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1、戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂， 氯醛糖，氯胺酮 对血管的作用及机制第二组 徐娜妮 张欢 蔡军目的l 了解戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂， 氯醛糖，氯胺酮对血管平滑肌的舒张作用及机制。研究现状l血管内皮生成的血管活性物质 多年来一直以为 血管内皮只是衬在心脏和血管腔面的一层单层细 胞组织；在毛细血管处，通过内皮进行血管内外 的物质交换。近年已证实，内皮细胞可以生成并 释放若干种血管活性物质，引起血管平滑肌舒张 或收缩 。原理l血管内皮生成的舒血管物质 l内皮细胞内的前列环素合成酶可以合成前列环素l内皮生成的另一类舒血管物质更重要，即内皮舒张因子 l内皮细胞表面存在着一些受体，例如P物质受体、5-羟色胺受体
2、、ATP受体、M型胆碱能受体等 ，这些受体被相应的物质激活后，可释放EDRF。 原理l血管内皮生成的缩血管物质 （内皮缩血因子 ）l内皮素（endothelin）是已知的最强烈的缩血管 物质之一 原理l血管平滑肌细胞有和两类肾上腺素能受体。 去甲肾上腺素与肾上腺素能受体结合，可导致 血管平滑肌收缩；与肾上腺素能受体结合，则导致血管平滑肌舒张。材料l健康的SD大鼠，雄性，体重250280克；l麦氏浴槽，超级恒温水浴，温度计，5g张力换能器，微机生物信号采集处理仪，手术剪刀，眼科剪，眼科镊， 培养皿，烧杯，100l、1m1移液器，棉线；l试剂：2戊巴比妥钠，20氨基甲酸乙脂， 2 氯醛糖，2氯胺酮
3、，Krebs液 ，3mo1/L氯化钾 95%O2+5%CO2混合气体 方法 用保留血管内皮和去血管内皮的离体兔胸主动脉做标本，记录用药前后血管张力的变化。方法1.PcLab参数设置：记录方式：连续记录；存盘方式：连续存盘；采样速率：5ms；输入：DC耦合；放大倍数200500。方法 2标本制备 （1）击昏大鼠，剪开胸腔，迅速取出心脏及胸主动脉放入盛有4的混合气体饱和的Krebs营养液的培养皿中，连续用混合气体充气。分离出主动脉，将血管内的残存血液冲洗干净，小心剥去外围的结缔组织，将主动脉弓以下的胸主动脉剪成4mm长的动脉环数段备用。方法l（2）需要保存内皮的血管，动作应轻柔。如需 无内皮的血管
4、环，可用棉签或牙签将血管内皮轻 轻檫去。 l（3）将固定杆上的不锈钢钩轻轻穿入血管环， 并将另一连有细线的三角形不锈钢挂钩也轻轻穿 入，将其固定悬挂于盛有5ml Krebs液的麦氏浴 槽内（图11-27-1），通入混合气体，调节通气 量至一个一个小气泡逸出为好。浴槽内温度应保 持370.5。 方法l（4）血管环的初始张力前15分钟为1g，15分钟 后调至2g，并以此张力平衡45分钟。每隔15分 钟换液一次。 l（5）用终浓度60mmol KCL（3mol KCL 100l）收缩血管环，待收缩稳定后用预热的 Krebs洗脱，反复冲洗直至张力恢复到初始值为 止；重复加入同一浓度KCL，连续3次，用
5、 Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值。 方法l（6）用10-4mol的苯肾上腺素50l（终浓度10- 6mol）诱发血管收缩达稳定后，加入10-4mol 的乙酰胆碱50l（终浓度10-6M），观察血管的 松弛效应是否超过10%，如果10%则为内皮完 整，否则为内皮受损或无内皮。方法图11-27-1 血管灌流示意图用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值， 间隔30分钟进行下一项目，每隔15分钟换一次。观察项目 l内皮完整l按以下顺序把药物加于浴槽中（每次给药在收缩达高峰 后记录动脉环张力变化，然后用Krebs液反复脱洗标本 使其张力回复初始值）l 加入2戊巴比妥钠200L；l加入2
6、0氨基甲酸乙脂200 L；l加入2 氯醛糖200 L；l加入2氯胺酮200 L；l把主动脉环取出，用滤纸吸去其表面水分，称重。 观察项目l内皮缺损l重复完整内皮时给药操作并记录数据l分析实验结果表1：各药物对血管收缩张力大小影响实验结果组别2戊巴比妥钠20氨基甲酸乙脂2氯醛 糖2氯胺酮 内皮 完整内皮 缺损内皮 完整内皮 缺损内皮 完整内皮 缺损内皮 完整内皮 缺损 1 2 3 45 6 xs注： *p0.05 *p0.01 内皮缺损VS内皮完整讨论l（1）Krebs必须临用时用新鲜蒸馏水配制。l（2）为什么有些药物内皮完整内皮损伤的血管 松弛效应不同，有些无影响？l（3）讨论分析影响实验结果的主要干扰因素及 改进方法
