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1、、t Y 8 2 7 7 8 1 一Y 8 2 7 8 0 0 河必运钳六虿在职人员申请硕士学位论文论文题目学院( 医院)申请人姓名专业导师姓名及职称研究起止日期交稿日期低温快速冷冻对大鼠损伤动脉的影响河北医科大学第三医院刘志波外科学邵新中教授2 0 0 3 年1 0 月2 0 0 5 年2 月2 0 0 5 年3 月中文摘要第一部分 动脉损伤横型的麓立摘要目的；研究低温冷冻对损伤动脉的影响首先必须建立偏差小、可重复性较好的标准动物动脉损伤模型。F 前建立实验动物动脉损伤模型的方法很多，概括起来大概有动脉药物损伤法、缺血缺氧法、液压扩张法、球囊扩张法、机械冲击法、机械钳夹法、和机械牵拉法等几种
2、。本着操作简单、偏差小、可重复性好的原则我们选择了机械外力钳夹法作为本实验的动脉损伤方法，又由于随后进行的低温冷冻实验，动脉必须有较大的血管口径才能保证手术后的通畅率，考虑到实验动物易得、实验操作简单、实验后的成活率及实验成本等问题，故选用成年大鼠股动脉为实验血管。方法t 取健康成年S D 大鼠7 0 只，随机分成A G7 组，每组l O 动物只，麻醉固定后，用O 5 碘伏溶液消毒双下肢及腹部，铺无菌手术巾。手术显微镜下显露双侧股动脉，动脉显露后静置5 分钟以消除由于解剖所引起的动脉痉挛，漫微目镜标尺测量动脉外径，以腹壁浅动脉开口远心端1 C l T I 为中点，以主动脉血管夹( 血管夹宽度3
3、 r a m ，钳夹力1 5 0 牛顿)钳夹实验段动脉，A G7 组，分别钳夹1 0 7 0 秒钟，显微镜下观察动脉对损伤的反应，再次测量动脉外径后关闭伤口。6 0 天后解剖各组动物双侧股动脉检查其通畅率及病理变化。结果：1 动脉对损伤的即刻反应：各组动脉损伤前外径基本保持在0 8 0 O 0 6 m m 0 7 2 0 1 2 m m 之间，A D 组动中文摘要基本保持在O 8 0 0 0 6 m m 0 7 2 4 - 0 1 2 m m 之间，A D 组动脉随损伤的加重，动脉痉挛程度不断加强( 动脉外径由A 组的0 6 5 0 0 8 m m 逐渐减小到D 组的O 3 2 O 0 8 r
4、 a m ) D 组以后动脉外径随损伤情况的加重，痉挛情况反而不断减轻免：逐渐出现扩张趋势。( E 组损伤后外径7 7 o 0 5 r a m ，G 组损伤后外径O 8 3 0 0 5 m m ) 2 动脉对损伤的晚期反应：A D组损伤动脉随损伤情况的加重，其晚期通畅率首先经过个较快的下降( 由A 组的1 0 0 迅速降低为D 组的5 5 ) 。随后又出现一个较慢的下降段( D F 组通畅率：D 组5 5 E组4 0 ) 。最后G 组动脉通畅率又出现了一个急速的下降( F组通畅率5 ) 。3 损伤动脉的晚期病理变化：内膜层所有通畅动脉的内皮层均得到完全的修复；内膜下有程度逐渐加重的瘢痕增生，逐
5、渐有向血管腔内发展造成管腔狭窄的趋势；中膜层由基本正常逐渐出现局灶性瘢痕增生，随损伤加中不断严重，7 0 秒损伤组可见穿越动脉中膜全层的斑痕。外膜层有程度逐渐严重的炎症细胞浸润和外膜增厚。44 0 秒损伤组( D 组) ：内皮完整，内膜下偶见纤维组织增生，中膜有少量局灶性瘢瘦，外膜可见灶性炎症细胞浸润，外膜增厚不明显；损伤前动脉外径0 7 7 0 1 4 r a m ，损伤后O 3 2 0 0 8 m m有极为显著的统计学差异P 0 0 5T a b l e2 显示：健康血管经冷冻处理后其各期通畅率都为1 0 0 I 删。T a b l e3 显示吻合血管的通畅率为9 7 2 吻合加冷综速冻组
6、血管的通畅率为9 4 4 ，表明m 管经冷冻处理后其通畅率较对照组未发生明显的变化。即血管经冷冻处理后能较为顺利地进行吻合修复，晚期也无严重的影响血管通畅的并发症发生，这进一步扩大了该技术的应用范围舶。T a b l e4 冷冻后血管对刺激的反应mT a b l e4 显示：血管经冷冻处理后2 1 天、3 0 天、6 0 天，其对致痉挛刺激无反应。临床应用：C a v a d a s1 9 9 6 年在- - N 游离小腿内侧皮瓣移植受区发生顽固性痉挛的临床手术中，应用在体血管快速冷冻技术获得成功，手术后受区血管顽固性痉挛彻底消失游离皮瓣顺利成、活【4 5 1血管快速冷冻技术作为有效解除血管痉
7、挛的一种方法，迄今为止虽然在动物实验研究已有结论，甚至也运用于临床并取得成功，但是在体血管快速低温冷冻技术是项剧烈的血管解痉措施，其适应症，特别是对其安全性仍需作进一步的探索。7 冷冻后血管的血流动力学变化及通畅的原因血管经低温冷冻处理后，各层细胞组织均变性消失1 6 “，但是由于动脉壁各层膜结构的完整保存，实验显示冷冻后的m 管仍然保持很高的通畅率【6 2 】，其主要原因是因为冷冻处理综述后血管具有较大的口径和较大的血液流速、流量。I i 丑流的冲刷作用使血小板凝集成的白色血栓不能聚集，从而阻止了继发血栓的形成1 63 、晒J 。另外，冷冻处理后血液性质并未发生改变，在一定程度上也对血管起到
8、了一定的保护作用。 8 在体血管低温冷冻的适应症一些致痉原因不明，或原因虽然明确但一时无法去除的顽固性、阵发性痉挛，常规的治疗血管痉挛的方法不能起效或效果不佳 6 6 1 ，此时，必须采取一种特殊的强有力的手段迅速解除痊挛【2 J ，否则一任痉挛持续将导致严重的后果。在这种情况下在体血管快速冷冻技术就有了临床应用的潜在价值。研究发现，在体血管快速低温冷冻具有较好的安全性，尤其值得注意的是，血管经快速冷冻后，其痉挛能力的消失几乎是永久性的，这在预防血管痉挛发生上，或者说在血管痉挛性疾病的治疗上，具有非常好的应用价值。9 实验与临床评价与其他解痉方法比较，在体血管低温冷冻具有疗效确实可靠、起效迅速
9、持久，只需一次性治疗等诸多优点。但即使如此由于冷冻实验是一种对血管壁的灭活后再生的过程【6 ”，方法比较剧烈，而值得注意的是，以往所发表的文章都是以基本正常的血管为实验对象的，但是在临床上发生血管顽固持续性或顽固阵发性痉挛的血管往往都是一些损伤的血管，对于这些血管，在体快速冷冻技术是否仍然适用，目前还未有报道。虽然C a v a d a s 已报道了一例成功的临床病侈1 j t 4 ”，但是该技术能否安全运用于临床还有很多基础的工作要做。l O 关注的问题在B e r t e l l i 所报道的冷冻实验中，经过冷冻处理的血管综速有一个特性很值得关注，那就是冷冻血管恢复后其痉挛能力大为减退。B
10、 e r t e l l i 认为该种情况的发生原因可能有三：“一是因为冷冻后血管外膜交感缩血管神经纤维基本上未见恢复，这就是说神经性血管收缩能力基本上消失；二是由于冷冻后血管基本 二是在最大限度扩张的情况下修复的，这时修复后血管壁肌层厚度减小细胞极性消失，相应的其收缩能力也人为减小：三是平滑肌细胞在血管壁框架结构的最人扩张状态下进行修复后，其收缩能力将大为减低【6 8 。所以冷冻对血管的解痉能力几乎是永久的。这一点的意义超 l j 了单纯治疗显微外科血管解痉，在某些血管痉挛性疾病的治疗，t ：似乎更有潜在的价值。1l 展望在体血管快速冷冻是一项具有发展前途的治疗血管顽固性、阵发性痉挛的新技术
11、，但最终应用于临床，还有待于进行安全性和适应症等方面的进一步基础和临床研究。相信随着动物实验的不断进步和临床经验的不断积累，在体血管快速冷冻将会成为一项用途广泛的临床实用技术，低温医学在临床方面的应用也会越来越多。综述附图F i g 1H i s t o l o g i cv i e wo f t h ea r t e r y( H E 1 0 0 、F i g 2H i s t o l o g i cv i e wo f t h ea r t e r y3d a y sa f t e rf r o z e n( H E 1 0 0 、综述F i g 3H i s t o l o g i ev
12、 i e wo f t h ea r t e r y1 0d a y sa f t e rf r o z e n ( H E1 0 0 )F b4H i s t o l o g i cv i e wo f t h ea r t e r y2 1d a y sa f t e rf r o z e n ( H E4 0 m综述F i g 5H i s t o l o g i cv i e wo f t h ea r t e r y6 0d a y sa f t e rf r o z e nf H E l o o )综述参考文献lG uY d ，W uM M ，L iH L C i r c u l
13、a t o r yc r i s i s i nf r e et o e - t o h a n dt r a n s f e ra n di t sm a n a g e m e n t ：1 C l i n i c a le x p e r i e n c e R e c o n s t rM i c r o s u r g e r y , 19 8 9 ，5 ：112C a v a d a sP C ，V e r a s e m p e r eF J ：I nv i v om i c r o a r t e r i a lf r e e z i n gE x p e r i m e n
14、t a ls t u d y m i c r o s u r g e r y ，1 9 9 6 ，1 7 ：0 0 0 0 0 03王成琪，陈中伟，朱盛修实用显微外科学人民军医 H 版社，1 9 9 2 ，1 0 4 1 0 54G o d i n aM E a r l ym i c r o s u r g i c a lr e c o n s t r u c t i o ni nc o r n p l e xt r a u m ao ft h ee x t r e m i t i e s P l a s tR e c o n s t rS u r g ，19 8 6 ，7 8 ：2 8 5
15、2 9 15A r i m i t a g ew j ，M o s ss j ，E a s r yd l ，e ta 1 E f f e c t so fO Sm p t i cs t r e s so nr a b b i tv e s s e le n d o t h e l i u m C y r o b i o l o g y ，1 9 8 8 ，2 5 ：4 2 5 - 4 3 96H a g em ，B o h n k es j 。C a r p e n t e rJ F , e ta 1 L a t e n te n d o t h e l i a lc e l ld a m a
16、 g ea f t e re x p e r i m e n t a lc o r n e a lc y r o p r e s e r v a t i o n a r c hc l i n e x p o p h t h a l m a l ，19 9 3 ，2 3l ：5 2 9 - 5 3 27W u s t e m a nm c ，B o y l a n ，P e g gd e ，e ta l 。C y r o p r e s e r v a t i o no ft h er i b b i t sc o r n e a si nd i m e t h y ls u l f o x i d e I n v e s to p h t h a l m o lv i s s c i ，1 9 9 7 ，3 8 9 ：1 9 3 4 一1 9 4 38王涛，顾玉东，刘志波在体血管冷冻解除痉挛
