海洋细菌bacillusvelezensisdm09在油菜中的定植及对油菜菌核病的防治研究

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1、 0 1 11 111I I II II1 111 1 1 1II I I I 17 9 9 6 8 2华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 否如需保密,解密时间是否保密独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意。研究生签名:郎香勃时间:V f 眇年衫月叮日黜魏郭膏牺名:锵签名9 期

2、沙年形月吁日签名日期娜年形月。7 日海洋细菌B a c i l l u sv e l e z e n s i sD M 0 9 在油菜中的定植及对油菜菌核病的防治研究目录摘要IA b s t r a c t I I缩写词表l 前言11 1 油菜菌核病的危害及生物防治l1 1 1 油菜菌核病的危害11 1 2 油菜菌核病的发生规律11 1 3 油菜茵核病的发病机制31 2 油菜菌核病的防治31 2 1 培育和利用抗病品种31 2 2 化学防治31 2 3 生物防治41 2 3 1 生防真菌41 2 3 2 生防细菌51 3 芽胞杆菌脂肽:植物病害生物防治的多功能武器61 3 1 脂肽的主要来源芽

3、胞杆菌61 3 2 脂肽的结构及其活性81 3 3 脂肽协助其产生菌定植91 3 4 脂肽对植物病原菌的直接拮抗作用lO1 3 5 脂肽诱导植物抗性1 11 3 6 脂肽的原位产生与其产生菌生境的关系1 41 4 研究的目的与意义1 42材料与方法162 1 材料l62 1 1B a c i l l u sv e l e z e n s i sD M 0 9 来源162 1 2 植物病原真菌l62 1 3 作物162 1 4 主要试剂l72 1 5 培养基及常用溶液l72 1 6 实验仪器l92 2 方法192 2 1D M 0 9 抗真菌谱的确定l9华中农业大学2 0 1 0 届硕十研究生学

4、位论文2 2 2D M 0 9 抗油菜核盘菌特性2 02 2 - 3D M 0 9 最佳发酵时间的确定2 02 2 4D M 0 9 抗真菌活性粗提物的制备j 一2 02 2 5D M 0 9 抗真菌活性物质的稳定性测试2 02 2 5 1 热对抗真菌活性物质的影响一2 02 2 5 2p H 对抗真菌活性物质的影响2 02 2 5 3 蛋白酶对抗真菌物质活性的影响2 l2 2 5 4 抑制剂对抗真菌物质活性的影响一2 12 2 5 5 存放时间对抗真菌物质活性的影响2 12 2 5 6 紫外线对抗真菌物质活性的影响一2 l2 2 6D M 0 9 对油菜核盘菌的生物防治( 离体叶片试验) 2

5、 12 2 6 1D M 0 9 发酵上清液对油菜核盘菌的生防作用2 l2 2 6 2D M 0 9 发酵菌悬液对油菜核盘菌的生防作用2 22 2 6 3D M 0 9 菌体对油菜核盘菌的生防作用2 22 2 7D M 0 9 的抗性试验及水解纤维素能力测试2 22 2 8D M 0 9 在油菜体内的定植2 22 2 9D M 0 9 在油菜体内的定植动态2 32 2 9 1D M 0 9 在油菜体内的定植数量与接种浓度的关系2 32 2 9 2D M 0 9 在油菜体内定植数量的时间稳定性试验2 32 2 1 0D M 0 9 叶面喷菌液定植2 32 2 1 lD M 0 9 定植后油菜植株

6、对核盘菌的防御能力研究2 32 2 1 2D M 0 9 在土壤中的存在情况2 42 2 1 3D M 0 9 对油菜诱导系统抗性相关防御酶系的影响实验设计2 42 2 1 4 酶粗提液的制备2 52 2 1 5 防御相关酶活性变化测定2 52 2 15 1 过氧化物酶( P O D ) 活性的测定2 52 2 1 5 2 多酚氧化酶( P P O ) 活性的测定2 62 2 15 3 苯丙氨酸解氨酶( P A L ) 活性的测定一2 63 结果与分析2 73 1D M 0 9 抗真菌谱的确定2 73 2D M 0 9 抗油菜核盘菌的特性2 83 3D M 0 9 最佳发酵时间的确定2 93

7、4D M 0 9 抗真菌活性物质的稳定性测试2 93 4 1 热对抗真菌活性物质的影响2 9海洋细菌B a c i l l u sv e l e z e n s i sD M 0 9 在油菜中的定植及对油菜菌核痫的防治研究3 4 2p H 对抗真菌活性物质的影响3 03 4 3 蛋白酶对抗真菌物质活性的影响3 03 4 4 抑制剂对抗真菌物质活性的影响313 4 5 存放时间对抗真菌物质活性的影响3 23 4 6 紫外线对抗真菌物质活性的影响3 23 5D M 0 9 对油菜核盘菌的生物防治( 离体叶片试验) 3 23 5 1D M 0 9 发酵上清液对油菜核盘菌的生防作用3 23 5 2D

8、M 0 9 发酵菌悬液对油菜核盘菌的生防作用3 43 5 3D M 0 9 茵体对油菜核盘茵的生防作用。3 53 6D M 0 9 的抗性试验及水解纤维素能力测试3 63 7D M 0 9 在油菜体内的定植3 63 8D M 0 9 在油菜体内的定植动态3 73 8 1D M 0 9 在油菜体内的定植数量与接种浓度的关系3 73 8 2D M 0 9 在油菜体内定植数量的时间稳定性试验3 83 9D M 0 9 叶面喷菌液定植3 93 1 0D M 0 9 定植后油菜植株对核盘菌的防御能力研究3 93 1 1D M 0 9 在土壤中的存在情况4 03 1 2D M 0 9 对油菜诱导系统抗性相

9、关防御酶系的影响实验中病情统计4 03 1 3 第一大组P O D 、P P O 、P A L 酶活性的变化4 13 1 4 第二大组P O D 、P P O 、P A L 酶活性的变化4 53 1 4 1P O D 酶活性的变化4 53 1 4 2P P O 酶活性的变化4 53 1 4 3P :A L 酶活性的变化4 54 讨论4 94 1D M 0 9 抗真菌粗提物的性质及对油菜核盘菌的生物防治4 94 2D M 0 9 在油菜体内的定植4 94 - 3D M 0 9 对油菜诱导系统抗性相关防御酶系的影响5 0参考文献5 2致谢5 9海洋细菌B a c i l l u sv e l e

10、z e n s i sD M 0 9 在油菜中的定植及对油菜菌核绢的防治研究摘要油菜菌核病是由核盘菌( S c l e r o t i n i aS c l e r o t i o r u m ( L i b ) d eB a r y ) 侵染引起的,是我国油菜的主要病害之一。油菜感染菌核病后,可直接导致减产5 “ - - 3 0 ,含油量降低1 5 。我国每年发病面积约4 7 0 万h m 2 ,直接经济损失达数亿元。由于化学农药防治存在污染环境、在食物链中残留、防效低、病原菌容易产生耐药性等问题,寻找有效的拮抗核盘菌的生物农药成为热点。本文以B a c i l l u sv e l e z e n s i sD M 0 9 为材料,对其抗真菌活性物质的理化特性

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