参又名山海螺、四叶参、羊乳、羊奶、羊奶参、白莽肉、山胡萝卜等，系桔梗科多年生草本质缠绕藤本，有白色乳汁。以“羊乳”之名始载于名医别录 ，是长白山区珍贵的山野菜和中药材，含有丰富的维生素、氨基酸及铁、锌、钛等元素。现代药理学研究表明，轮叶党参具有降血脂、抗氧化、抗突变、抗肿瘤及提高J2机体免疫力的作用14 。骨骼肌作为人体运动的动力器官，收缩能力的高低是影响人体运动能力的重
3、要因素。如何提高骨骼肌收缩能力以及探讨长时间运动时骨骼肌疲劳机制是运动生理的研究热点之一。中药对骨骼肌抗疲劳的研究非常广泛，目前对骨骼肌收缩力学的报道较少。本实验观察了轮叶党参酒精提取液对大鼠在体骨骼肌的收缩力的指标和生化指标 SOD 和 MDA 值及小鼠负重游泳时间的影响。1 材料与仪器1.1 轮叶党参 50%酒精提取液由延边大学基础医学院卫生毒理学教研室提供，每毫升含 1 g 生药，临用前加入生理盐水配制成10 g/L 稀释液。1.2 动物体质量为 180200 g 的 Wistar 系雄性大鼠 28 只和体质量为 1820 g 的雄性昆明种小鼠 40 只，均由延边大学医学部实验动物科提供
4、。1.3 仪器及试剂 RM-6240 多道生理信号采集处理系统及JZJ101 压力换能器(50 g)，由成都泰盟科技有限公司生产。SOD 测试盒、MDA 测试盒由南京建成生物工程研究所生产。J32 方法2.1 大鼠骨骼肌收缩力影响将 28 只大鼠随机分为轮叶党参高、中、低浓度组及对照组，每组各为 7 只，分别灌胃。各给药组给予相应剂量(960，480，240 mg/kg)轮叶党参，对照组给予等容量生理盐水灌胃，1 次 /d，连续 14 d。末次给药 30 min 后，腹腔注射 100 g/L 水合氯醛(300mg/kg) 进行麻醉，大鼠采用腹卧位固定，制作两侧的坐骨神经-比目鱼肌标本，标本通过
5、张力换能器与RM6240 系统连接。从 0.1 V 开始刺激(延时 20 ms，波宽 2 ms)，寻找阈刺激强度后逐渐增加刺激强度直至引起单收缩最大收缩幅度的最小刺激强度，在 2 倍单刺激强度条件下观察肌肉单收缩的潜伏期(CT)、收缩幅度 (Pt)及最大舒张 1/2 时间(HRT)； 在适当频率下刺激神经，观察骨骼肌完全性强直收缩的潜伏期(CT)、收缩幅度(Pt)及疲劳指数(FI)。2.2 大鼠比目鱼肌 SOD 和 MDA 值测定骨骼肌收缩力测定结束后，小心地取出对侧未测定的比目鱼肌，立刻放入液氮中速冻(-80)，严格按照试剂盒说明书执行 SOD、MDA 的测定。2.3 小鼠负重游泳时间的影响
6、首先对 40 只小鼠进行游泳训练，共 2 次，30 min/次，间隔 3 d。在小鼠尾部 1/32/3 处负重(体重的 5) 测量游泳时间，间隔 3 d，共 3 次。选择游泳时间标准J4差10 min 的 28 只小鼠，随机分为轮叶党参高、中、低浓度组及对照组，每组各为 7 只分别灌胃，给予各给药组小鼠相应剂量(2.0，1.0，0.5 g/kg)的轮叶党参 ，给予对照组小鼠等容量生理盐水，1 次/d，连续 14 d。于第 14 天末次给药灌胃 30 min 后，在小鼠尾部 1/32/3 处负重(体质量的 10)，放入水深为 22 cm，水温为 28的水槽中游泳，观察和记录每只小鼠沉入水下 10
7、 s 不能浮出水面的时间；同时观察给药前、后小鼠体质量的变化情况。2.4 统计学处理实验数据以 s 表示，采用 Prism 3.0 统计软件进行单因素方差分析。3 结果3.1 轮叶党参对大鼠比目鱼肌收缩力的影响轮叶党参高、中、低浓度组大鼠比目鱼肌单收缩的潜伏期明显缩短，最大收缩幅度明显增加，高浓度组大鼠 12 舒张时间明显延长，与对照组比较均有显著性差异(P0.05 ，P0.01) ；明显缩短强直收缩的潜伏期，增加最大收缩幅度及疲劳指数，与对照组比较均有显著性差异（P0.05 或 P0.01） 。见表 1。表 1 轮叶党参对大鼠比目鱼肌收缩力的影响（略）3.2 轮叶党参对大鼠比目鱼肌生化指标的
8、影响大鼠 MDA 含量减少，高浓度组与对照组比较有显著性差异(P0.01) ；大鼠比J5目鱼肌 SOD 含量均增加，高浓度组与对照组比较有显著性差异(P0.05)，有统计学意义。 见表 2。表 2 轮叶党参对大鼠比目鱼肌生化指标的影响结果（略）3.3 轮叶党参对小鼠负重游泳时间的影响轮叶党参高浓度组小鼠体重在灌胃 1 周和灌胃 2 周后分别与对照组的比较(P0.05，P0.001) 有统计学意义，而且轮叶党参高浓度组和中浓度组的游泳时间也比对照组明显增加（P0.01，0.001 ） ，具有显著性差异 。表 3 轮叶党参提取液对小鼠负重游泳实验结果（略）4 讨论本研究结果表明，轮叶党参具有缩短大
9、鼠骨骼肌收缩的潜伏期，增强骨骼肌的收缩力，延缓 HRT 及提高疲劳指数的作用，高及中浓度的轮叶党参可明显延长小鼠的负重游泳时间，提示轮叶党参酒精提取液的有效成分具有抗疲劳作用。在生物体内，许多生物化学反应都产生内源性活性氧自由基。在正常条件下，机体的抗氧防御体系使自由基的产生和清除保持严格的动态平衡。但在力竭性运动中，机体耗氧增加，氧自由基生成增加，脂质过氧化加强，在脂质过氧化过程中可以产生大量的自由J6基和一系列自由基链式反应，它们可以攻击细胞膜和细胞内的酶，导致蛋白质变性，酶失活5,6 。天然抗氧化剂能够清除或抑制自由基的产生，阻断自由基链式反应启动和蔓延，从而预防和减轻自由基对机体的损伤
10、7,8 。轮叶党参是常用的补中益气药。 在轮叶党参对大鼠 SOD 活力影响实验中发现9 ， 轮叶党参提取液可使它们的 SOD 活性明显高于对照组，MDA 含量测定结果表明，摄入轮叶党参的动物不仅 SOD 酶活性单位值增高，而且机体内脂质过氧化物的产生量也明显降低，说明摄入轮叶党参不仅增强了对自由基的清除，而且能够减少机体内自由基的发生。本实验生化结果亦表明高浓度组与对照组相比 MDA 含量减少，SOD 活性增高，有统计学意义。说明轮叶党参酒精提取液的有效成分可显著提高大鼠骨骼肌中超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量，增强机体清除自由基的能力，减少机体内自由基的产
11、生，延缓疲劳的出现，从而抑制机体衰老作用，但其机制尚不明确，有待于进一步的深入研究。【参考文献】1徐惠波.轮叶党参多糖对单核-巨噬细胞系统吞噬功能的影响J. 吉林医药工业，1988，3：20J72韩春姬，韩龙哲，李莲姬，等轮叶党参总皂苷抗突变作用的实验研究J.环境与职业医学，2004，21（5）：397.3韩春姬，李铉万，李莲姬，等轮叶党参多糖多小鼠S180 肉瘤的抑制作用 J.延边大学医学学报，2000，23(4) ：2454李 克，王冬明，韩春姬，等轮叶党参对高血脂大鼠体内铜、锌的调节作用J.中国公共卫生，2005，21（3）：339.5田 野，王义润，杨锡让，等.力竭运动对脂质过氧化和A
12、TP 代谢的影响J.中国运动医学杂志， 1994，13(2)：109.6魏 源.运动性疲劳研究进展的综述J.韩山师范学院学报，2000，21 （2）：80.7Jenkins RRThe relationship of oxygen uptake of superoxide dissuade and catalase activity in human skeletal muscleJ.Int J Sports Med，1984 ，5(1) ，11.8郑少勤，梅 参. 运动饮料对小鼠及竞走运动员抗疲劳作用的研究J.中国运动医学杂志，1995，14(1)：12.J89朴奎善，韩春姬，申英爱，等.轮叶党参对大鼠 SOD 活力和 MDA 含量的影响J.中国中医药科技，1998，5(4)：239.J
