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1、Ion exchange Ion exchange chromatographychromatographyR R+ +A A- -+ B + B- -R R+ +B B- -+ A + A- -原理是依据物质 所带阴阳离子的 不同。电荷不同 的物质，对管柱 上的离子交换剂 有不同的亲和力 ，改变冲洗液的 离子强度和pH值 ，物质就能依次 从层析柱中分离 出来沸石软化硬水 1935合成酚醛系磺酸型离交树脂 60年代大孔型树脂 离交纤维素离子交换剂的结构组成是一种含有多元酸或多元碱为功能基团的多孔网状立体结构的固相物单元结构：多孔网状立体结构的骨架不可移动部分功能基团可移动部分离子交换剂的分类
2、无机物沸石、磷酸钙凝胶1) 骨架组成 疏水性骨架树脂类有机物 多糖类亲水性骨架有机聚合物树脂类（苯乙烯类、酚醛类等）多糖类（葡聚糖、琼脂糖、纤维素等）有机聚合物（聚乙烯醇、聚丙烯酰胺等）微孔型（凝胶型） 2) 骨架结构 大孔型均孔型酸性基团 阳离子（强、弱） 3) 功能基团 碱性基团阴离子（强、弱）两性离子交换层析法离子交换过程离子交换： RA+ + B+ = RB+ + A+洗脱： RB+ + C+ = RC+ + B+再生： RC+ + A+ = RA+ + C+离子交换树脂的优点是：流速快，对小分子物质 的交换容量大，因而适合用于氨基酸、核苷酸等小 分子生化物质的分离纯化。树脂 类型 阳
3、离子交换树脂: 含酸性活性基团的树脂。强酸型： RSO3H pH 0-14不受酸度限制交换洗脱弱酸型：RCOOH pH4ROH pH9.5选择性好, 可分离各种有机碱及氨基酸强碱型：R N(CH3)3Cl pH 0-14弱碱型：R NH2 ， RNHCH3 pH 0-7RN(CH3)2 pH pI（-）对pI=5的某酸性蛋白质在pH5.5-9.0的范围内，当蛋白质为阴离子时，应首选DEAE纤维素；在pH3.5-4.5的范围内，当蛋白质为阳离子时，应首选CM纤维素离子交换剂与操作条件的选择 离子交换剂的选择疏水性树脂类种类 亲水性凝胶类小分子：无机离子、生物小分子 离子交换物 大分子：蛋白、酶、
4、核酸、多糖酸性（阳）强、弱功能基团性质 碱性（阴）强、弱交联度及离子交换容量稳定性 2）操作条件的选择 介质的pH值 （离子交换剂的离解度、离子交换物质的离解度及其稳定性）离子交换剂的离子形式阳离子（H+、Na+、K+ 、NH4+ ）阴离子（OH -、Cl -、SO4 2-、CO3 2-）淋洗剂水、低离子强度缓冲液改变pH值洗脱剂 增加离子强度 或+ 缓冲液有机溶剂再生（转型）：l疏水性树脂类：1.02.0 M 酸、碱 （HCl、NaOH）l亲水性凝胶类 ：0.10.5 M 酸、碱 （HCl、NaOH）“中毒”树脂类常采用的处理方法4050的 2.0 M 强酸、强碱10 % NaCl + 1-2 % NaOH混合剂有机溶剂混合液离子交换法的应用 软水和去离子水的制备水的软化机理RNa+ + Ca2+、Mg 2+ = RCa2 + 、 Mg2 + + Na + 去离子水的制备原理RH+ + ROH- + MeX = RMe + + RX - + H2O氨基酸的分离( 阳离子交换树脂)用pH递增的柠檬酸盐缓冲溶液洗脱侧链pKa增大的氨基酸蛋白质、酶、核酸等生物活性物质的分离、纯化和富集.1 离子交换树脂的分类？2 简述亲水性离子交换剂的特点。3 如何测定离子交换树脂的交换容量？
