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1、一、消毒与灭菌二、细菌的分类教学要求【掌握】 v消毒、灭菌等基本概念 v常用消毒灭菌方法及适用范围 v细菌种、属、菌株、标准菌株的概念,细菌 的命名原则和书写规则 【熟悉】 v消毒灭菌的应用 【了解】 v影响消毒灭菌效果的因素消毒灭菌技术发展历史v1847年 匈牙利人塞麦尔维斯: 漂白粉洗手降低院内产褥热死亡率 v1867年 英国人李斯特:发明石碳酸消毒法,“腐烂是微生物引起的”v1886年 德国人伯格曼:蒸汽灭菌法 v1890年 美国人哈斯特:戴橡胶手套 李斯特v 1998年4月,深圳市妇女儿童医院共计手术 292例,发生感染166例。致病菌为龟型分枝 杆菌。感染原因是浸泡刀片和剪刀的戊二醛
2、 配制错误,错把2%戊二醛稀释200倍。 v 2005年12月,上海第九医院专家到安徽宿州 市立医院为10例白内障患者实施手术,结果 均感染绿脓杆菌,其中9名患者单侧眼球被摘 除。感染原因是手术器械不能做到一人一用 一灭菌,全用75%的乙醇浸泡手术器械,达不 到灭菌要求。 v 2009年10月广东潮阳区谷饶中心卫生院18例 剖腹产产妇发生切口感染。原因手术器械等 清洗不彻底,手术用刀片、剪刀、缝合线等 用戊二醛浸泡,不能达到灭菌效果。院内感染个案消毒灭菌是 减少院内感染 发生的关键概念灭菌消毒防腐清洁无菌及无菌操作概念视频视频 : 供应应室消毒灭灭菌概念v灭菌(sterilization)杀灭
3、物体上所有微生物的 方法,包括芽胞在内的全部 病原微生物和非病原微生物 。v消毒(disinfection) 杀死物体上病原微生物, 不一定能杀死芽胞或非病原 微生物的方法。微生物,包 括有哪些?概念u防腐(antisepsis)防止或抑制细菌生长繁殖的方法 。细菌一般不死亡。 v清洁(cleaning)通过除尘埃和一切污秽以减少微 生物数量的过程。彻底清洗彻底清洗是保证消毒 或灭菌成功的关键概念v“无菌物品”进入人体内部手术器械、注射器、导管;实验室所用培养基、试剂、器材等。概念v无菌(asepsis):不含活菌的意思。 v无菌操作(aseptic technique):防止微生物进入机体或
4、物品的操作技术。 n进行微生物实验、外科手术及医疗技术操作等 过程,均需进行严格的无菌操作。擦拭法高压蒸汽灭菌法常用消毒灭菌方法物理法化学法浸泡法熏蒸法喷雾法热力法生 物 净 化 法辐射法燃烧法烤箱法煮沸法干热法湿热法日光曝晒法紫外线灯照射法电离辐射法消毒灭菌的方法v物理消毒灭菌法热力灭菌法辐射杀菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法 v化学消毒灭菌法原理及分类消毒灭菌的方法v热力灭菌法 (1)干热灭菌a.焚烧 b.烧灼 c.干烤 (2)湿热灭菌a.煮沸法b.巴氏消毒法 c.间歇灭菌法d.高压蒸汽灭菌法 利用热力破坏微生物的蛋白质、核酸、 细胞壁和细胞膜, 从而导致其死亡。干热灭菌va.焚烧: vb.
5、烧灼:红外电热灭菌器 方法:对废弃物可直接在焚烧炉内焚 毁;培养用的试管或烧瓶,当开启或 关闭塞子时,将试管(瓶)口或塞子 ,在火焰上来回旋转2-3次,实验室接 种环烧灼。适用范围:污染的废弃物、病理标本 、带脓性分泌物的敷料和纸张等的处 理,实验室接种环的消毒灭菌;某些 金属器械、搪瓷类物品急用时。视频视频 :灭灭菌操作干热灭菌vc.干烤:160170 2小时 。适用于高温下不变质 、不蒸发的物品,如玻璃 器皿、瓷器等。vd.红外线适用于医疗器械、食具烤箱湿热灭菌比干热灭菌效力大(1)菌体蛋白较易凝固; (2)穿透力大; (3)潜热。蒸气变为液态的潜热穿透力和灭菌效果比较湿热灭菌va.巴氏消
6、毒法pasteurization:用较低温度杀灭液体中的病原 菌、同时又不影响消毒物品的营 养成分及香味的消毒方法:71.715-30s,常用于牛奶和酒类等的消毒。湿热灭菌vb.煮沸法:1005min杀死繁殖体;1001-2h 杀死芽胞水中加2%碳酸氢钠,可提高沸点 到105 vc.流动蒸汽灭菌法:是一种简单 、经济、应 用最早的消 毒方法之一 。适用于耐 湿、耐高温 的物品。湿热灭菌vd.间歇蒸汽灭菌法: 杀死细菌所有繁殖体和芽胞的灭菌法 。 适用不耐高热含糖、牛奶的培养基。100 30min37 培养1824h 100 30min37 培养1824h 100 30min湿热灭菌ve.高压蒸
7、汽灭菌法:n103.4kPa,121,1530min, 杀死芽胞在内的所有微生物。n灭菌效果最好、目前应用最广n用于耐高温和不怕潮湿物品的 灭菌。不能灭活朊粒临床上最常 用的一种灭 菌法,利用 高压及饱和 蒸气的高热 所释放的潜 热灭菌。手提式高压蒸汽灭菌器小型全自动高压灭菌器不向外排放蒸汽和热力大型全自动高压灭菌器下排气式压 力蒸汽灭菌器预真空压力 蒸汽灭菌器手提高压 蒸汽灭菌器灭菌效果监测v灭菌效果监测高压蒸汽灭菌法: 嗜热脂肪芽胞杆菌 环氧乙烷法:枯草芽胞杆菌辐射杀菌法 va.紫外线: 波长240280nm,260nm最强穿透力差,适用于实验室、无菌室、培养箱等的空 气消毒及物品表面消毒
8、。 注意防护:紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用改变DNA 分子构型, 干扰细菌 DNA复制 转录紫外线消毒实验室杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。 空气消毒:每10m3空间用30W紫外灯照30min 物体表面消毒:紫外灯与物体的距离1.2m。应将物品摊开或挂起,使其表面直接受到照射生物安全柜辐射杀菌法vb.日光,微波vc.电离辐射: 射线、射线(如60Co)等 ,用于一次性医用塑料制品 ,食品保存。 穿透力强,可在包装后灭菌 辐照食品。滤过除菌法v滤菌器filter 薄膜滤菌器:孔径 0.1m-0.45m 硝基纤维素膜 。常用0.22m 深层滤器:石绵、玻璃滤菌器 用途:不耐高温灭菌的血清、细菌毒
9、 素、抗生素,以及空气等的除菌 。 不能除去支原体和病毒。 高效空气过滤器HEPA应用于无菌手术 室、生物安全柜。高效空气过滤器:高效空气过滤器:应用于无菌手术室应用于无菌手术室 、生物安全柜等、生物安全柜等干燥与低温抑菌法低温法:贮藏菌种 冷冻真空干燥法-最好的菌种保存方法加入冷冻保护剂-20-70冻干菌种 低温冰箱消毒剂杀菌机制消毒剂的分类消毒剂使用原则消毒剂使用方法常用化学消毒剂 化学消毒灭菌法如皮肤、粘 膜、排泄物 及周围环境 、光学仪器 、金属锐气 和某些塑料 制品的消毒 。v用化学药品进行消毒灭菌的方法 ,凡不适用于热力消毒灭菌和不 怕湿的物品均可选用此法消毒杀菌机制: (1)使菌
10、体蛋白质变性或凝固; (2)干扰细菌的酶系统和代谢; (3)损伤细胞膜影响通透性。消毒剂杀菌机制哪种消毒剂适用?中效: 杀灭细菌繁 殖体、结核 杆菌、真菌 、病毒,但 不能杀灭芽 孢低效: 杀灭细菌繁 殖体、部分 真菌、亲脂 性病毒,但 不能杀灭结 核杆菌、亲 水性病毒和 芽孢高效: 能杀灭一切 微生物,包 括芽孢。 消毒剂的分类1、根据物品的性能和各种微生物的特 性,选择合适的消毒剂。2、严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒 时间及使用方法。3、消毒剂应定期更换,易挥发的要加 盖,定期检测、调整浓度。4、待消毒的物品必须先洗净擦干,全 部浸没在消毒液内,并打开物品的套盖。 消毒剂使用原则消毒剂使用
11、方法1、浸泡法2、擦试法3、喷雾法4、熏蒸法常用消毒剂类型作用机制及种类类别作用机制常用种类 酚类蛋白变性,细胞膜损伤 石炭酸、洗必泰 醇类蛋白变性乙醇 氧化剂氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙 酸、过氧化氢、碘 酊 表面活性剂 蛋白变性,改变胞壁通 透性新洁而灭酸碱类破坏膜、壁,蛋白凝固 醋酸、生石灰 烷化剂 醛类蛋白质、核酸烷基化 蛋白变性环氧乙烷 甲醛、戊二醛消毒剂使用范围剂量含氯消毒剂漂白粉饮用水有效氯0.4%次氯酸钠皮肤 物表 排泄物 有效氯0.01-0.1%过氧乙酸皮肤 物表 空气0.1-0.5%过氧化氢皮肤 物表 空气3%戊二醛医疗器械2%乙醇医疗器械 皮肤75%碘酊皮肤 黏膜 物表
12、2%碘乙醇溶液碘伏皮肤 黏膜 物表0.3%-0.5%有效碘溶液苯扎溴铵皮肤 黏膜 物表0.05-0.1%氯己定皮肤 黏膜 物表0.02-0.05%高锰酸钾皮肤 黏膜 蔬菜 水果 1-10g/L溶液常用消毒剂种类及使用常用消毒剂v高效消毒剂 含氯消毒剂:次氯酸、漂白粉、二氯异氰酸尿酸钠 过氧化物消毒剂:过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯 醛类消毒剂:戊二醛(不腐蚀金属)、甲醛 环氧乙烷:800-1200mg/L 56 6h环氧乙烷灭菌器 (环氧乙烷易燃,有毒)过氧化氢灭菌器 (安全:常温、常压 、无毒、无残留 杀菌谱广,杀菌力强 )v中效消毒剂 含碘消毒剂:碘伏、碘酊 醇类:乙醇7075v低效消毒剂
13、季铵盐类:苯扎溴铵(新洁尔灭) 氯已定(洗必泰) 高锰酸钾常用消毒剂高危:需进入无菌组织的物品。灭菌 中危:接触黏膜的器械。消毒 低危:只接触未损伤皮肤。清洗、消毒 v室内空气消毒灭菌 物理消毒法:紫外线照射(1.5W/m3,1h)最常用;滤过除菌:高效过滤装置 化学消毒法:过氧乙酸或过氧化氢喷雾、熏蒸v医疗器械物品的消毒灭菌消毒灭菌的运用v手和皮肤的消毒用肥皂和流动水正确洗手病原微生物污染时应用消毒剂消毒。 消毒灭菌的运用免洗手消毒液正确洗手v黏膜的消毒:过氧化氢、洗必泰v病人排泄物与分泌物的消毒灭菌:次氯酸钠v病人污染物品的消毒:漂白粉、过氧乙酸 v饮水的消毒:氯气v环境的消毒 消毒灭菌的
14、运用影响消毒灭菌效果的因素消毒剂微生物环境种类浓度作用时间菌龄种类有机物 温度酸碱度数量抵抗力:芽胞-结核分枝杆菌-病毒-繁殖体-真菌常用杀菌因子对HIV 污染物消毒使用的剂量杀菌因子 剂量热(80 ) 72 h紫外线(15 W灯管,距10 cm 处照射) 8 min含氯消毒剂(含有效氯500-5000 mg/ L ) 10 30 min碘伏(含有效碘50100 mg/ L ) 1030 min乙醇65 %75 %溶液 510 min过氧化氢3 %溶液 1030 min戊二醛2 %溶液 2030 min甲醛5 %8 %溶液 2030 min煤酚皂溶液1 %3 %溶液 1030 min季铵盐类0
15、. 1 %0. 2 %溶液 30 min 以上 朊粒的灭活朊粒:无核酸结构,但在宿主细胞内增殖 感染性蛋白质 对化学因子的抵抗力是所有微生物中最强侵犯中枢神经组织,可引发慢性退行 性脑组织病变,如克雅氏病、库鲁病 、疯牛病等 v1mol/L的氢氧化钠或5%次氯酸钠浸泡1h 后,134 高压蒸汽处理2h微生物实验室的消毒灭菌v实验室哪些常用物品需要消毒灭菌?用何方法消 毒灭菌?培养基(耐热、不耐热)、接种环、吸嘴、 玻璃研磨器、试管等均为无菌物品。实验室配制的耐热物品常用高压蒸气灭菌法 ;不耐热用间歇蒸汽灭菌法。 v微生物室常规工作中产生的医疗废物如何处置?带菌的培养基须先在实验室内高压蒸气灭菌 法处理;带菌液体用次氯酸钠(有效氯1000- 2000mg/L)浸泡;地面物品表面用含氯消毒剂擦 拭和喷洒。第六节 细菌的分类细菌的分类原则与层次细菌分类学(Bacterial taxonomy)是微生物分类 学的一个分支,是对细菌进行分类鉴定命名的 一门科学。 分类(classification)是指根据相似性或亲缘关系, 将一个有机体放在一个单元中。 鉴定(identification)是指确定一个新分离物是否归 属于某个已命名的分类单元的过程。 命名(nomenclature)是按照国际命名法规给予有机体 一个科学的名称。 分类等级:界(Kingdom ) 门(