免疫组化染色机种类介绍

《免疫组化染色机种类介绍》由会员分享，可在线阅读，更多相关《免疫组化染色机种类介绍（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、自动化免疫组化染色机种类介绍免疫组化的传统技术正在受到新的快速高敏的新技术的挑战，一方面是新试剂的推出，如SP 、EPOS 、 Envision 和 CSA ，另一方面是自动免疫组化染色机的问世。免疫组化技术正进入一个新的发展阶段。从先 进国家免疫组化规范化或标准化的进程来看，自动免疫组化染色机的应用几乎贯穿始终，早在20 世纪末 已得到极大的普及， 然而国内的自动免疫组化染色机应用则在近几年才得以发展。浙江省肿瘤医院作为省 内较早应用的少数单位之一， 在自动化免疫组化染色的使用和质量控制方面获得些许经验，在此做简单的 介绍交流。自动化免疫组化染色技术是由电脑控制整个染色程序的免疫组化染色机，

2、具有自动加抗体、自动冲洗、 显色、复染及预处理等功能，有全自动和半自动、封闭型和半开放型之分。根据不同仪器大小，每次染色 20240张切片不等，整个染色程序约需6090min 左右，它不仅可以应用于免疫组化染色，某些仪器还 可应用于组织化学染色、特殊染色及原位分子杂交染色。目前较为理想的仪器为Roche公司、Lecia 公司 及 Thermo公司的产品等。下面对不同机型的自动免疫组化染色机的特点分述如下。Thermo公司的 LabVision Autostainer 该机型属开放式半自动系统类型，用户可任意编辑所需试剂及模板，内建试剂兼容性检测。 切片特殊 染色模板可任意调整试剂量、 孵育时间

3、。体系开放保证可适就性强， 即可同时运行不同检测试剂盒和不同 的染色程序及不同厂商生的的一抗。使用单一探头， 探头材料为特氟伦包被不锈钢，检测探头交叉污染残 留物 99%( 总体积 ) 。联合使用配套的抗原修复仪， 可实现脱蜡与抗原修复一步完成。 DAKO 公司的 Autostainer系 LabVision Autostainer贴牌产品，配合使用DAKO 的 Flex 检测系统可获得 极为敏感的免疫组化结果。早期的Biogenex i6000TM 全自动染色仪亦属该类型产品，不同的是其加样头 采用标准的 Tip 头加样，完全避免交叉污染的风险。Lecia 公司的 Bond-Max 该机型属

4、半开放式全自动系统类型，仅针对一抗完全开放， 用户可以根据个人的偏好使用任何品牌的 一抗。独有的检测系统内包含专利的Compact Polymer 技术（紧凑型聚合物）相比传统方法而言，信号放 大作用、穿透力能力更强。 该检测系统类似于增强型的Polymer 技术，可以使阳性显色密度更高， 背景更 清晰。独特的 Covertile专利技术在玻片表面增加一个塑料罩，为免疫反应提供一个封闭的孵育环境，防 止试剂挥发， 既确保样品的安全也进一步节省抗体的实用。Covertile会轻轻将液滴铺散到玻片的规定区 域，确保试剂均匀分布到组织的表面，既可防止组织的损伤，又使抗体的作用更均匀，染色结果更可靠。

5、 尤其是独特的温控技术可实现每张切片独立温控，提供最佳的反应动力学环境。 免疫组化的所有步骤从烤 片、脱蜡、抗原修复、阻断、标记一炕、标记二抗、显色直到复染都可以由Bond-Max自动完成，真正实 现全自动操作。由于Lecia 公司收购了 Novocastra 试剂公司，该平台可能最优化组合两者的优点，有利 于最大限度降低假阳性或假阴性以提高诊断质量。Roche公司的 Benchmark Ultra 该机型亦属半开放式全自动系统类型，该免疫组化和原位杂交染色仪由Ventana Medical Systems 公司（美国亚利桑那州， Tucson）生产并提交。该成熟的临床检测用仪器及相关试剂，已

6、获美国FDA或欧 洲 CE相关认证，并于 2009 年获医疗设计杰出奖。 该平台需配备原厂的相关试剂，仪器和试剂同属一套系 统，更加保证了结果的准确性和溯源性。较有特色的是具有专利液体封盖膜技术（LCS ），可有效防止试 剂挥发，防止干片，提供稳定反应环境，保证染色均一。并且专利空气涡流混匀技术，可保证组织全层覆盖，试剂充分混匀，避免“边缘效应”及“阶梯效应”。类似的专利 Thermopad温控技术也可实现每张 切片独立温控， 提供最佳的反应动力学环境。 尤为可贵的是可支持多种实验方案（IHC, ISH, SISH, IF）， 是目前可实现较为齐全的多样化及个性化方案的检测平台。综上，从大多数

7、仪器的特点来看， 自动免疫组化染色机规范了免疫组化染色的操作步骤和方法，方法 稳定，结果重复性较佳；部分机型由于使用了增敏试剂，提高了敏感性；由于采用独特的抗体覆盖系统， 抗原抗体反应较为均匀， 反应时间相应缩短；缓冲液的均一稳定洗涤，降低了非特异性背景染色； 自动控 制各种抗体和试剂加样，减少了人工操作。现代化的病理科实验室对效率、成本、效益、质量和结果重复 性等方面的要求愈来愈高，解决方案就是免疫组化试剂的标准化和染色的自动化。 需要指出的是， 国内往往仅局限于使用自动化免疫组化染色仪器，而非从整体上构架建立一套完整的 自动化免疫组化染色网络系统。因此，建立在自动化免疫组化染色基础上的质量

8、控制尚显稚嫩，从病理诊 断医师发出指令直至完成制片并形成反馈，实现信息流的网络化管理将是未来的方向。再者，冰冷机器背 后人的因素永远是最根本的要素。仪器的正确使用， 离不开使用者的维修与保养。 比如仪器放置环境的温 度，不间断电源的配备。使用前检查缓冲液、蒸馏水、一抗和检测系统是否足量。严格按照程序要求清洗 机器的加样系统及液流系统等等，对确保免疫组化结果的稳定性极为重要。 做好 IHC 并非易事，自动化也好手工操作也好，其基本的要素是一致的。IHC 所用抗体是最核心的 试剂。抗体的质量直接影响免疫组织化学的结果评估，甚至影响诊断。因此，在选择抗体时，应严格认真 选择所用抗体， 应选择有良好资

9、质的经销商和厂家的产品；应该有规范的抗体贮存方法和防污染措施。新 近购入的抗体和不同批号的抗体必须有探索最佳染色条件的预实验。对于每一种抗体均应有阴性和阳性对 照。同时，应根据其特点确定抗原修复的方法，既保证能充分暴露所要检测的抗原，又要避免过度修复而 导致假阳性结果。在染色方法的选择上，也应该考到内源性物质( 生物素、过氧化物酶、碱性磷酸酶等) 的干扰。只有在各个环节、 细节都认真研究， 然后以常规的形式相对固定下来，才能确保 IHC的结果可靠。 也就是说， IHC的从业人员和实验室应逐渐建立认证制度。 目前的临床病理诊断已离不开免疫组织化学技术，而没有免疫组织化学技术亦很难说有现代的临床诊 断病理学。 另外，随着法制观念的普及和增强，患者的法律意识和维权意识亦不断增强，分子病理学的飞 速发展也在给我们带来方便的同时， 使得标准化的问题变得更为迫切。 这就要求我们的各项工作要规范化， 要有严格的质量控制和高度的自动化。相信随着自动免疫组化染色仪器及试剂成本价格的下降，必将在各 大医院得到推广应用，从而推动病理科实验室现代化的进程。