9311的抗性以及野败型细胞质雄性不育恢复性的分子遗传改良

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1、华中农、I k 大学硕士学位论文V8 0 8 6 2 3密级无9 3 1 1 的抗性以及野败型细胞质雄性不育恢复性的分子遗传改良I m p r o v e m e n to fR e s i s t a n c et oB a c t e r i a lB l i g h t 、S t e mB o r e ra n dR e s t o r i n gA b i l i t yt oW AT y p eo f9 3 1 1b yM o l e c u l a rM a r k e r a s s i s t e dS e l e c t i o n硕士研究生:杨子贤指导教师:何予9 即副教授

2、指导小组:何予卿副教授余四斌教授林兴华教授邢永忠副教授专业:生物化学与分子生物学论文提交日期:2 0 0 4 年6 月研究方向:水稻分子育种学位授予日期:华中农业大学生命科学与技术学院0 0 四年6 月A F L PB I Lc MD HF S TL R RM A SN I LN B SQ T LP C RR A P DR F L PS C A RS N PS S RS S L P谬筲缩略词表a m p l i f i e df r a g m e n tl e n g t hp o l y m o r p h i s mb a c k c r o s si n b r e dl i n e

3、sc e n t i M o r g a nd o u b l e dh a p l o i de x p r e s s e d s e q u e n c e st a g sl e u s i n er i c hr e p e a tm o l e c u l a rm a r k e ra s s i s t e ds e l e c t i o nn e a r - i s o g e n i cl i n e sn u c l e o t i d eb i n d i n gs i t eq u a n t i t a t i v et r a i tl o c ip o l y

4、 m e r a s ec h a i nr e a c t i o nr a n d o ma m p l i f i c a t i o np o l y m o r p h i s mD N Ar e s t r i c t i o nf r a g m e n tl e n g t hp o l y m o r p h i s ms e q u e n c ec h a r a c t e r i z e da m p l i f i e dr e g i o ns i n g l en u c l e o t i d ep o l y m o r p h i s ms i m p l

5、 es e q u e n c er e p e a ts i m p l es e q u e n c el e n g t hp o l y m o r i ) h i s mw i l da b o r t i v e中文摘要9 3 1 】是我国生产上应用面积较大的两系恢复系,同时又是红莲型三系杂交水稻恢复系之一:一其组配的超级杂交稻两优培九和三系杂交稻红莲优6 号。具有优质高产等特性。为了进一步提高其对白叶枯病的抗性、同时增加其对水稻鳞翅目害取( 如稻纵卷叶螟、二化螟和三化螟等) 抗性,我们利用常规回交育种的方法结合分子标记辅助选择将X a 2 1 - 5 因和新基因同时导入9 3 -

6、 - 1 1 中,在B C 3 b 家系中筛i 筮到8 个家系含纯合的一X a 2 基医和研基因,有两个家系与9 3 1 1 比较其遗传背景的回复率很高,达到9 0 5 9 ,在正常的田间条件下,改良的9 3 1 l ( 研) 、 9 3 1 l ( 翮) 和9 3 1 1 ( 口以砬,) 与9 3 - 1 1 表现出相似的农艺性状。且带有X a 2 1基因的株系及其杂交种均对白叶枯病显示出很高的抗性。但在自然诱发螟虫条件下,带有研基因的株系及其杂交种没有受到螟虫危害。这一结果表明,通过分子标记辅助选择将多个基因同时导入某一改良亲本,结合常规育种方法选择,具有快速、良好遗传改良效果。这一遗传改

7、良材料在农艺性状和配合力等方面基本保持了9 3 - 1 1 及其杂交组合的主要特征特性,拓宽和增强了其对白叶枯病的抗谱一和抗病能力,增加了9 3 一l l 作为恢复系所配杂交水稻的抗螟虫特性,具有较好的应用前景。另外,为了使9 3 “具有对野败型三系杂交稻的恢复能力,我们又将明恢6 3中第1 0 染色体上的恢复基因R f ( “) 通过回交育种方法结合分子标记辅助选择导入到9 3 1 】中。经3 次回交,在B C 3 F 1 的群体中,筛选蛩j 7 6 7 个含杂合R U ( “) 基因的改良型9 3 1 1 ,通过挑选其中3 个阳性单株与珍汕9 7 A 杂交以评价改良型9 3 1 1 的恢复

8、力,同时选择2 0 个综合农艺性状如结实率、株高、抽穗期等与9 3 1 1 相似的单株自交。存与珍汕9 7 A 杂交F I 的群体中,可育单株的自然结实率处于7 1 4 9 1 6 之蒯,甲均结实率为8 2 3 ,而不育类单株的自然结实率处于1 4 4 0 4 之间,平均结实率为1 7 3 ,不育单株与可育单株的分离比经卡方测验符合单因子1 :1 的孟德尔遗传分离比,这表明通过分子标记辅助选择已将R f ( “) 基因导入到了9 3 1 1中,舅二日表现出良好的恢复力。最后,我们从B C 3 F 2 的群体中选到了5 4 株恢复力良好的含纠,合月,f ,) 牿田的改良型9 3 1 1 ,农艺性

9、状和配合力的考察正在进行之叶,。A B S T R A C T9 3 11s e r v e da sa ne l i t er e s t o r e rl i n eo ft w o - l i n eh y b r i d w h i c hw a sw i d e l yu s e di no u rc o u n t r y Sr i c ep r o d u c t i o n i sa l s oar e s t o r e rl i n eo ft h r e e - l i n eh y b r i do ft h eH Lt y p e T h es u p e r - h

10、 y b r i dr i c e ,L i a n g y o uP e t9a n d ;H o n g l i a n y o u6 1w h i c hw a sm a t e db y9 3 1 1 ,h a s t h ec h a r a c t e r i s t i c so f h :i 曲y i e l da n d g o o dg r a i n _ q t m l i t y J no r d e r t oe n h a n c ei t sr e s i s t a n c et ob a c t e r i a lb l i g h t ( B B ) a n

11、 dl e p i d o p t e r 蛆s u c ha sl e a f f o l d e r , s t r i p e ds t e mb o r e ra n dy e l l o ws t e mb o r e re t c ,w ei n t e r g e s s e dx a 2 1a n dB tg e n e si n t ot h eg e n e t i cb a c k g r o u n do f 9 3 - 11b yb a c k c r o s ss c h e m e ,c o m b i n i n gw i t hm o l e c u l a

12、rm a r k e r - a s s i s t e ds e l e c t i o n - a n dp h e n o t y p i cs e l e d t i o n :T h r o I l g ht h r e eb a c k c r o s sa n dt w os e l fg e n e r a t i o n s ,e i g h tf a m i l i e st h a th a v eh o m o z y g o u sX a 2 1a n dB _ tg e n e sw e r eo b t a i n e di nt h eB C 3 F 3f a

13、m i l i e s T w of a m i l i e ss h o wh i g h e rr e c o v e r yp e r c e n t a g e o f9 3 11e v e nu pt o9 0 5 9 I nt h es u b s e q u e n tf i e l de v a l u a t i o n 9 3 l1 ( B t X a 2 1 ) a n di t sh y b r i ds h o wh i g hr e s i s t a n c e t o B Ba n ds t e m b o r e r T h ea g r o n o m i

14、cp e r f o r m a n c e o f i m p r o v e d9 3 - 1 1 ( 成) 、9 3 11 ( X a 2 1 ) a n d9 3 1l ( B 肠2 ,) w a sv e r ys i m i l a rt oo r i g i n a l9 3 11u n d e rn o r m a lc o n d i t i o n B u to nt h en a t u r a ls t e mb o r e ri n f e s t a t i o nc O n d i t i o n ,t h ei m p r o v e d9 3 1 1c o n

15、 t m g e dB tg e n ea n di t sh y b r i dw a sn o td a m a g eb ys t e mb o r e r T h i sr e s u l ts h o w s :I th a saq u i c k l ya n de x c e l l e n te f f i c i e n c yt oi n t r o d u c em u l t i p l eg e n e ss i m u l t a n e o u s l yi n t oac e r t a i ni m p r o v e dp a r e n tb yM A S

16、c o n j u n c t i o nw i t hc o n v e n t i o n a lb r e e d i n gm e t h o d T h ei m p r o v e dl i n ep e r s i s tt h em a i na g r o n o m i ct r a i ta n dc o m b i n i n ga b i l i t yo f9 3 11 ,s h o ww i d es p e c t r u mt oX o os t r a i n sm a de n h a n c e dr e s i s t a n c et oB Ba n ds t e mb o r e r T h u s ,t h i sl i n eh a sg o o dp r o s p e c ti nf u t u r ep r a c t i c a lu s e A d d i t i o n a l l y , i n o r

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