《高中生物同步课件6.1蛋白质的提取和分离(中图版选修1)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高中生物同步课件6.1蛋白质的提取和分离(中图版选修1)（27页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第六章 蛋白质和DNA技术第六章 蛋白质和DNA技术新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术第1节节 蛋白质质的提取和分离新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术学习导航1.知道蛋白质质分离和提取技术术的基本原理。2.尝试尝试 蛋白质质的提取和分离。 重、难难点新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术新知初探思维启动一、蛋白质质分离提纯纯技术术1.将生物体内的蛋白质质提取出来并加以分离，就可以得到高纯纯度的、甚至是_的蛋白质质。2.包括离心技术术、层层析技术术和电电泳技术术等
2、。其中，_技术术最为为快捷灵敏、简简便易行。单单一种类类电电泳新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术二、电电泳技术术及分离蛋白质质的原理1.电电泳现现象：作为带电为带电 粒子，蛋白质质在电电场场中可以向与其自身所带电带电 荷_的电电极方向移动动。2.电电泳技术术分离蛋白质质的原理(1)蛋白质质含有游离的氨基和羧羧基，是_电电解质质，在一定pH条件下带带有电电荷。相反两性新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术(2)蛋白质质在电场电场 中可以向与其自身所带电带电 荷_的电电极方向移动动。(3)蛋白质质所带带的电电荷
3、数越多，移动动得_；电电荷数相同时时，分子量_，则则移动动越快。三、“血清蛋白的提取和分离”活动动程序1.点样样：将新制血清5 L、质质量浓浓度为为0.4 g/mL的_和质质量分数为为0.1%的_指示剂剂等体积积混匀后，用微量加样样器吸取5 L样样品，小心加到电电泳样样品槽的胶面上。相反越快越小蔗糖溶液溴酚蓝蓝新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术2.电电泳3.染色：用质质量分数为为0.05%的_染色液对对凝胶进进行染色。4.脱色：用体积积分数为为7%的_对对凝胶板进进行浸泡漂洗数次，直至底色脱净净。5.制干胶板：将已_的凝胶板放在_中浸泡3 h4 h
4、后，放在两层层透气的_中间间自然干燥。考马马斯亮蓝蓝R250醋酸溶液脱色保存液玻璃纸纸新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术判一判(1)蛋白质质和DNA都可以用电电泳的方法进进行分离纯纯化。()(2)在同一个电场电电场电 泳后，在凝胶中形成的一个带纹带纹 就是一种单纯单纯 蛋白质质。()(3)在电电泳时时，应应先将稳压稳稳压稳 流电电泳仪调仪调 到2030 mA，再使样样品进进入分离胶。()(4)分离操作正确的前提下，如果带纹带纹 均匀、狭窄、平整，则说则说 明分离效果比较较好。()新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和
5、DNA技术四、其他蛋白质质的提取与分离1.牛奶中酪蛋白的提取与检测检测(1)当pH_时时，酪蛋白的溶解度降低，并析出沉淀。用_除去酪蛋白沉淀中的_后，即得到纯纯的酪蛋白。(2)酪蛋白中含有酪氨酸，能与_试剂试剂 起颜颜色反应应，首先生成白色沉淀，加热热后变变成红红色。4.8酒精脂肪米伦伦新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术2.卵清蛋白质质的分离选选取鸡鸡、鸭鸭、鹅鹅、鹌鹑鹌鹑 等动动物的新鲜鲜_做实验实验 材料。采用_法分离卵清蛋白质质。卵清电电泳新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术想一想可否利用蛋白质质的
6、提取与分离技术术快速诊诊断早期癌变变？【提示】 可以。只需从早期患者的尿液、血液或细细胞裂解液中提取少量蛋白质样质样 品,采用蛋白质质指纹图谱纹图谱 技术术，就可以更加快速、简简便、准确地对细对细 胞癌变变作出诊诊断。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术要点突破讲练互动要点一 电电泳的常用方法1.琼琼脂糖凝胶电电泳：由于琼琼脂糖本身不带电带电荷，所以，各种分子在电场电场 中的迁移速率因各种分子的带电带电 性质质差异、分子大小、形状不同而不同，从而得以分离。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术2.聚丙烯酰烯酰
7、 胺凝胶电电泳(1)凝胶形成：新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术(2)加入SDS作用：使蛋白质发质发 生完全变变性，解聚成单单条肽链肽链 ；与各种蛋白质质形成蛋白质质SDS复合物，SDS所带负电带负电 荷的量远远远远 超过过了蛋白质质分子原有电电荷量，掩盖了不同蛋白质间质间 的电电荷差别别，使电电泳迁移率完全取决于分子的大小。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术3.结结果分析(1)不同蛋白质质的混合溶液，在经过经过 同一个电场电电场电 泳后，会在凝胶上形成不同的带纹带纹 ，每一种带纹带纹 可能就是一种蛋白
8、质质。(2)如果要对对每一条带纹带纹 作进进一步的研究，只需将带纹带纹 剪下，分别别予以洗脱，然后对对洗脱液中的蛋白质质做进进一步分离。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术特别别提醒 琼琼脂糖凝胶电电泳操作简单简单 ，电电泳速度快，样样品不需事先处处理。琼琼脂糖凝胶电电泳后区带带易染色，样样品极易洗脱，便于定量测测定。测测定蛋白质质相对对分子质质量通常用SDS聚丙烯酰烯酰 胺凝胶电电泳，原因是在一定浓浓度范围围内聚丙烯酰烯酰 胺的热稳热稳 定性强，可用检测仪检测仪直接测测定。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA
9、技术关于电电泳的说说法不正确的是( )A电电泳是指带电带电 粒子在电场电场 的作用下发发生迁移的过过程B带电带电 分子会向着与其所带电带电 荷相反的电电极移动动C蛋白质质在聚丙烯酰烯酰 胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电带净电 荷的多少D用SDS聚丙烯酰烯酰 胺凝胶电电泳，蛋白质质的电电泳迁移率完全取决于分子的大小例1新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术【解析】 蛋白质质在聚丙烯酰烯酰 胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电带净电 荷的多少以及分子的大小等因素，SDS能与各种蛋白质质形成蛋白质质SDS复合物，SDS所带负电带负电 荷的量大大超过过了蛋白质质分
10、子原有的电电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间质间 的电电荷差异，使电电泳迁移率完全取决于分子的大小。【答案】 C新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术变变式训练训练在蛋白质质的分离提纯纯技术术中，最为简为简 捷灵敏的是( )A离心技术术 B层层析技术术C电电泳技术术 D盐盐析解析：选选C。常用的蛋白质质分离提纯纯技术术，包括离心技术术、层层析技术术和电电泳技术术等，其中电电泳技术术最为为快捷灵敏、简简便易行。盐盐析可用来提取蛋白质质，而不能分离蛋白质质。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术要点二 实验实验 中应
11、应注意的一些问题问题1.由于制备备凝胶的丙烯酰烯酰 胺和双丙烯酰烯酰 胺具有很强的神经经毒性，并且容易被皮肤吸收，因此操作必须须在通风风橱内或通风处进风处进 行。2.将电电泳凝胶片放在考马马斯亮蓝蓝R250染色液中染包30 min后,多次更换换脱色液至背景清晰。脱色后，可将凝胶浸于保存液中，长长期封装在塑料袋内使其不会降低染色强度。为为保存永久性记录记录 ，可对对凝胶进进行拍照，或将凝胶干燥成胶片。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术有A、B、C三种蛋白质质，在pH为为7的条件下进进行电电泳，结结果如图图所示：例2新知初探 思维启动要点突破 讲练互动
12、知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术请请据图图回答：(1)在pH为为7时时，带电带电 荷数最多的是_，最少的是_。原因是_。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术(2)带带相同电电荷数的C蛋白质质和另一种D蛋白质质在电电泳时时，常常稍能分开，请请分析原因。_新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术【思路点拨拨】 本题题考查查蛋白质电质电 泳技术术的原理及应应用，解答本题题的关键键有以下两点：关键点电泳时蛋白质所带电荷数影响蛋白质的移动速率。蛋白质的相对分子质量也影响蛋白质的移动速率。新知初探 思维启动要点
13、突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术【解析】 蛋白质质所带电带电 荷数越多，移动动越快，A蛋白质质距离原点最远远，C最近，所以A带电带电 荷数最多，C带电带电 荷数最少。电电荷数相同时时，相对对分子质质量越小，则则移动动越快。C和D两种蛋白质带电质带电 荷数相同，移动动速度接近，说说明两者相对对分子质质量大小相近，所以电电泳时时稍能分开。新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术【答案】 (1)A C 在一定pH条件下，蛋白质质所带带的电电荷数越多，移动动得越快，A蛋白质质距离原点最远远，C蛋白质质距离原点最近(2)在进进行电电泳时时，若蛋白质带质带 相同的电电荷数,相对对分子质质量越小,则则移动动越快。应该应该 是由于C蛋白质质和D蛋白质质相对对分子质质量大小相近，移动动速度差别别不大，所以稍能分开新知初探 思维启动要点突破 讲练互动知能演练 轻巧夺冠第六章 蛋白质和DNA技术互动动探究(1)如果A、B、C三种蛋白质质的相对对分子质质量相同，则则所带电带电 荷数哪个最多？哪个最少？(2)如果A、B、C三种蛋白质质所带电带电 荷数相同,则则其相对对分子质质量哪个最大？哪个最小？【提示】 (1)A、C。(2)C、A。
