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1、血涂片制备染色及 白细胞形态观察根据不同的细胞种类及细胞的不同成分, 对酸性及碱性染料的结合能力不同,而使 各种细胞呈现出各自的特点。本实验使用吉姆萨染料:由天青(蓝)2号和 酸性染料伊红混合配制而成。掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞 的正常形态原理 目的器材 载玻片、推片、显微 镜、微量吸管、移液枪 试剂 姬姆萨染色液、磷酸 缓冲液、甲醇 标本 抗凝血注意:操作中请穿实验服并 带一次性手套操作。血 涂 片制 备推片(夹角保 持30 -45)载玻片 血液(10微升 )将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚 薄取决于速度和角度:快、大(厚)。 慢、小(薄)一张满意的血涂片应厚薄均匀头 体 尾鲜明涂片
2、干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B 1 2 3血 涂 片 染色稀释后的姬姆萨染色液覆盖整个血膜染色 15minPBS磷酸缓冲液漂洗(切勿先倒掉染液)涂片经水洗干燥后即可镜检李四 123涂片快速干燥后加甲醇固定2-3min血涂片的观察 1.染色情况(满意、偏酸、偏碱) 2. 细胞分布情况红细胞:淡红色,无核的圆形细胞,因红细胞为双 凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7-8微 米嗜中性:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状 ,可分1-5叶。直径10-12微米嗜酸性:略大于嗜中性白细胞,细胞核染成紫色,通 常为2叶,胞质充满嗜酸性大圆颗粒,被染成鲜红色 。直径10-15微米。嗜碱性:体积略小于嗜酸性白细胞,细胞质中有大小 不等被染成紫色的颗粒,颗粒数目较嗜酸性白细胞的 颗粒少,核1-2叶,染成淡蓝色。淋巴细胞:可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红 细胞大小相似,圆形,核致密,染成深紫色。周围仅 一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。单核细胞:体积最大,细胞圆形。胞质染成灰蓝色 。核呈肾形或马蹄形,染色略浅于淋巴细胞的核。 直径14-20微米1.你认为本次实验操作中需要注意的问 题是什么?2.试描述一下你所看到的白细胞,包括 细胞的形态/大小及染色情况。 其中,你看到的红细胞又是一个什么情 形?分析讨论