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1、常见的人肝癌细胞株有哪些常见的人肝癌细胞株有哪些通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。稳定细胞株筛选一般是将外源DNA 克隆到具有某种抗性或选择基因的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到染色体中，用载体中所含的选择标志进行筛选，筛选得到可稳定表达目的蛋白的细胞株。美迪西生物医药提供稳定细胞株筛选服务。肝细胞癌(HCC)是一种最常见的肿瘤，也是全球引发癌症患者死亡的第 3 大原因。肝癌细胞株是通过克隆培养法或通过筛选培养法从肝癌病理组织中分离出单细胞后，由单个细胞不断分裂增殖形成的细胞群，具有与原代组织极为相似的特性和人体完整的遗传基因，并能稳定传代。人
2、肝癌细胞株因其分离来源的亲本患者不同故名称各异，所以根据它的来源不同而命名的细胞株称为人肝癌细胞系。下面来对国内较为常用的几株人肝癌细胞系的特性、优势及其在实验中的应用进行整理，为肿瘤学者实验研究提供参考。1、 SMMC-7721 人肝癌细胞株SMMC-7721 细胞系是于 1977 年建立，材料取自一名 50 岁男性原发性肝细胞癌 HCC 患者的手术切除标本进行体外培养而得。其生物学特性如下: 细胞系生长较迅速稳定，在原代细胞开始传代阶段增殖缓慢，以后趋于稳定而迅速生长；细胞形态为上皮样；贴壁生长；细胞的亚微结构形态符合癌细胞的一般特征；甲胎蛋白(-fetoprotein, AFP)免疫荧光
3、染色呈阳性；LDH 同工酶谱的变化与肝癌细胞的一般特征一致；免疫缺陷小鼠体内可成瘤率高，动物异种后瘤结节经病理切片检查，其组织形态和原手术切除标本类似。2、Bel-7402 人肝癌细胞株Bel-7402 于 1974 年建立，来源于一位 53 岁男性肝癌患者的手术切除标本，属于 HCC。生物学特性如下: 细胞增长迅速而恒定，6-7 d 可传代 1 次；细胞形态以多边形上皮样占绝大多数；贴壁生长；细胞染色体中有一大而长的近端着丝点染色体，出现频率高，是本株细胞的标记染色体；AFP 免疫荧光反应阳性；LDH、G6PD、TAT 等酶代谢及细胞的超微结构基本上保持临床人体肝癌的特性；异种接种后成瘤率高
4、，3-4 d 可成瘤，瘤块组织学病理与临床 HCC 相近。3、 MHCC97 人肝癌细胞株该细胞系由上海医科大学中山医院建立, 将一名我国 39 岁男性 HCC 患者的肝右叶转移病灶的手术切除标本接种于裸鼠肝内建造出人肝癌裸鼠转移模型(LCI-D20)而得。已证实, 经过再次分离得到的 MHCC97H、MHCC97L 及 HCCLM3 3 种细胞株，依据它们的转移特点，虽来源同一父系，但具有异质性，即具有不同的转移潜能。MHCC97 人肝癌细胞系于 1998 年从裸鼠人肝癌转移模型(LCI-D20)体外传代培养获得，该细胞系符合一般人恶性肿瘤的病理学和遗传学特征，细胞呈上皮样，贴壁生长，血清H
5、BsAg、AFP 高表达，成瘤率高且优先转移的靶器官是肺，肺转移率 100%，故证实该细胞系为高转移特性的人肝癌细胞系。2001 年，研究者从 MHCC97 细胞系中发现并分离出不同转移潜能的 2 个细胞系 MHCC97-H 和 MHCC97-L，前者肺转移率100%，后者 40%；从生长速度上，前者细胞倍增时间较后者短；穿透人工基底膜能力前者较后者大； 前者均较后者活力强、代谢旺。传代至 20 代后，两种形态学特征及生长速度方面均较稳定。之后又从 MHCC97-H 裸鼠接种后成功得到更高转移潜能的HCCLM3 细胞系。4、HepG2 人肝母细胞瘤1979 年，从阿根廷一名 15 岁高加索男孩
6、的原发性肝胚细胞瘤中分离出并建立, 该细胞系呈上皮样; 贴壁抱团生长; 生长较快, 传代周期为 1-2d; 低转移; 裸鼠中成瘤率较差; AFP 阳性; HBsAg阴性, 然而目前尚未证明该细胞中有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)基因组; 但通过实验已证实, 该细胞系分化程度较高, 细胞里代谢酶的生物转化特性较完整, 不需加入外源性活化系统。在药物作用相关研究中代谢酶保持稳定, 不会因传代次数增多而有所改变, 所含有的生物转化代谢酶与人正常肝实质细胞同源, 因此, 常被用于体外肝细胞代谢或遗传毒性试验方面的理想细胞系. 其中, HepG2.2.15 是目前应用较为广
7、泛的细胞株, 它是 HepG2 的衍生物是体外筛选抗 HBV 药物的良好模型, 并用于抗 HBV 新药开发的体外研究工具。5、Hep3B 人肝癌细胞株Hep3B 分离自 8 岁美国黑人男童的肝癌组织. 细胞形态跟HepG2 类似, 呈上皮细胞, 电镜下观察胞浆里面很多粗大的黑颗粒, 同样喜抱团贴壁生长; 其在裸鼠中能致瘤, 但基本不转移. HBV 阳性, 这与 HepG2 不同, 这株细胞整合了完整的 HBV 基因组，可用于 HBV 感染后发展致癌相关研究。6、 Huh-7 人肝癌细胞株该细胞系于 1982 年从一名患有肝癌的 57 岁日本男性肝癌组织标本上培养而得。该细胞 AFP 阳性，高度
8、分化, 细胞呈上皮样, 贴壁生长. 特点是 HBV 阴性, 而具有丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)易感性，故可用于 HCV 与肝癌的关系的研究. 除了用于研究致癌性, 还用于基因表达的调节机制、新陈代谢及 VLDL 的分泌等. 此细胞系的特别之处如下: 可用于生产重组蛋白如促红细胞生成素; 在蛋白质生物学方面用于研究在肝细胞内复制的登革病毒; 广泛用于异种移植动物模型.7、 PLC/PRF/5 人肝癌亚历山大细胞PLC/PRF/5 人肝癌亚历山大细胞于 1976 年建系, 细胞来自一位患有原发性 HCC 的莫桑比克男性患者的标本; 为上皮样贴壁生长; AFP 阳性,
9、 不产生白蛋白; 分泌 ad 亚型的 HBsAg 而不产生HBcAg 或 HBeAg 和 Dane 颗粒, 却可维持 HAV 的繁殖; 该细胞可能含有全部 HBV 基因组, 同工酶谱及核型与人类同源; 裸鼠异种移植可致瘤. 此细胞系因其产生 HBsAg 的物理化学和免疫化学特性跟 HBV 携带者血清中 HBsAg 相似, 因此, 可被用来研究 HBV体外病毒及其与原发性肝癌的关联, 抗 HBV 疫苗所需的 HBsAg 颗粒的制备及抗病毒药物的制备等方面。人肝癌细胞系具有以下优点：首先，在选择实验对象的比较上，人肝癌细胞系相较于人原代肝细胞，克服了人原代肝细胞来源困难、实验难控制、存活时间短的局限，肝癌细胞系为已获得的稳定传代的细胞，具有来源方便、操作简单、条件可控和可重复等优点，是用于肝癌疾病相关研究的理想对象。其次，肝癌细胞系均选择来源于确诊肝癌患者的病理组织，具有与肝癌患者体内相似的遗传基因组，其发生发展机制、功能蛋白表达、病毒复制能力、侵袭转移功能及抗药性等，具有与人类亲源体极其相近的特点，因此更适合应用于肝癌各领域的研究.
