中药保护急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障的系列研究之三细菌移位的连续观察

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1、多达4 0 0 种以上,其中G 一菌群在肠腔内生长、繁殖、代谢过程中释放大量内毒素。肠粘膜屏障是阻止肠腔内的肠道细菌和内毒索穿越肠壁向全身播散的最重要屏障。在上皮无缺损的情况下,肠粘膜细胞间紧密连接是水溶性大分子通透的动态闸门,间断开放时,允许水溶性代谢物质通过,而细菌和毒素正常时不能通过。肠粘膜紧密连接有两类:绒毛上皮问的紧密连接孔径小而层次多;腺管间细胞紧密连接孔径大而层次少。H 2 0 及小分子( ,法国生物梅里埃血液细菌双相培养基,孵箱,菌落计数器。138 h r1 2 h r 2 4 h r 3 6 h r 连续观察各组门静脉血、腹水、肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏和肾脏细菌移人:实验室紫

2、外线消毒过夜,2 戊二醛溶液浸泡手术器械,高压蒸汽鼠板和敷料、手术巾单、手术农帽灭菌,其他相关物品7 5 乙醇浸泡,0 1 新洁尔灭浸洗动物,P V P I 切口消毒,造模后8 h r 、1 2 h r 、2 4 h r 、3 6 h r ,各组分别取存话大鼠3 只( s On = 3 4 、S A Pn = 3 x4 、A A 一3n = 3 x4 ) ,在无菌操作台上分别留取各组门静脉血、腹水、肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏和肾脏标本,其中门静脉血l m l 置生物梅里埃血液细菌双相培养基。腹水0 5 m l 及各脏器标本无菌切碎后接种血平板细菌培养皿( 每个脏器标本在血平板上接种4 个区域,每

3、个区域接种环刘3 次) ,腹水和脏器样本置孵箱4 8 h r ;门静脉血置孵箱7 2 h r 。1 4 结果表示法:以等级资料表示,在腹水、肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏和肾脏标本,“+ ”表示菌落数 1 0 5 c f u ;在门静脉血标本,“+ ”表示细菌培养阳性,“一”表示细菌培养阴性。1 5 统计学处理:统计学处理应用S P S S 软件进行,方法应用非参数检验( 秩和检验) ,P 0 0 5 为差异有显著性。2 结果218 h r 1 2 h r 2 4 h r 3 6 h r连续观察发现:S O 组大鼠门静脉血、腹水、肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏和肾脏标本均来见细菌移人;S A P 和A A

4、 一2 各时段组门静脉血随时同推移细菌移入阳性率增加;S A P 各组腹腔内各重要器官细菌移人随时间推移增加,A A 一2 干预后腹腔内各重要器官细菌移入减少( T a b 1 6 ) ;实验还提示腹水有较强抗感染能力。T a b 1B a c 时I a ln a 璐I a t l o nC o n d i t i o no fL i v e rI , iD i f f e r e n tG r o u p3 4 5T a b 2B a c t e r i a lT r a n s l a t i v nC o n d i t i o no fK i d n e yi nD i f _ f e

5、 r e n ! G r o u ps A PA A 2一十一+T a b 3B a c t e r i a lT r a n s l a t i o nC o n d i t i o no fM L Ni D i f f e r e n tG r o u pD G8 h r 1 2 h r2 4 h r3 6 I l r SOs A P从2T a b 4B a c t e r i a lT r a n s l a t i o nC o n d i t i o no fP a n c r e a si nD i f f e r e n tG r o u p:T a b 6B a c t e r

6、 i a lT r a n s l a t i o nC o n d i t i o no fP o r t a lV e i nB l o o dI nD i f f e r e n tG r o u pD G8 h x1 2 l r2 4 I r3 6 h“一”阴性;“+ ”阳性22 统计结果显示:8 h r 肝组织细菌移入P = 0 3 6 8 ;肾组织细菌移入P = 0 1 0 2 ;肠系膜淋巴结细菌移入P = 0 0 1 8 ;胰腺组织细菌移入P = 0 0 4 8 。1 2 h r ,肝组织细菌移人P = 0 0 6 0 ;肾组织细菌移人P = 00 4 7 ;肠系膜淋巴结细菌移入

7、P = 0 0 3 2 ;胰腺组织细菌移人P = 0 0 2 0 。2 4 h r 肝组织细菌移人P = 0 1 1 7 ;肾组织细菌移人P = 0 0 2 1 ;肠系膜淋巴结细菌移人P = 0 0 2 1 ;胰腺组织细菌移入P = 0 0 3 0 ;腹水细菌移入P = 0 0 7 8 。3 6 h r 肝组织细菌移人P = 0 0 2 1 ;肾组织细菌移人P = 0 0 1 8 ;肠系膜淋巴结细菌移人P = 0 0 2 0 ;胰腺组织细菌移入P = 0 0 2 0 ;腹水细菌移入P = 00 3 3 。3 讨论实验性重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜形态学研究,证明S A P 存在肠粘膜结构破坏,屏障

8、功能损害。S A P 小肠黏膜结构破坏,屏障功能衰竭,成为肠遭细菌移位引起肠源性感染的形态学基础。感染是S A P 并发症产生和死亡率增加的主要原因,但在人体无法观察感染过程。通过对实验性重症急性胰腺炎大鼠门静脉血、腹水、胰腺和腹腔内重要器官8 h r 1 2 h r2 4 h r 3 6 h r 细菌移位情况的连续观察,表明:包括门静脉在内,实验性重症急性胰腺炎大鼠各时段组腹水、肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏和肾脏均可见细菌移人,并且S A P 各组腹腔内各重要器官细菌移人随时间推移呈上升趋势;最常见的细菌是G一肠道细菌( 大肠杆菌、肠球菌、变形杆菌、枯草杆菌等) ,A A 2 干预后腹腔内各重要器官细菌移入减少。实验结果证明:“通里攻下,活血化瘀。清热解毒”减少细菌移位。实验还提示腹水有较强抗感染能力。国外有学者研究结果提示:从肠道移位的细菌和血源性感染相互作用,血源性感染在胰外器官起主要作用。我们的研究结果证明:除胰腺之外,S A P 早期还出现胰外器官细菌移居,移人的细菌来自肠道,而且胰外器官细菌移居先于血源性感染。4 结论S A P 早期就出现胰腺和胰外器官细菌移居,移入的细菌来自肠道;胰外器官细菌移居先于血源性感染;腹水有较强抗感染能力;“通里攻下,活血化瘀,清热解毒”减少肠道细菌移位。3 4 7

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