《导学教程2017高考生物一轮复习 生物技术实践 专题四 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课件（选修1）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《导学教程2017高考生物一轮复习 生物技术实践 专题四 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课件（选修1）（88页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、专题四 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取考纲纲要求1PCR技术的基本操作和应用。2.蛋白质的提取和分离。3.从生物材料中提取某些特定的成分。4.实验：DNA的粗提取与鉴定。1基本原理考点突破核心探究考点1 DNA的粗提取与鉴定0.14mol/L NaCl 酒精二苯胺蓝蓝2操作过程材料的选选取：选选用_含量相对较对较 高的生物组织组织破碎细细胞(以鸡鸡血为为例)：鸡鸡血细细胞，加_，用玻璃棒搅搅拌，用纱纱布过滤过滤 ，收集滤滤液去除杂质杂质 ：利用DNA在不同浓浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过过控制_去除杂质杂质DNA蒸馏水NaCl溶液的浓度DNA析出：将处处理后的溶液过滤过滤 ，加
2、入与滤滤液体积积相等的、冷却的体积积分数为为_溶液DNA的鉴鉴定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试试剂剂，_5min，溶液变变成蓝蓝色95%的酒精沸水中加热1正误判断(1)DNA在不同浓浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低( )(2)DNA不溶于冷酒精，可用酒精进进一步提取DNA( )(3)DNA与二苯胺溶液反应应生成紫色物质质( )(4)酵母和菜花均可作为为提取DNA的材料( ) (5)DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏馏水( )(6)向鸡鸡血细细胞液中加蒸馏馏水搅搅拌，可见见玻棒上有白色絮状物( )(7)DNA溶液加入二苯胺试剂试剂 沸
3、水浴加热热，冷却后变蓝变蓝 ( )2下图为图为 “DNA粗提取和鉴鉴定”实验实验 的相关操作，请请仔细观细观 察并分析操作的目的分别别是什么？_ _ _答案 是使鸡鸡血细细胞吸水涨涨破释释放出核物质质；是析出DNA，去除溶于酒精的杂质杂质 ；是使DNA溶解在2mol/LNaCl溶液中；是稀释释NaCl溶液使其浓浓度接近0.14molL1，去除溶于低浓浓度NaCl溶液的杂质杂质 。1DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较 试 剂浓度用途原理(“”为实验 的主要原理) NaCl 溶液2mol/L溶解 DNADNA在NaCl溶液 中的溶解度随溶 液浓度的变化而 改变，溶解度在 2 mol/L时
4、最大、 在0.14 mol/L时 最小0.14mol/ L析出 DNA2mol/L鉴定时 的溶剂酒精95%(体 积分数)除去杂 质以提 纯DNADNA不溶于 酒精，但是 细胞中的某 些物质可以 溶于酒精二苯 胺鉴定剂DNA遇二苯 胺(沸水浴) 会变蓝色柠檬 酸钠0.03 g/mL抗凝剂除去血液中 的钙离子， 防止血液凝 固2.DNA粗提取实验材料和方法的选择(1)不同生物的组织组织 中DNA含量不同在选选取材料时时，应应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则则。(2)材料不同所采用的提取方法不同植物组织组织 ：取材研磨过滤过滤 沉淀。鸡鸡血：制备鸡备鸡 血细细胞液提取核DNA溶解细细胞核内
5、DNA析出并滤滤取DNADNA再溶解提取较较纯净纯净 的DNA。【易错警示】 DNA粗提取与鉴定实验的易错点(1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。 (2)实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破放出DNA，第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。1某生物兴兴趣小组组开展DNA粗提取的相关探究活动动，具体步骤骤如下：材料处处理：称取新鲜鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组组，一组组置于20、另一组组置于20条件下保存24h。DNA粗提取：第一步：将上述材料分别别放入研钵钵中，各加入1
6、5mL研磨液，充分研磨。用两层纱层纱 布过滤过滤 ，取滤滤液备备用。第二步：先向6只小烧烧杯中分别别注入10mL滤滤液，再加入20mL体积积分数为为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓缓缓 地向一个方向搅搅拌，使絮状物缠绕缠绕 在玻璃棒上。第三步：取6支试试管，分别别加入等量的2mol/L的NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测检测 ：在上述试试管中各加入4mL二苯胺试剂试剂，混合均匀后，置于沸水中加热热5min，待试试管冷却后比较较溶液的颜颜色深浅，结结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄 20 20注 “”越多表示蓝色越深)分析上述实验过实验过 程，回答下列问题问题 ：(1)该该探究性实验课
7、题实验课题 名称是_ _。(2)第二步中“缓缓缓缓 地”搅搅拌，这这是为为了减少_。(3)根据实验结实验结 果，得出结论结论 并分析。结论结论 1：与20相比，相同实验实验 材料在20条件下保存，DNA的提取量较较多。结论结论 2：_ 。针对结论针对结论 1，请请提出合理的解释释：_ _ 。(4)氯氯仿密度大于水，能使蛋白质变质变 性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对对DNA影响极小。为为了进进一步提高DNA纯纯度，依据氯氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础础上继续继续 操作的步骤骤是：_ _，然后用体积积分数为为95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析 (1)该实验中把不同的材料在不同条件(温度
8、)下处理，目的是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。(2)“缓缓地”搅拌是为了减少DNA断裂。(3)分析表格可得出结论：相同材料在20 条件下保存，DNA的提取量较多。原因可能是低温抑制了DNA酶的活性，DNA降解速度慢。等质量的不同实验材料，在相同保存温度下，从蒜黄中提取的DNA最多。(4)依据氯仿的特性，可在第三步得到的溶液中加入氯仿，使蛋白质变性。答案 (1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 (2)DNA断裂 (3)等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多 低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢 (4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充
9、分混合，静置一段时间，吸取上清液2实验中对DNA进行鉴定时，做如下操作试管 序号 AB1加2mol/L的 NaCl溶液 5mL加2mol/L的NaCl 溶液5mL2不加加入提取的DNA 丝状物并搅拌 3加4mL二苯 胺，混匀加4mL二苯胺， 混匀 4沸水浴5分 钟沸水浴5分钟实验现 象 实验结论(1)根据上图图，完成表格空白处处的实验实验 内容。(2)对对于B试试管，完成1、2、3的操作后溶液颜颜色如何？_ 。(3)在沸水浴中加热热的目的是_ _。同时说时说 明DNA对对高温有较较强的_。(4)A试试管在实验实验 中的作用是_。(5)B试试管中溶液颜颜色的变变化程度主要与_有关。解析 本题主要
10、考查DNA分子的鉴定。A、B两试管形成对照，B试管中含DNA丝状物，A试管中不含，起对照作用，其他条件均完全相同。本实验强调反应条 件是沸水浴加热5min，这样可加快颜色反应的速度，观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。 答案 (1)溶液不变蓝色 溶液逐渐变蓝色 DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺会被染成蓝色 (2)溶液颜色基本不变 (3)加快颜色反应速度 耐受性 (4)对照 (5)加入试管中的DNA(丝状物)的多少1PCR原理DNA_原理，即：考点2 PCR技术的基本操作和应用热变性冷却2PCR反应过程(1) _：当温度上升到_以上时时，双链链DNA解聚为单链为单链 。90 变性(2) _：温度
11、下降到_左右时时，两种_通过过碱基互补补配对对与两条单链单链 DNA结结合。(3) _：温度上升到72 左右时时，溶液中的4种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在_的作用下，根据碱基互补补配对对原则则合成新的DNA链链。复性55 引物延伸DNA聚合酶1PCR反应的过程及结果(1)PCR反应过应过 程：变变性：当温度上升到90以上时时，双链链DNA解聚为单链为单链 ，如下图图：复性：系统统温度下降至50左右时时，两种引物通过过碱基互补补配对对与两条单链单链 DNA结结合，如下图图：延伸：当系统统温度上升至72左右，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、G、C)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补补配对对原则
12、则合成新的DNA链链，如下图图：(2)结结果：PCR一般要经历经历 三十多次循环环，每次循环环都包括变变性、复性、延伸三步。两引物之间间的固定长长度的DNA序列呈指数扩扩增。2 细胞内DNA复制与PCR技术的比较细胞内DNA复制PCR 不 同 点解 旋在DNA解旋酶作用 下，边解旋边复制80100 高温解 旋，双链完全分开 酶DNA解旋酶、DNA 聚合酶TaqDNA聚合酶引 物RNADNA或RNA温 度体内温和条件高温相同点需提供DNA复制的模板 四种脱氧核苷酸为原料 子链延伸的方向都是从5端到3端【易考明示】 (1)DNA分子复制的人工控制解开螺旋：在80100时，DNA双螺旋打开，形成两条
13、DNA单链，称为变性。恢复螺旋：在50左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。 复制条件：缓冲液、DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶和两种引物。反应场所：PCR仪。(2)PCR技术术中的引物含义：引物是一小段单链DNA或RNA分子。作用：为DNA聚合酶提供合成的3端起点。种类：扩增一个DNA分子需要2种引物。数目：引物数目等于新合成的DNA子链数目。与DNA母链的关系：两种引物分别与DNA母链的3端通过碱基互补配对结合。1PCR(多聚酶链链式反应应)技术术是一项项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术术，下图图表示合成过过程，请请据图图分析回答：(1)A过过程高温使DNA变变性解旋，对该过对该过 程的原理叙述正确的是_。A该过该过 程用到耐高温的解旋酶破坏氢键氢键B该过该过 程用到限制酶破坏磷酸二酯键酯键C该过该过 程不需要解旋酶的作用D该过该过 程与人体细细胞的过过程完全相同(2)C过过程要用到的酶是耐高温的_ 。这这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩扩增时时可 以_加入， _(需要/不需要)再添加。PCR反应应除提 供酶外，还还需要满满足的基本条件有： _ _。 (3)如果把模板DNA的两
