《自体软骨膜复合移植修复鼻软骨损伤的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《自体软骨膜复合移植修复鼻软骨损伤的实验研究（37页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、自体软骨膜复合移植修复鼻软骨损伤的实验研究R e p a i ro ft h er a b b i tn o s ec a r t i l a g ed e f e c t sw i t ha u t o g e n o u sp e r i c h o n d r i u m D B Mc o m p l e xP o s t g r a d u a t e ：D uJ i a n gS u p e r v i s o r ：P r o f P i n g J i a n gG e P r o f S h a o H u aC h e nA b s t r a c tO b l e f t
2、：T os t u d yt h er e p a i rp r o c e d u r eo ft h er a b b i tn o s ec a r t i l a g ed e f e c Bw i t ha u t o g e n o u sp e r i c h o n d r i u mH ) B Mc o m p l e xi nr h i n o p l a s t ya n dv o c a lf o l dw o u n dh e a l i n g M e t h o d s ：1 、s i x t e e na d u l tN e wZ e a l a n dr a
3、 b b i t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t ot w og r o u p s ，c r e a t e dt h eb o t hs i d e sc a r t i l a g ed e f e c t so nt h en o s e ，T h ef i r s tg r o u p ：a u t o l o g o u sp e r i c h o n d r i u m a l i o i o g o u sD B Mc o m p l e xw a si m p l a n t e di n t od e f e c ts
4、i t ei nl e f ts i d ea n da u t o l o g o u sp e r i c h o n d d u mw e r ei nr i g h ts i d e ，T h es e c o n dg r o u p ：a u t o l o g o u sp e r i c h o n d r i u m a l l o l o g o u sD B Mc o m p l e xw a si m p l a n t e di n t ot h ed e f e c ts i t ei nl e f ts i d ea n da u t o l o g o u se
5、 a rc a r t i l a g ew e r ei nr i g h ts i d e A l ls a m p l e sw e r ec o l l e c t e da t10w e e k sa f t e rt r a n s p l a n t a t i o n G r o s so b s e r v a t i o nh i s t o l o g ya n di m m t m o h i s t o c h e m i s t r yw e r eu s e dt oe v a l u a t et h ee f f e c t 2 、o n e 。s i d e
6、r e c u r r e n tl a r y n g e a ln e r V eW a sc u ti nt e na d u l tN e wZ e a l a n dr a b b i t s S a m el a t e r a lt h y r o i dc a r t i l a g eW a St r e a tw i n d o w s ，a u t o l o g o u sp e r i c h o n d r i u m a l l o l o g o u sD B Mc o m p l e xW a si m p l a n t e di n t ol a r y
7、n g e a li n t r i n s i ct i s s u e A l ls a m p l e sw e r ec o l l e c t e da t6w e e k sa f t e rt r a n s p l a n t a t i o n W eu s e dh i s t o l o g ya n di m m u n o h i s t o c h e m i s t r yt oe v a l u a t et h ec o n f i g u r a t i o no fD B M 3 、t h i r t ya d u l tN e wZ e a l a n
8、dr a b b i t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t os i xg r o u p s T h eb i l a t e r a lv o c a lc o r d sw r e r ec r e a t e di n j u r e dw i t hf o r c e p s W eu s e dr e a l t i m eP C Rt ot e s tt h ee x p r e s s i o no fT G F Bm R N A R e s u l t s ：1 ，t h ec h o n d r o e y t ec a l
9、 lb es e e l li nt h ea u t o l o g o u sp e r i c h o n d r i u r r ga l l o l o g o u sD B Mc o m p l e xg r o u p T h em o r p h o l o g yo fc e l li sn o r m a l P a r t l y , t h ec o n s t r u c t i o no fD B Mr e m a i n e d T h e r ea r ef e wc h o n d r o c y t e si nt h ea u t o l o g o u
10、sp e r i c h o n d r i u mg r o u p T h ec e l la n dt i s s u eo fc a r t i l a g ew e r en o r m a li na u t o l o g o u se a rc a r t i l a g eg r o u p C o m p a r e dt ot h ea u t o l o g o u se a tc a r t i l a g eg r o u p ，t h ee x p r e s s i o no fs 10 0p r o t e i nn os i g n i f i c a n
11、t l yd e c r e a s e di na u t o l o g o u sp e r i c h o n d f i u r r ga l l o l o g o u sD B Mc o m p l e xg r o u p ( P o 0 5 ) t h ee x p r e s s i o no fT G F B1a l s os i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e d ( P 0 0 5 ) ，软骨膜复合基质组与单纯软骨组之间差异有显著性( P 0 0 57 0 6 l o 0 5 ) ，软骨膜复合基质组与单纯软骨组之间差异有显著性
12、( P 0 0 5 ) 。1 8自体软哥膜复合移植修复鼻软骨损伤的实验研究25T G F Bl m R N A 表达只有第三部分有此检测，结果如下圈1 5P C R 循环曲线示意图：8 =d !d2广J， = 阳 ，7 Il【7 ，侄习乏主塞葺 “殇雾霪套 磁彩铺劳锈暮爝群1 憩淞予铲窃纷_伊阿。彳彳一= 1L 1 一 比较不同时间T G FBlm P N A 的表达变化。比较后找到其变化峰值，并分析术后组织相对于正常声带组织的基线的变化。结果以均数标准差( M e a w S D ) 表示，单位为循环阀值( C t ) 。数据呈非正态分布经对数转换后行相应数据处理。表3R c a l - -
13、 T i m e P C R 结果系统分析结果自体软骨膜复合移植修复鼻软骨损伤的实验研究T G F Bl m R N A 表达水平白手术创伤后逐渐升高，在前8 个小时内变化不明显，但是2 4 小时后升高明显，直至7 2 小时，其表达高峰为7 2 小时。其中：1 、0 小时组与4 8 小时组，O 小时组与7 2 小时组相比，T G F 1 3l m R N A 表达差异有统计学意义( P 0 0 5 ) 。2 、2 小时组与2 4 小时组，2 小时组与4 8 小时组，2 小时组与7 2 小时组相比，T G F 一1 3l m R N A 表达差异有统计学意义( P 0 0 5 ) 。3 、4 小
14、时组同7 2 小时组相比，T G F 1 3I m R N A 表达差异有统计学意义( P o 0 5 ) 。自体软骨膜复合移植修复鼻软骨损伤的实验研究讨论( D i s c u s s i o n )之前的研究表明，组织工程软骨利用可降解生物材料作为移植细胞的临时支架来诱生软骨细胞生成。尽管软骨细胞移植在之前的临床以及病理方面取得了较满意的结果，但是其细胞的表型和增殖能力在之前却未详尽分析【l0 。，新生细胞表型和增殖能力分析对于自体软骨移植是十分重要的。首先，新生软骨细胞应具有其圆形外观，正常形态不仅标志正常的细胞表型，并且对细胞外基质的形成起重要作用1 1 1 1 。其次是S 1 0 0
15、 蛋白的表达，其蛋白可作为正常分化软骨细胞表型的胞浆标记物【1 2 1 。T G F 1 31 超级家族在软骨的生长与分化中起到重要的作用l l3 1 。一般认为T G F 1 31 是具有多种生理功能的多肽细胞因子，在软骨细胞中的主要作用是合成代谢，刺激蛋白多糖和D N A 合成【l4 1 。此外，T G F p l 对软骨细胞分化的双向调节作用有关，促进分化早期的软骨细胞D N A 复制，从而促进软骨细胞增殖，而抑制分化末期的软骨细胞增殖【l5 1 。而F u k u m u r aK 等曾报道在软骨发生过程中，T G F l 3 1 、T O F I B 2 、T G F 3 3 在软骨
16、细胞的表层、过渡层及成熟度很低的细胞层中表达强烈【16 1 。在软骨细胞分化早期，促进未分化的间充质细胞形成软骨【17 1 。本实验中，大体标本观察，自体软骨膜同种异体脱钙骨D B M 复合物移植后1 0 周体积没有明显变化，且炎症反应轻，提示该材料至少可以提供l O 周的支架作用，有望替代自体软骨作为移植物，特别是自体软骨缺少时。H E 染色和甲苯胺蓝染色结果提示自体软骨膜同种异体脱钙骨D B M 复合物可以诱导软骨样细胞生成，但是细胞数量较少，尚未成熟的梭形或扁圆形外观的软骨细胞比例高，其基质仍有部分残留，提示在1 0周左右长时间内，自体软骨膜同种异体脱钙骨D B M 复合物可以诱导软骨细胞分化，并为其分化提供支架和内环境，只是分化效果不如自体软骨好，这有待进一步完善其分化效果的研究，比如利用细胞因子T G F p l 等浸泡或注射等。S 一1 0 0 表达局部不如自体软骨移植强烈提示自体软骨膜
