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1、 食品工业科技S d e n ce a n d T e c h n o l o gy o f F o o d I n d u s t r yV o l . 2 2 , N o . 2 , 2 0 0 1牡次回伴叨廷=垦三盛牛性三鑫迎胜三胜 拍 全 矽史 不 一 婚 二 ， 负 一 习 水止 户 止 哀二 珍 二 仓 礼二 必 一 录 一 哀一 以 乙 二 名 ， 玺 卜示 诊 已里 _ 李 比 茶多糖不AWWMT Mt V ff P -1,绝标歹 一 歼 习 汽巧;受霆 鱼 歹 气 曰 习 三 牙 = 诊 币 苦 代 屯 二 诬 司丹 少 币 厅 可 扭 苍 于 卜 丁 妥卖 ， = 奋 泣
2、西 = 西 ， 屯 = 于。 岁篇料铭叼认陈海霞谢笔钧( 华中农业大学食品科技系， 武汉4 3 0 0 7 0 )月 卜 如月 卜阅 卜 叫 卜阅 卜 ， 卜个月 卜 .司 .， 卜如月 卜于， 卜.月 卜 刁 卜.月 卜卜月 .，闷 卜卜阅 卜，月 卜二 卜.闷 卜闷 卜. 阅卜. 阅 卜牵司 卜夯. 卜， ， 门 卜二 闷 闷 . 闷 卜卜阅 卜灿月 卜川月 卜.甲 ，月 . 曰. . 月 卜，. 卜， 卜. 月 卜，月 * 闷 卜 闷 卜年 月 卜月 卜.月 卜J司 卜介摘要用醉沉淀法、 超滤法和C T A B 沉淀法分别制备了茶多糖粗提物， 对粗提物的组成进行了 分析， 并对多糖 的清
3、除握基自 由基的能力进行了比 较。 结果表明， 超滤法所得多糖纯度高， 巨 活性也最高， 对经基自由基抑制率可分 别比C T A B 沉淀法、 醉沉淀法提高2 3 . 5 %, 3 7 . 1 %。通过纸层析和气相色谱分析. 三种工艺所提取的茶多糖均由阿拉 伯糖、 木糖、 核糖、 葡萄撼、 半乳糖及半乳糖醛酸组成， 但组成比不同。关妞词提取工艺 茶多 糖组成生物活性A b s t r a c t G re e n t e a e t u d e p o l y s a c c h a r i d e s w e re e x t r a c t e d 场 t h r e e e x t r
4、a c t io n t e c h n o l o g i e s . i n c l u d i n g t h e m e t h o d o f u s i n g e t h a - n o l . t h e m e t h o d o f u s i n g u l t r a - f i l t ra t i o n , t h e m e t h o d o f u s i n g C r A B . T h e i r c o m p o s i t i o n s a n d b i o l o g i c a l a c t i v i t i e s w e re s
5、 t u d i e d h e r e . R e - s a l t s s h o w e d t h a t t h e m e t h o d o f u s i n g u l t r a - f i l t r a t i o n w a s t h e b e s t . T h e c r u d e p o l y s a c c h a r i d e s o b t a i n e d b y t h e u l t r a - f i l t r a t io n m e t h o d w e re m o r e a c t i v e t h a n t h e
6、 o t h e r t w o m e t h o d s 妙2 3 . 5 % a n d 3 7 . 1 %一 T h e p o l y s a c c h a r id e s w e re c o m p o s e d o f a r a b i n o s e , r i b n s e , x y l o s c, g l u c o s e a n d g a l a c t o s e w i t h s m a ll e r p ro p o rt i o n s o f g a l a c t m o n i c mi d . T h e r a t io s o f
7、 m o n o s a c c h a r i d e w e r e d i ff e r e n t o w i n g t o d i ff e r e n t u u h -l o g y .K e y w o r d s e x t r a c ti o n t e c h n o l o g y ; t e a p o l y s a c c h a r i d e s ; c o m p o s i t i o n ; b i o l o g i c a l a c t i v i t y月 卜司月 卜职月 ，阅 卜卜闷 卜卜 闷 卜，月 卜毕司 卜. 卜，叫 卜闷 卜. 阅
8、.， 卜.闷 卜. ， 叫 卜， . 阅 卜.刁 .月 . 闷 卜卜， 卜.月 卜卜 叫 卜 月 曰卜闷 卜月 卜 ， 曰润司 卜职月 卜闷 卜.闷 卜卜月 .， 卜. 阅 卜 闷 卜阅 卜， 卜 闷 .十闷 卜阅 ，如闷 卜， 卜， . 闷 卜.月 卜， 月 卜叫 卜卜 闷 .1 阅 卜，近年来， 随着糖类生化研究技术的发展， 人们对 活性多糖的生物功能有了新的认识。大量的研究表 明， 茶多糖具有防辐射、 抗凝血及抗血栓、 降血糖、 增 强机体免疫能力、 降血压、 降血脂、 耐缺氧及增加冠状 动脉血流量等作用, t - n l 。 在对茶多糖的研究中发现， 不同提取方法对茶多糖生物活性有很大
9、的影响。本 研究对不同提取工艺的茶多糖得率、 组成及生物活性 进行了比较， 测定了其单糖组成， 为茶多糖的进一步 研究提供依据。 1 材料与方法 1 . 1 材料与仪器绿茶为湖北宣恩县富硒源茶厂生产; 苯酚、 硫 酸、 乙醉, C T A B ( 十六烷基三甲基澳化按) 、 氯化钠等 试剂均为分析纯。M i l l i p o r e 超滤器, U V - 2 6 5 F W紫外可见分光光度 计， A l p h a - 1 - 5 真空冷冻干燥机， S h i tn a d z o - G9 A 气相色 谱仪 1 . 2 样品制备 1 . 2 . 1 醉沉淀法绿 茶7 0 r . A t ,
10、 3 0 一一些 卜 水 提液 1 核糖的含量较少， 纸层析的 灵敏度较差导致未能检出核糖。且本研究结果与汪 东风 ” 1 等的报道有所差异， 这可能与茶叶的来源 . 提 取方法有关表 2 不同提取工艺茶 多精的单旅组成的比轻( 14 , )单糖醉沉淀法超滤法C r A B沉淀法只On月户90) 姗45书68行10Jesl 441113012Un，n1.内、 4126貂二后挥干三氟乙酸， 加水重复几次直至检测为中性， 减 压浓缩， 备用。展开剂 正丁醇: 冰醋酸: 水二 4 : 1 : 1 ( V I V ) 。显色剂: 苯胺一邻苯二甲酸 1 . 3 . 6 气相色语分析样品的纯化与水解同纸层
11、 析， 只是样品水解干燥后硅醚化衍生， 然后做气相色 谱分析， 标准单搪同样进行衍生和气相色谱分析。色 谱条件为: 3 m m x 2 m不锈钢柱， 担体为 C h m m o s o r b W ( 6 0 一 8 0目) ， 5 % S E - 3 0 固定液， 氢火焰离子化检测 器， 记录仪: C - 11 6 A积分仪， 柱温 1 8 0 1E， 进样口温度 2 3 0 C空气流速5 0 0 m Um i n , 氢气流速5 0 m U m i n , 氮气 流速2 0 m Um i n o 2 结果与讨论 2 . 1 不同提取工艺的评价通过醇沉淀法、 超滤法和C T A B沉淀法得到
12、了三 种茶多搪粗提物， 分别对其得率、 多糖含量、 多酚含 量、 可溶性蛋白质含量进行了测定， 结果如表1 所示。 表1 不同 提取工艺茶多枪粗提物的 得率及组成的比 较( %)方法醉沉淀法超滤法C T A B沉淀法阿拉伯糖核糖木抢葡萄糖半乳糖粗多糖得率多糖含量多酚含量可溶性蛋白质含量1 . 4 0 1 . 2 32 7 . 5 2 2 9 . 3 2 1 9 . 5 21 4 . 4 9 1 1 . 8 6 3 . 6 93结 论 3 . 1 不同提取工艺对茶多糖的活性影响不同。超滤 法所得的茶多糖得率略偏低， 但却较好地保持了茶多 糖的生物活性 3 . 2 不同提取工艺茶多糖的单糖组成比不
13、同。 3 . 3 茶多糖是由阿拉伯糖、 核糖、 木糖、 葡萄糖、 半乳 糖及半乳糖醛酸组成的。1 . 7 8 1 . 5 0 2 . 8 1参考文傲通过表 . 说明， C T A B 沉淀法提取的茶多搪粗提 物， 其得率较高， 可达 1 . 8 5 %， 但多搪含量偏低， 说明 其杂质多， 其中蛋白质含量为2 . 8 1 ， 即在提取过程 中， C T A B 沉淀多糖的同时， 也把蛋白质沉淀下 来。而 醇沉淀法则易将大量的多酚带人多糖提取物中。与 C T A B 沉淀法和醇沉淀法相比， 超滤法所得的茶叶粗 多糖收得率偏低， 但多糖含量高， 且其多酚、 可溶性蛋 白质含量均较低， 便于茶多糖的
14、进一步分离纯化。 2 . 2 不同提取工艺茶叶粗多精对轻基自由基的抑制 效果比较通过对茶叶粗多糖对羚基自由基的抑制效果比 较， 表明茶多糖提取物对经基自由基有抑制作用， 且 其作用呈浓度依赖关系。在三种工艺所得的茶多糖 粗提物中， 采用超滤法能较好地保持茶多糖的生物活 性， 对经基自由基抑制率可分别比C T A B沉淀法、 醇 沉淀法提高2 3 . 5 %, 3 7 . 1 % 2 . 3 茶多糖的单据组成分析经纸层析初步分析结果表明， 三种工艺所得的茶 多糖样品均有 5 个斑点出现， 与标准单糖对照， 可知 由阿拉伯搪、 木糖、 葡萄糖、 半乳糖及半乳糖醛酸组 成。通过气相色谱分析比较， 结
15、果见表 2 ， 多糖的中 性搪是由阿拉伯糖、 核糖、 木糖、 葡萄糖及半乳糖组 成， 且不同提取方法其单糖组成比不同。与纸层析的I 安徽农业大学主编 . 茶叶生物化学( 第二版)北京: 农业出版社 . 1 9 8 8 . 2 8 9 一3 0 1 2 王淑如， 王丁刚茶叶多掩的抗凝血及抗血栓作用中草 药, 1 9 9 2 , 2 3 ( 5 ) ; 2 5 4 一 2 5 63 T a d a k a o t T a k e u , T o m o k i U n n o , H i t o s h i K i n u g a s a , e t a 1 . T h e e h e m -i
16、c a l p ro p e rt i e s a n d f u n c t io n a l e f f e c t s o f p o l y s a c c h a r i d e s d i s s o l v e d i n g r e e n te a in f u s io n . N i p p o n S h o k u h i n K a g a k u K o g a k u K a is h i . 1 9 9 8 , 4 5 ( 4 ) ; 2 7 0 一 2 7 2 4 周杰， 丁建平， 王泽农等 . 茶多糖对小鼠血糖、 血脂和免疫 功能的影响 . 茶叶科学, 1 9 9 7 , 1 7 ( 1 ) : 7 5 一 7 95 M o r i M, M o r i ta N , I k e o g a y a K . p o l y s a c c h a r i d e s f ro m t e a f o r m a n
