土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

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1、第 1 部 分专专 题题 2课课 题题 2理解教材 新知把握热点 考向应用创新 演练知识点一知识点二考向一考向二Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Evaluation onl

2、y.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.1.测测定微生物数量的常用方法有稀释释涂布平板法和显显微镜镜直接计计数法。2稀释释涂布平板法常用来统计统计 活菌的数目, 但统计结统计结 果往往比活菌数目低。3只有能合

3、成脲脲酶的微生物才能分解尿素,因此可用尿素作唯一氮源的选择选择 培养基分离该细该细 菌。4鉴鉴定分解尿素细细菌的方法是在以尿素为为唯一氮源的培养基中加入酚红红指示剂剂,据是否变红进变红进 行判断。 Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyri

4、ght 2004-2011 Aspose Pty Ltd.自读教材夯基础1筛选筛选 菌株的思路(1)自然界中目的菌株的筛选筛选 :依据:根据它对对 的要求,到相应应的环环境中去寻寻找。实实例:PCR技术过术过 程中用到的耐高温的,就是从热热泉中筛选筛选 出来的Taq细细菌中提取出来的。生存环环境Taq DNA聚合酶Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client

5、 Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.科目一考试 http:/ 2016年科目一模 拟考试题科目二考试 http:/ 2016年科目二考试技巧 、考试内容、考试视频 Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profi

6、le 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.(2)实验实验 室中目的菌株的筛选筛选 :原理:人为为提供有利于 生长长的条件(包括营营养、温度、pH等),同时时 其他微生物的生长长。方法:利用选择选择 培养基分离。a选择选择 培养基:允许许 微生物生长长,同时时 其他种类类微生物生长长的培养基。b实实例:选择选择 分解尿素的细细菌的培养基,以 作为为唯一氮源,只有能合成 的微生物才能分解尿素。目的菌株抑制或阻止特定阻止或抑制尿素脲脲酶Evaluation only.Evalua

7、tion only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.稀释释涂布平板稀释释度活菌Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client

8、 Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.计计数原则则:一般选择选择 菌落数在 的平板进进行计计数。结结果分析:统计统计 的菌落数往往比活菌的实际实际 数目 。原因是当两个或多个细细胞连连在一起时时,平板上观观察到的只是 。(2)其他方法:利用 直接计计数。30300低一个菌落显显微镜镜Evaluation only.Evaluation

9、 only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.圆圆褐固氮菌生活于土壤中,能以氮气作为为氮源。请请探讨讨、交流实验实验 室分离圆圆褐固氮菌的方法。提示:配制无氮培养基作为选择为选择 培养基。Evaluation only.Evaluatio

10、n only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.跟随名师解疑难1选择选择 培养基的类类型及作用(1)在培养基中加入某种化学物质质。如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓浓度的食盐盐可得到金黄色葡萄球菌。这这里的加入指的是在培养基的培

11、养成分的基础础上加入。(2)改变变培养基中的营营养成分。如培养基中缺乏氮源时时,可以分离固氮微生物,因为为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营营养成分为为特定化学成分时时,也具有分离效果。(3)改变变微生物的培养条件。如将培养基放在高温环环境中培养只能得到耐高温的微生物。Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.

12、0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.2统计统计 菌落数目(1)稀释释涂布平板法:原理:当样样品的稀释释度足够够高时时,培养基表面生长长的一个菌落,来源于样样品稀释释液中的一个活菌。通过过统计统计 平板上的菌落数,就能推测测出样样品中大约约含有多少活菌。为为了保证结证结 果准确,一般选择选择 菌落数在30300的平板进进行计计数。注意事项项:a设设置重复组组:同一稀释释度下,至少涂布3个平板作为为重复组组,才能增强实验实验 的说说服力与准确性。分析结结果时时,需考虑虑重复组组的结结果是否

13、一致,结结果不一致,意味着操作有误误,需要重新实验实验 。Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.特别别提醒 教材中的实实例说说明了设设置重复组组的重要性。第一位同学只涂布了1个平

14、板,没有设设置重复组组,因此结结果不具有说说服力。第二位同学考虑虑到设设置重复组组的问题问题 ,涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计计数值值结结果与另2个相差太远远,说说明在操作过过程中可能出现现了错错误误,因此,不能简单简单 地将3个平板的计计数值值用来求平均值值。Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyr

15、ight 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.b设设置对对照:目的是排除实验实验 中非测试测试 因素对实对实验结验结 果的影响,提高实验实验 的可信度。计计算公式:每克样样品中的菌株数(CV)M。C:代表某一稀释释度下平板上生长长的平均菌落数。V:代表涂布平板时时所用的稀释释液的体积积。M:代表稀释释倍数。Evaluation only.Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.(2)显显微镜镜直接计计数法:原理:此法利用特定细细菌计计数板或血球计计数板,在显显微镜镜下计计算一定容积积的样样品中微生物的数量。缺点:不能区分细细菌的死活。方法:用计计数板计计数。计计数板是一块块特制的载载玻片,上面有一个特定的面积为积为 1 mm2和高为为0.1 mm的计计数室,在1 mm2的面积积里又被划分成25个(或16个)中格,

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