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1、cell electrophysiology 区分离子通道的离子选择性及其门控特性( 如区分电压、化学或门控性通道),发现新 的离子通道及亚型; 在记录单个通道电流()和全细胞电流() 的基础上,可分别计算出细胞膜上的通道数 ()和开方概率(),依公式=; 用以检测某些递质能否打开通道(外面向 外膜片),或是否接受第二信使的调控(内 面向外膜片); 研究腺苷酸环化酶、多磷酸磷脂酰肌醇 激酶、蛋白激酶等活性变化,以及细胞 膜上信使物质二酰甘油花生四烯酸等对 离子通道型受体的调节机制(应用全细胞 钳或外面向外膜片); 研究受体的激活态、失活态和静息态的 功能; 研究不同离子强度对通道特性的影响及细
2、 胞内信使物质如1,4,5-三磷酸肌醇、环腺苷 酸(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、Ca2+等 对离子通道型受体的调节机制(内面向外膜 片)。 研究药物对电压和化学内控性通道的影响 。 Neher等首创将膜片钳技术与Fura 2 荧光 测钙技术结合,同时进行如细胞内荧光强度 、细胞膜离子通道电流及细胞膜电容等多 指标变化的快速交替测定,这样便可得出同 一事件过程中,多种因素各自的变化情况, 进而可分析这些变化间的相互关系。 Neher将可光解出钙离子的钙螯合物引入 膜片钳技术,进而可以定量研究钙离子浓度 与分泌率的关系及最大分泌率等指标。膜片钳技术与其它技术相结合 他又创膜片钳的膜电容检测与碳纤电极电化学检 测联合运用的技术。之后又将光电联合检测技术 与碳纤电极电化学检测技术首先结合起来。这种 结合既能研究分泌机制,又能鉴别分泌物质,还能互 相弥补各单种方法的不足。 Eberwine等于1991年首先将膜片钳技术与RT- PCR技术结合起来运用,可对形态相似而电活动不 同的结果作出分子水平的解释,从此开始了膜片 钳与分子生物学技术相结合的时代:基因重组技 术,膜通道蛋白重建技术。