《婴儿肥厚性幽门狭窄的神经元型一氧化氮合酶表达及精氨酸干预治疗的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《婴儿肥厚性幽门狭窄的神经元型一氧化氮合酶表达及精氨酸干预治疗的研究（53页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Y 1 4 0 6 9 51分类号；R - 7 2 2妻位类翥! 科学学位由专业学位口学位类别：科学学位呵专业学位口 学校代码：10 0 62学号：2 0 0 4 3 0 6 8又坪酱斜六垮 T I A N J I NM D I C A LU N I V E R S l l Y硕士学位论文M A S T E R SD I S S E R T A T l o N论文题目：婴) L n B 厚性幽门狭窄的神经元型一氧化氮合酶表达及精氨酸千预治疗的研究t TIT LE -S t u d yo nE x p r e s s i o no fn e u r a lN i t r i cO x i d e
2、S y n t h a s ei nI n f a n t i l eH y p e r t r o p h i cP y l o r i cS t e n o s i sa n do u t c o m eo fA r g i n i n et r e a t m e n t一级学科：临床医学二级学科：儿科学论文作者：赵煜指导教师：张宏艳教授导师组成员：张碧丽教授天津医科大学研究生院二零零八年五月天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：本课题旨在探讨神经元型一氧化氮合酶( n N O S ) 在幽门区的表达减少与婴儿幽门肥厚性狭窄( I H P S ) 发病之间的相互关系及左旋精氨酸干预治疗的
3、效果，为左旋精氨酸的临床应用提供理论依据。方法：将W i s t a r 大鼠受孕后随机分为模型组、治疗组及对照组。对照组为正常喂养；模型组自母鼠孕1 4 天口服一氧化氮合酶( N O S ) 抑制剂至子鼠生后4 2 天；治疗组除给予相同N O S 抑制剂喂养外，还给予高、中、低剂量L 精氨酸( 分别为4 0 0 m g k g d 、2 0 0 m g k g d 1 、1 0 0 m g k g d 。1 ) 喂养。大鼠生后2 1 天、2 8 天、3 5 天和4 2 天分别称重，生后4 2 天取胃及1 0 e m d 、肠分别称重，幽门组织切片测量幽门肌肉厚度，免疫组织化学染色后计数幽门肌
4、肉神经内神经元型一氧化氮合酶染色阳性的细胞数量。数据以均数4 - 标准差( 牙S ) 表示，当P 0 0 5 ) 。( 2 ) 肌肉厚度：模型组、中剂量治疗组、低剂量治疗组与对照组比较，肌肉厚度增加，差异有显著性( q 分别为2 9 5 9 、2 5 9 7 、2 1 4 2 ，P 0 0 5 ) ；高剂量治疗组与模型组比较，肌肉厚度明显减低，结果存在显著性差异( q = 0 2 9 3 ，P 0 0 5 ) ( 2 ) m u s c l et h i c k n e s s ：C o m p a r i n gw i t hc o n t r o lg r o u p ，w i d t h
5、o fp y l o r i cm u s c l ei nm o d e lg r o u pa n dl o w , m e d i u mg r o u p sw e r es i g n i f i c a n t l yw i d e r ( q = 2 9 5 9 ，2 5 9 7 a n d 2 1 4 2 ，P 0 0 5 ) B u t ，t h i n n e rt h e nt h a to fm o d e lg r o u ps i g n i f i c a n t l y ( q = 0 2 9 3 ，P O 0 5 ) 。高剂量治疗组、低剂量治疗组和中剂量治疗组
6、间大鼠体重无显著性差异( 尸 0 0 5 ) 。表5五组大鼠生后2 8 天体重比较( 孑S )宰尸 0 0 5 ) 。高剂量治疗组、低剂量治疗组和中剂量治疗组间大鼠体重无差异( 胗O 0 5 ) 。表7 五组大鼠生后3 5 天体重比较( 孑S )A 组与B 组A 组与C 组A 组与D 组A 组与E 组B 组与C 组B 组与D 组B 组与E 组C 组与D 组C 组与E 组D 组与E 组0 0 2 3O 1 7 60 1 2 34 4 5 7 *0 1 9 9O 0 1 04 4 7 9 *0 2 9 94 2 9 0 *4 5 7 3 *9天津医科大学硕士学位论文丰P 0 0 5 ) 。高剂量治
7、疗组、低剂量治疗组和中剂量治疗组间大鼠体重无差异( 尸 O 0 5 ) 。表9 五组大鼠生后4 2 天体重比较( 孑S )组别q 值A 组与B 组A 组与C 组A 组与D 组A 组与E 组B 组与C 组B 组与D 组B 组与E 组C 组与D 组C 组与E 组D 组与E 组0 2 9 30 1 0 80 3 7 62 6 5 5 *O 1 8 50 6 6 92 3 7 7 *0 4 8 42 5 5 2 *3 0 1 2 木P 0 0 5 ) 。高剂量治疗组、低剂量治疗组和中剂量治疗组间大鼠体重无差异( 尸 0 0 5 ) 。2 3 五组大鼠幽门环肌厚度的比较0 7幽0 6门1 3 5 环0
8、4罂1 3 3譬 度0 2m m ) 0 10 A 梗型B 高剂量c 低剂量D 中剂量E 对照组别图2 五组大鼠幽门环肌厚度比较表1 1 五组大鼠幽门环肌厚度比较( 孑S )天津医科大学硕士学位论文B 组与D 组B 组与E 组C 组与D 组C 组与E 组D 组与E 组1 0 2 71 1 1 90 4 7 92 5 9 7 *2 1 4 2 “牛P 0 0 5 ) ；低剂量治疗组、中剂量治疗组与对照组比较，肌肉厚度明显增加，结果存在显著性差异( q 分别为2 5 9 7 、2 1 4 2 ，P 0 0 5 ) 。2 4 五组大鼠幽门环肌内n N O S 染色阳性的细胞数量比较3 5n N b
9、O s3 0色巧阳幻鏊- 5细1 0 胞5 馨) o 梗型墙剂量c 低剂量D 中剂量E 对照 组别图3 五组大鼠幽门环肌内r t y o s 染色阳性的细胞数量比较表1 3 五组大鼠幽门环肌内I 】N O S 染色阳性的细胞数量比较( 孑S )组别例数n N O S 染色阳性的细胞数量( 个)1 2天津医科大学硕士学位论文幸尸 0 0 5 ) ；各种不同剂量治疗组与模型组比较，n N O S 染色阳性的细胞数量均明显增加，结果存在显著性差异( q 分别为8 4 1 4 、6 4 3 7 、7 6 2 3 ，P O 0 5 ) 。同时，模型组幽门内神经纤维明显较其他组萎缩。天津医科大学硕士学位论
10、文2 5 五组大鼠胃重量的比较性与相关性分析2 5 1 五组大鼠胃重量的比较性分析I 1 5胃l 1 0重1 1 3 5 量10 0( 苦)0 9 50 9 0 模型B 高剂量c 低剂量D 中剂量E 对照组舅I j图4 五组大鼠胃重量比较表1 5 五组大鼠胃重量比较( 乏S )表1 6 五组大鼠胃重量的M a n n W h i t n e y 检验组别尸值A 组与B 组A 组与C 组A 组与D 组A 组与E 组B 组与C 组B 组与D 组B 组与E 组C 组与D 组0 8 0 90 4 7 80 3 6 51 0 0 00 5 5 70 5 1 20 9 6 80 0 5 61 4天津医科大
11、学硕士学位论文C 组与E 组D 组与E 组0 3 7 00 3 7 0五组大鼠胃重量进行比较，结果显示：五组大鼠胃重量均无显著性差异( 黔O 0 5 ) 。2 5 2 五组大鼠胃重量的相关性分析田 目 重 直里( g )i 5I 4l - 31 09- 89 01 0 01 1 01 2 0。1 3 01 4 01 5 0体重( g )图5 大鼠胃重量与体重的相关性分析表1 7 五组大鼠胃重量与体重及试验方法的协方差分析探讨五组大鼠胃重量与体重的相关性，应用P e a r s o n 相关分析，结果发现：大鼠胃重量与大鼠体重呈直线正相关( P e a r s o n 相关系数为0 2 9 9
12、，P = O 0 3 1 ， 0 0 5 ) ；高剂量治疗组与模型组间小肠重量无显著性差异( q = 1 6 6 5 ，P O 0 5 ) ；模型组、低剂量治疗组、中剂量治疗组与模型组间小肠重量无显著性差异( 胗0 0 5 ) ；各不同剂量治疗组间小肠重量无显著性差异( 尸 O 0 5 ) 。2 6 2 五组大鼠小肠重量的相关性分析小肠重 直里( g )7s1 0 0l l O1 2 01 3 01 4 0体重( g )图7 大鼠小肠重量与体重的相关图1 7天津医科大学硕士学位论文表2 0 五组大鼠小肠重量与体重及试验方法的协方差分析探讨五组大鼠小肠重量与体重的相关性，应用P e a r s
13、o n 相关分析，结果发现：大鼠小肠重量与大鼠体重呈直线正相关( P e a r s o n 相关系数为O 3 4 5 ，P = O 0 1 2 ，P G ) 使nN O S m R N A 表达减少，而与肥厚性幽门狭窄有着密切联系。肥厚性幽门狭窄患儿的幽门在出生时是正常的，而于生后2 1 2 周开始出现改变，并出现功能异常，同时伴有基因表达的改变【5 9 1 。D i e t e rS a u r S S l 的实验表明：患儿幽门肌中总的n N O S m R N A 表达减少，其原因主要是由于n N O S 外显子1 c 的表达减少造成的，而外显子l c 的表达减少了8 8 。正是n N
14、O S m R N A 的表达减少导致表达n N O S 的肠道神经元相对减少，继而导致没有足够的n N O S 制造用以松弛幽门括约肌的N O 。他的研究同时发现了肠道神经系统内n N O S 基因表达的动态调节：外显子1 c 的表达显著减少的同时，外显子1 f 的表达显著增加了。故推断外显子1 c 和l f 转录物在幽门括约肌中占很大比例，而n N O S 外显子1 f 的上调是l c m R N A 表达上调的补偿性调节机制。n N O S 的转录后变化调节可使1 f m R N A 水平增高，同时l c 水平降低。那又是什麽原因造成I H P S 患儿n N O S m R N A 表
15、达异常呢? 目前仍认为其发病系多因素造成，但D i e t e rS a u r 【5 州的研究为今后研究开辟了一条新的方向。他比较了I H P S 组与对照组之间的基因型频率，发现在8 4 位点( - 8 4 G A ) 单核苷酸表型A 增加了患I H P S 的危险，其优势比为8 0 。可认为8 4 G A 启动子的单核苷酸多态现象改变了n N O S 外显子1 c 的表达。既往I H P S 的家系研究表明n N O S 基因呈微卫星多态【5 训，而启动子单核苷酸多态性增加了I H P S 的发病风险的结论恰恰与之相符。五、生长因子异常很多生长因子调控着平滑肌细胞的生长。胰岛素样生长因子
16、I ( I G F 1 ) 是平滑肌细胞的促细胞分裂剂，它属于胰岛素样生长因子家族，它的活性受生长激素浓度的调节。I G F 1 参与组织的生长、再生、肥大和细胞增殖过程。I G F - 1血浆浓度和组织含量与很多疾病的发病有关，如：肾小球肾炎、肾衰、儿童白3 8天津医科大学硕士学位论文血病和骨质疏松症【6 l 侧。研究发现I G F 1 基因表达和免疫反应性的增加与平滑肌细胞的肥大有关【6 5 1 。而J a b l o n s k iJ 的研究发现I H P S 患者肥大的幽门肌肉中I G F 1 的表达较对照组明显增加【删。此外，I G F 1 还影响血小板衍生的生长因子( P D G F ) ，P D G F 也是一种平滑肌细胞的促细胞分裂剂，在I
