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1、实验2.4 胡萝卜愈伤组织的继代培养 1. 实验目的 通过本次实验，使同学熟练掌握愈伤组织继 代培养的基本操作技术，进一步熟悉、规范 无菌操作技术；设计和配制胡萝卜细胞悬浮 培养的培养基。 2.实验内容 （1）胡萝卜愈伤组织的继代培养 （2）胡萝卜细胞悬浮培养培养基的配制 3. 主要实验用具 酒精棉球、小块纱布、已灭菌培养皿和滤纸 、枪状镊子、眼科手术剪、手术刀、酒精灯 、 100ml三角瓶、500或1000ml搪瓷杯、50ml 量筒、1ml、2ml、5ml、10ml吸管、精密pH 试纸（5.47.0）、封口膜、橡皮圈、药勺、 称量纸等。 4.药品和试剂 愈伤组织继代培养基、75酒精、MS培养
2、基 和常用试剂母液、蒸馏水。 5.实验材料 处于脱分化进程中的外植体6.实验流程 （1）胡萝卜愈伤组织的继代培养 准备工作 接种室的清洁和消毒；超净工作台的开机和 消毒；剪刀、镊子、已灭菌培养皿和滤纸、 待用培养基等的准备；实验材料的准备（选 择装有无污染的已分化出愈伤组织的外植体 的三角瓶摆放于净工作台上） 愈伤组织继代培养 将上次接种在愈伤组织诱导培养基中的无污 染的外植体上产生的愈伤组织剥离转接到愈 伤组织继代诱导培养基上，放置在25 全黑 暗条件下进行愈伤组织的增值培养，以获得 足够的愈伤组织，作为后续实验的实验材料 。（2）胡萝卜细胞悬浮培养培养基的配制 配方：MS基本培养基 + 2.0mg/L NAA + 0.1mg/L6-BA + 200mg/L水解酪蛋白 + 3 蔗糖 配制流程： 配制 调节pH值 封口包扎 灭菌
