《肺炎链球菌体内诱导基因的筛选及初步鉴定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《肺炎链球菌体内诱导基因的筛选及初步鉴定（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、!“ 卷! 期 #$“ 年 % 月 ! 日微生物学报 !“#$ %#*5作者简介： 孟江萍 （*?( ） ， 女， 四川省都江堰市人， 博士研究生， 主要致力于细菌致病分子机理的研究。435672： 5A2728#$;*“5收稿日期： #$新生小牛血清和 甘油保存。!“%体内诱导基因片段的克隆和测序 应用酶切自连法， 使整合到染色体上重组自杀质粒脱落下来并重新环化， 首先提取白色菌落的染色体 *M6， 用 4“5+$酶切， 回收酶切片段后， 用*M6 连接酶使酶切片段自身环化， 在含 5GM4L8E9?9E AAN EFKLF34L8K，E877F69F48M4L8E9?9E AAN EFKL
2、F!4L59:8 =8OG5898959:8 Q9577FLGF8548 RKL- L8L9=F;7E5P8494 99=F;7E57548 )%4L89P84944L%K58G957 G54LG58G，)+JM6959:8 ?D9FP89E57 LGF89P 8P89E57 LGF89P W94F7G59FP89E57 LGF89P89E57 LGF89P89E57 LGF89P89E57 LGF89?!-#读数均低于线性范围下限， 说明这些菌株基本没有!M半乳糖苷酶活性， 与之在 YM;57 平板上呈现白色菌落一致， 证实这些基因在体外不表达； 将所筛选出的白色菌落体外增菌后， 以同样浓度
3、 （“ Z %#57 +*) 平板上为均已的白色菌落， 证实这些基因在体内表达。#讨论对于 ABC+ 而言， 报告基因的选择是一个关键问题， 它不仅会影响到筛选的可信度， 还会影响到筛选的可行性。目前 ABC+ 中应用的报告基因主要有： 管家基因、 抗生素耐药基因、“ #解离酶基因和绿色荧 光蛋白基因。这几种报告基因各有优缺点： 采用病原菌所必需的管家基因作为报告基因的 ABC+ 系统又可称为营养缺陷型， 是由 5P5?=， 可通过 A4B(- 序列与细胞壁肽聚糖共价结合。有研究表明 ?= 可能参与肺炎链球菌表面蛋白的分选或靶向作用)C， -.(/ 缺陷的菌株表面 8:;8*8=$4 + ,8
4、 %:$-8 （1*8%-*；1J/32K） ： *8%$8L 0:;8*$( %$*H(8-:846$0- 0:;8*$(%$*H(8-:8 I8-8+ ;,; *8 +78:$),+, T，T0*9 /P， !“ #$4.98-;$:;8*8=$ H+$-I +$I-;H*8!;II89 =H;I8-8+$+49)$ 92*/):2)$，“MMK， %： NMM B RK4 A U*$,H8( /D，39$- DJ，OH(8; D5，!“ #$4 2$:*0*6 -(6+$+ 0$( I8-8+ 8V7*8+89 +78:$ I8-80$0+6-;,8+$+4 + ?0 9!3，“MMS，
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