益肾活血方对少、弱精子症精子氧化应激损伤的影响

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1、摘要目的:通过观察益肾活血方对精子活性氧水平、精子数量( 浓度) 及精子活力的影响来评估益肾活血方对肾虚血瘀型少、弱精子症的临床疗效,并试图通过该研究探讨中医中药在改善少、弱精子症患者精液质量的作用机制,进而为中医药治疗男性不育症提供科学依据。方法:按照制定的纳入标准,中医辨证属于肾虚血瘀型,精液常规检查示少、弱精子症,流式细胞法检测精子R O S 检查高出正常水平,根据实验排除标准,排除精索静脉曲张、生殖道感染以及先天生殖系统发育不良等病例,纳入4 0 例,随机分为中药组、对照组,每组各2 0 例,中药组给予益肾活血方加减煎服,对照组给予锌制剂、维生素E及维生素C 口服治疗,持续3 个月。两

2、组分别在治疗前、后检查精子R O S 含量和精液常规分析,通过对照治疗前后精子R O S 水平和精液常规检查结果评估治疗效果,通过组问数据对比探讨中医药与目前常用西药抗氧化药物之间的疗效关系。成果:益肾活血方组共完成1 8 例,总有效率9 4 4 4 ( 显效率7 2 2 ,好转率2 2 2 ) ,对照组共完成1 7 例,总有效率8 2 4 ( 显效率4 7 1 ,好转率3 5 3 9 6 ) 。益肾活血方组和对照组治疗前后精子R O S 含量采用t 检验对比,治疗后两组精子R O S 含量均较治疗前明显降低,具有统计学差异( p O 0 5 ) ;在改善精液相关参数质量方面,通过各组数据前后

3、t检验显示,益肾活血方和对照组药物治疗后精子前向运动率均较治疗前明显升高,具有统计学差异( p 0 0 5 ) :i ni m p r o v ep a r a m e t e r so fs e m e n ,t w og r o u p sb e f o r et r e a t m e n ta n da f t e rt r e a t m e n tc o m p a r eb yt - t e s t ,t h ep e r c e n t a g eo fp r o g r e s s i v em o t i l i t yi nb o t ht w og r o u p si

4、 n d i c a t eas i g n i f i c a n ti n c r e a s ea f t e rt r e a t m e n t ( p 1 1 0 6 m l ,或精液细菌培养阳性,或沙眼衣原体、解脲脲原体、人型支原体阳性及其他致病菌所致的生殖道感染;4 生殖激素检查异常;5 睾丸、附睾、输精管发育异常;精索静脉曲张;6 性功能障碍和射精障碍者;7 毒品、烟草成瘾和酗酒者;广州中医药大学2 0 1 4 届硕士学位论文8 就诊近期有高烧或桑拿者;外伤及遗传性疾病家族史;9 正在进行对精液有影响药物治疗者( 促性腺激素、促蛋白合成类固醇、化疗药物、非甾体类抗炎药等) ;

5、1 0 其他,如伴有其他系统的慢性或严重疾病者:不同意参加该实验者;不能坚持治疗或拒绝复查者;以及研究者认为不适宜参加临床试验者。( 四) 剔除标准:1 发生严重不良反应者;2 研究期间因不良反应以外的原因未按照规定用药,无法判断疗效者;3 症状加重,改用其他方法治疗者;4 因各种原因必须停药者;5 研究中途失访者。二、样本含量估算符合以上标准的患者进入本研究,共计4 0 例。中医辨证均为肾虚血瘀型,精子R O S 含量高出正常范围的少、弱精子症患者。三、盲法随机分组方法采用随机卡片法,制作外形相同的卡片4 0 张,单号2 0 张,双号2 0 张,将合格受试者按抽取卡片单号、双号分2 组,每组

6、2 0 例,共4 0 例,单号为中药组,双号为对照组,分组后采用组间对照患者基本情况,包括年龄、少弱精程度等,确保组问基线水平具有可比性。本研究采用自身前后对照法,组间对照法观察。四、治疗方法中药治疗组:益肾活血方,日一剂,第一次煎服加水6 0 0 m l ,浸泡3 0 分钟,煮沸后文火煎至水2 5 0 m l ,二煎加水5 0 0 m l ,煮沸后文火煎至2 5 0 m l ,两煎混匀,等分两份,早晚饭前3 0 分钟温服。益肾活血方组成:菟丝子2 5 9巴戟天1 5 9肉苁蓉1 5 9 红花1 0 9丹参1 5 9 枸杞子1 5 9 淫羊藿2 5 9 当归1 0 9熟地黄2 0 9 车前子1

7、 0 9炙甘草1 0 9 北黄芪2 5 9 杜仲1 5 9中药辨证加减:血瘀甚者,加牛膝、莪术;伴脾虚者,去车前子、肉苁蓉,加五味子、陈皮、茯苓;兼见湿热者,去巴戟天,加黄柏、土茯苓。对照组:锌悦胶囊( 乳酸锌、维生素C ) ,0 5 9 ,日二次,早晚服;维生素E ,1 0 0 m g ,日二次,早晚服,连服9 0 天。五、观察指标1 疗效观察:检测患者服药前、后精子R O S 水平指标及精液常规分析( C A S A ) 中精液常规参数指标。两次检查患者禁欲相同时间,精子R O S 水平检测采用流式细胞法,精液常规分析具体操作按照世界卫生组织人类精液检查与处理实验手册要求进行。2 不良反应

8、观测:分别于用药的7 5 天;3 0 5 天;6 0 5 天;9 0 5 天对患者1 2益肾活血方对少,弱精症精子氧化应激损伤的影响随访,观测患者是否出现不良反应,并如实记录;若服药后出现严重不适,应立即返院,由医生判断其不良反应与本研究用药的相关性,并决定是否终止该患者此次临床研究。六、疗效评价标准1 主要评价标准:精子R O S 水平,精液常规( C A S A ) 指标。2 依据世界卫生组织男性不育标准化检查与诊疗手册( 第五版。人民卫生出版社2 0 1 1 ) 及参照中药新药临床研究指导原则( 中国医药科技出版社,2 0 0 2 ,4 ) 中有关疗效评定并结合本实验实际制定疗效评定方法

9、:显效:精子活性氧水平回复到正常水平。好转:精子活性氧水平虽未完全达到正常范围,但较治疗以前有所降低。无效:实验室检查指标无改善者。七、统计学分析数据库的录入及统计分析均在S P S S l 6 0 软件包上实现。计量资料以均数标准差表示,组间对比采用独立样本t 检验,同组前后对比采用配对t 检验;计数资料以率或构成比表示,采用卡方检验;治疗前后组间疗效对比采用方差分析检验。以P 0 0 5 ,无统计学差异。 治疗组弱精子症1 0 例,少弱精子症8 例,对照组弱精子症8 例,少精子症l 例,少弱精子症8 例。两组间初诊禁欲天数、精液浓度、精子数量、精子活力、精子活性氧含量无统计学差异,具有可比

10、性。表2 两组治疗前精液指标对比( j 士s )广州中医药大学2 0 1 4 届硕士学位论文注;经t 检验,t 值分别为一0 0 0 7 、0 1 0 8 、0 1 1 2 、一i 1 5 7 、0 2 2 6 、1 5 0 9 ,P 值分别为0 9 9 4 、 0 9 1 5 、0 9 1 2 、0 2 5 6 、0 8 2 3 、0 1 4 1 ,P 值均 0 0 5 ,两组治疗前各项指标无统计学差异。 二、各组治疗前后对比治疗前与治疗后精液检查禁欲天数对比,治疗组和对照组P 值均 O 0 5 ,无统计学差异,具有可比性。表3 两组治疗前后禁欲天数对比( 牙士S )注:经t 检验,t 值分

11、别为一0 9 4 、一1 3 9 1 ,P 值分别为0 3 2 7 、0 1 7 4 ,均 O 0 5 ,无统计学差异。 治疗前与治疗后精液浓度对比,治疗组t = - 7 7 1 8 、p = O 0 0 5 ,无明显统计学差异。 表4 两组治疗前后精液浓度对比( 牙土s )注:经t 检验,治疗组c 一7 7 1 8 、p = O 0 0 5 , 无统计学差异。 治疗前与治疗后精子总数对比,治疗组t = - 7 6 1 6 、p = O 0 。0 5 ,无统计学差异。表5 两组治疗前后精子总数对比( j 士S )注:经t 检验,治疗组t = 一7 。6 1 6 、p = O 0 0 5 ,无统

12、计学差异。 治疗前与治疗后精子前向运动率对比,治疗组和对照组P 值分别为0 、0 0 0 4 ,均0 0 5 ,无统计学差异;对照组t = - 2 5 2 4 ,p = O 0 2 3 0 0 5 ,无统计学差异;对照组一2 5 2 4 ,p = O 0 2 3 0 0 5 ,无统计学差异。治疗组对照组图1 两组治疗效果图例两组精液指标和R O S 治疗前后数据采用方差分析对比。治疗组及对照组治疗前和治疗后精液浓度数据方差分析:治疗前治疗组与治疗前对照组无统计学差异( p = 0 9 1 0 0 5 ) ,治疗组治疗后较治疗前治疗组和对照组及对照组治疗后均升高具有统计学差异( P 分别为0 0

13、 4 8 、0 0 4 、0 3 ,均 0 0 5 ) ;精子数量数据方差分析,治疗前治疗组与治疗前对照组无统计学差异( p = 0 9 2 5 0 0 5 ) ,治疗组治疗后较治疗前治疗组和对照组及对照组治疗后均升高具有统计学差异( P 分别为0 0 0 5 、0 0 0 4 、0 0 0 5 ,均 0 0 5 ) ;治疗组和对照组治疗前后精子前向运动率数据方差分析:治疗前治疗组与治疗前对照组无统计学差异( p = 0 2 9 4 0 0 5 ) ,治疗前治疗组数据与治疗后治疗组和治疗后对照组比较均有统计学差异( p分别为0 、0 0 0 3 ,均 O 0 5 ) ;治疗组和对照组治疗前后精

14、子R O S 数据方差分析:治疗前治疗组与治疗前对照组、治疗后治疗组与治疗后对照组数广州中医药大学2 0 1 4 届硕士学位论文据方差分析未见统计学差异( p 值分别为0 0 8 4 、0 7 0 6 ,均 O 0 5 ) ,治疗前治疗组和对照组分别与治疗后治疗组和对照组比较有统计学差异( p 值分别为0 、0 、O 0 0 2 、0 0 0 8 ,均 O 0 5 ) ;组间比较显示,益肾活血方组治疗后精子前向运动率、精液浓度、精子总数均较对照组治疗后高,具有统计学差异( p 0 0 5 ) ,表明益肾活血方在改善精子活力和总数、精液浓度方面比对照组抗氧化剂疗效明显。本研究结果显示,益肾活血方

15、可明显降低精子活性氧物质含量,明显增强精子活力、精液浓度和精子数量,改善精液质量,益肾活血方改善精液质量可能是通过其对抗精子氧化应激损伤实现的。与抗氧化西药组相比,两组治疗后精子R O S 水平均明显降低,且统计无组问差异,但是治疗后益肾活血方组精子活力、精液浓度和精子总数明显高于对照组,这表明益肾活血方在改善精液质量上除了抗精液氧化应激损伤可能还存在其他途径共同作用。中药复方含有成分复杂,可通过多种途径发挥治疗作用,例如抗氧化、内分泌调节、免疫调节以及改善微循环等途径,甚至有可能通过一些目前尚未发现的治疗途径改善精液质量。因为本次研究检测项目较少,未能结合精子畸形率、精子D N A 碎片率以

16、及精子凋亡率等相关检测共同评估,未能完全反应改善精予氧化应激损伤可能对精子其他方面影响的作用,希望这些评价指标与R O S 的相关研究能够在以后的临床和科研实验得到进一步观察和证实,更进一步的了解中医药与R O S的相关治疗作用。1 8益肾活血方对少弱精症精子氧化应激损伤的影响结语本研究是利用现代医学理论和检测方法结合中医学辨证论治理论来探讨中药组方益。肾活血方对肾虚血瘀型少弱精子症的治疗效果。精子氧化应激损伤与精液浓度、精子活力密切相关,本研究结果显示益肾活血方可明显改善精子质量,尤其在改善精子前向运动率、精液浓度和精子数量方面效果突出。中药复方含有成分复杂,可通过多种途径发挥治疗作用,例如抗氧化、内分泌调节以及改善微循环等途径,本研究中通过益肾活血方治疗后精子活性氧物质较治疗前明显降低,表明益肾活血方具有良好的抗氧化应激损伤作用。而益肾

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