高中生物实验专题复习(人教版新课标).

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1、高中生物实验专题复习(人教版新课标)高中生物实验专题复习(人教版新课标) (1)考纲要求:理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实 验涉及的方法和技能进行综合运用。 补初中实验:认识显微镜的结构,学会使用显微镜 实验目的:认识显微镜的结构,初步掌握使用显微镜的方法。 一、光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数计算方法结构: 光学部分:目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜) 机械部分:镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹) 、镜头转换器、粗、细 准焦螺旋。 注:目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大

2、倍数 越大。呈像原理:映入眼球内的是倒立放大的虚像。 (物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度) 放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积) 注:显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积。 二、显微镜的使用:置镜(装镜头)对光置片调焦观察 1安放。显微镜放置在桌前略偏左,距桌缘 810cm 处,装好物镜和目镜(目镜 5 物 镜 10) 2对光。转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜, 同时把反光镜转向光源,直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜, 光线过强,改用较小光圈或用平面反光镜;光线过弱,改用较大光圈或用凹面反光镜。选 低倍镜选较大的

3、光圈选反光镜(左眼观察) 3观察。将切片或装片放在载物台上,标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋(顺时针) , 俯首侧视镜筒慢慢下降,直到物镜接近切片(约 0.5cm) ,左眼观察目镜, (反时针)旋转 粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,看到物像时轻微来回旋转细准焦,直到物像清晰。 (找不到 物像时,可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心) 。 观察时两眼都要睁开,便于左 眼观察,右眼看着画图。侧面观察降镜筒左眼观察找物像细准焦螺旋调清晰 4高倍镜的转换。找到物像后,把要观察的物像移到视野中央,把低倍镜移走,换上高倍 镜,只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,直到物像清楚为止。 顺序:移装片转动镜

4、头转换器调反光镜或光圈调细准焦螺旋 注:换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后,只准调节细准焦和反光镜(或光圈) 。 问 1:低倍镜换为高倍镜后,若看不到或看不清原来的像,可能原因?(ABC)A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反,盖玻片在下面 D、未换目 镜 问 2:放大倍数与视野的关系: 放大倍数越小,视野范围越大,看到的细胞数目越多,视野越亮,工作距离越长; 放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。 故装片不能反放。 5装片的制作和移动:制作:滴清水放材料盖片 移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。 (原因:物像移动的方向和实际移动玻片的方向

5、 相反) 6污点判断:1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上; 2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜; 3)污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。 7完毕工作。使用完毕后,取下装片,转动镜头转换器,逆时针旋出物镜,旋进镜头盒; 取出目镜,插进镜头盒,盖上。把显微镜放正。实验一:观察 DNA、RNA 在细胞中的分布(必修一 P26) 一实验目的:初步掌握观察 DNA 和 RNA 在细胞中分布的方法 二实验原理: 1甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同,甲基绿使 DNA 呈现绿色, 吡罗红使 RNA 呈现红色。利用甲

6、基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。 2盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的 DNA 和蛋白 质分离,有利于 DNA 与染色剂结合。 三方法步骤:操作步骤注意问题解释取口腔上皮 细胞制片载玻片要洁净,滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁 上轻刮几下取细胞 将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果 保持细胞原有形态 消毒为防止感染,漱口避免取材失 败 固定装片水解将烘干的载玻片放入质量分数为 8% 的盐酸溶液中,用 300C 水浴保温 5min改变细胞膜的通透性,加速染色剂 进入细

7、胞,促进染色体的 DNA 与蛋 白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片 10S洗去残留在外的盐酸染色滴 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上 染色 5min观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽 浅的区域,移至视野中央,调节清晰 后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一 P18) 一实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 1可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的 Cu 2O 沉淀。如:加热 葡萄糖+ Cu ( OH

8、 ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O(砖红色)+ H 2O,即 Cu ( OH ) 2 被还 原成 Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色(或被苏丹染液染成红色) 。淀粉遇碘变蓝色。 3蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。 (蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性 NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用,产生紫色反应。 ) 三实验材料 1做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。 (因 为组织的颜色较浅,易于观察。 ) 2做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡 34 小时(也可用蓖麻种子) 。

9、 3做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 四、实验试剂 斐林试剂(包括甲液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液:质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4 溶液) 、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂(包括 A 液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和 B 液:质量浓度为 0.01g/ mL CuSO4 溶液) 、体积分数为 50%的酒精溶液,碘 液、蒸馏水。 五、方法步骤: (一)可溶性糖的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释1. 制备组织样液。 (去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高, 组织液很易被氧化成褐色, 将产

10、生的颜色掩盖。2. 取 1 支试管,向试管内注 入 2mL 组织样液。3. 向试管内注入 1mL 新制 的斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙 液分别配制、储存,使用前才 将甲、乙液等量混匀成斐林试 剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹 果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、 乙液混合保存时,生成的 Cu ( OH ) 2 在 70900C 下 分解成黑色 CuO 和水; 甲、乙液分别加入时可能 会与组织样液发生反应, 无 Cu ( OH ) 2 生成。4. 试管放在盛有 50-650C 温 水的大烧杯中,加热约 2 分 钟,观察到溶液颜色:浅蓝 色 棕色 砖红色(沉 淀)最好用试管夹夹

11、住试管上部, 使试管底部不触及烧杯底部, 试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试 管,造成烫伤;缩短实验时间。(二)脂肪的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些 子叶薄片,将薄片放在载玻片的 水滴中,用吸水纸吸去装片中的 水。干种子要浸泡 34 小 时,新花生的浸泡时 间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片, 浸泡时间过长,组织较软,切 下的薄片不易成形。切片要尽 可能薄些,便于观察。在子叶薄片上滴 23 滴苏丹或 苏丹染液,染色 1 分钟。染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液,用 50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色

12、,不洗去浮 色,会影响对橘黄色脂肪滴的 观察。同时,酒精是脂溶性溶 剂,可将花生细胞中的脂肪颗 粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴 上 12 滴蒸馏水,盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处,可看到细胞中有染成橘黄 色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇 中。三、蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液。 (浸泡、去皮研磨、过滤。 )黄豆浸泡 1 至 2 天,容易研 磨成浆,也可购新鲜豆浆以 节约实验时间。鉴定。加样液约 2ml 于试管 中,加入双缩脲试剂 A,摇 匀;再加入双缩脲试剂 B 液 34 滴

13、,摇匀,溶液变紫色。A 液和 B 液也要分开配制, 储存。鉴定时先加 A 液后加 B 液。CuSO4 溶液不能多加。先加 NaOH 溶液,为 Cu2+ 与蛋白质反应提供一个碱性 的环境。A、B 液混装或同 时加入,会导致 Cu2+变成 Cu ( OH ) 2 沉淀,而失效。 否则 CuSO4 的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋 清粘在试管壁,与双缩脲试 剂反应后会粘固在试管内壁 上,使反应不容易彻底,并 且试管也不易洗干净。附:淀粉的检测和观察 用试管取 2ml 待测组织样液, 向试管内滴加 2 滴碘液,观 察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜

14、色观察实验三 用显微镜观察多种多样的细胞(必修一 P7) 一实验目的: 1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点 2)运用制作临时装片的方法 二实验原理:利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:可以看到叶绿体、线 粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。 三方法步骤:第一步:转动反光镜使视野明亮第二步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央第三步:用转换器转过高倍物镜问(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?为什么?提示:低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但 放大的倍数高。问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要

15、放大观察的物像移至视野的中央,再换 高倍镜观察?提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此, 需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?提示:不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。第四步:观察并用细胞准焦螺旋调焦。 四:讨论:1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?答:(1)首先用低倍镜观察,找到要观察的物像,移到视野的中央。(2)转动转换器,用高倍镜观察,并轻轻转动细准焦螺旋,直到看清楚材料为止。2.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点,并描述它们之间

16、的差异,分析产生差异的 可能的原因:答:这些细胞在结构上的共同点是:有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞还有细胞壁。各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是:这些细胞的位置和功能不同,其结构与功 能相适应,这是个体发育过程中细胞分化产生的差异。3.P8 图是一个大肠杆菌的电镜照片和结构模式图,大肠杆菌与你在本实验中观察到的细胞有什么主要区别? 答:从模式图中可以看出,大肠杆菌没有明显的细胞核,没有核膜,细胞外有鞭毛,等等。实验四 用高倍镜观察线粒体和叶绿体(必修一 P47) 一实验目的:使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。 二实验原理: 叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。 线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。 三实验材料:观察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄

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