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1、微生物检验技术微生物检验技术- 直接涂片检查相关问题讨论直接涂片检查相关问题讨论 （一）（一）-2008.11.简要知识复习 ：抗感染非特异性免疫简要知识复习 ：抗感染非特异性免疫?非特异性免疫是天然性，缺乏特异性，即不针对某一种 特定细菌或病毒，对任何外来入侵的微生物，反应方式 都相似。非特异性免疫是天然性，缺乏特异性，即不针对某一种 特定细菌或病毒，对任何外来入侵的微生物，反应方式 都相似。?参与非特异性免疫反应的细胞主要是吞噬细胞，包括巨 噬细胞（大）和中性粒细胞（小），还有自然杀伤细胞 （也叫参与非特异性免疫反应的细胞主要是吞噬细胞，包括巨 噬细胞（大）和中性粒细胞（小），还有自然杀伤
2、细胞 （也叫NK细胞）。细胞）。简要知识复习 ：抗感染免疫反应的类型简要知识复习 ：抗感染免疫反应的类型抗菌免疫抗菌免疫主要类型主要类型非特异性免疫非特异性免疫特异性免疫特异性免疫相关微生物相关微生物抗毒素免疫抗毒素免疫吞噬为主免疫吞噬为主免疫抗体，补体， 吞噬为主免疫抗体，补体， 吞噬为主免疫以致敏淋巴 细胞介导的 免疫反应以致敏淋巴 细胞介导的 免疫反应吞噬 炎症补体吞噬 炎症补体抗体抗体致敏淋巴细胞致敏淋巴细胞+ -+ -+ + -+ + +/-+/-+外毒素病菌化脓性球菌外毒素病菌化脓性球菌某些革兰阴性菌细胞内寄生菌某些革兰阴性菌细胞内寄生菌白喉，破伤风，气性坏疽，肉毒梭菌等白喉，破伤
3、风，气性坏疽，肉毒梭菌等肺链，葡萄，溶链，一些阴性杆菌肺链，葡萄，溶链，一些阴性杆菌常见病原菌常见病原菌 SIgA粘膜局部作用 抗体补体的调理吞噬作用粘膜局部作用 抗体补体的调理吞噬作用TB，麻风，布氏，马鼻疽，沙门，军团，某些棒状杆菌等，麻风，布氏，马鼻疽，沙门，军团，某些棒状杆菌等立克次氏体，衣原体等立克次氏体，衣原体等简要知识复习 ：微生物的抗吞噬简要知识复习 ：微生物的抗吞噬?胞外菌胞外菌可通过胞壁外特殊结构抗吞噬可通过胞壁外特殊结构抗吞噬 胞内菌胞内菌（逃逸，杀伤）（逃逸，杀伤）?荚膜：细胞壁外包绕的一层粘液性物质，为疏水性多糖 或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞 的生
4、命活动。荚膜：细胞壁外包绕的一层粘液性物质，为疏水性多糖 或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞 的生命活动。?凡粘液性物质牢固地与细胞壁结合，厚度凡粘液性物质牢固地与细胞壁结合，厚度0.2m ，边界明显者称为荚膜（，边界明显者称为荚膜（capsule ）或大荚膜（）或大荚膜（macrocapsule）。）。?厚度厚度105CFU/ML其它涂片（二）过夜后的小便样本涂片其它涂片（二）过夜后的小便样本涂片（污染！）（污染！）轻度污染尿样本轻度污染尿样本严重污染的尿样本严重污染的尿样本其它涂片（三）：血培养中马尔尼菲青霉菌其它涂片（三）：血培养中马尔尼菲青霉菌骨髓中的骨髓中的PM（瑞氏染
5、色）（瑞氏染色）血培养瓶中的血培养瓶中的PM（革兰染色）（革兰染色）表葡表葡其它涂片（四）：使用抗菌药物后送样直涂其它涂片（四）：使用抗菌药物后送样直涂伤口分泌物中的鲍曼伤口分泌物中的鲍曼其它涂片（四）续：有意思的证实其它涂片（四）续：有意思的证实TIM作用后作用后AZT作用后作用后CFE作用后作用后A/S作用后菌落涂片作用后菌落涂片其它涂片（五）：生殖道分泌物涂片其它涂片（五）：生殖道分泌物涂片尿道分泌物：细胞内外（尿道分泌物：细胞内外（F，M）其它涂片（六）：分泌物涂片其它涂片（六）：分泌物涂片 尽快尽快区分放线菌和奴卡菌对临床经验治疗很有必要区分放线菌和奴卡菌对临床经验治疗很有必要革兰染
6、色革兰染色弱抗酸染色弱抗酸染色其它涂片（七）其它涂片（七） 创伤涂片（来源自地震伤员）创伤涂片（来源自地震伤员）气单胞菌厌氧菌破伤风？梭杆菌气单胞菌厌氧菌破伤风？梭杆菌气性坏疽病原菌气性坏疽病原菌-梭杆菌属一般在培养后才见到芽胞梭杆菌属一般在培养后才见到芽胞其它涂片（八）：湿片法其它涂片（八）：湿片法棉兰染色（马拉色菌）棉兰染色（马拉色菌）KOH压片（曲霉）压片（曲霉）三三.大便样本的涂片检查大便样本的涂片检查制动试验：制动试验：布朗运动与穿梭运动布朗运动与穿梭运动压片与悬滴法压片与悬滴法碱性胨水增菌后观察最佳！碱性胨水增菌后观察最佳！此图来源于网络此图来源于网络三三.大便大便菌群比菌群比（内
7、源性（内源性-抗菌药物相关）抗菌药物相关）讨论每天的工作：该如何报 告更好！讨论每天的工作：该如何报 告更好！三三.菌群比的资料复习（菌群比的资料复习（-）三三.菌群比的资料复习（二）菌群比的资料复习（二）“菌群比菌群比”实例实例1黄色软便黄色软便菌量基本正常或 轻度减少菌量基本正常或 轻度减少阳性杆菌：阴性杆菌约阳性杆菌：阴性杆菌约1：4杆球比约杆球比约5：1诊断意见：诊断意见：I度菌群失调度菌群失调“菌群比菌群比”实例实例2黄色稀便黄色稀便菌量基本正常或 轻度减少菌量基本正常或 轻度减少阳性杆菌显著减少，链球菌 明显增多阳性杆菌显著减少，链球菌 明显增多杆球比约杆球比约1：2诊断意见：诊断
8、意见：II度菌群失调度菌群失调“菌群比菌群比”实例实例3白色粘液便菌量显著减少白色粘液便菌量显著减少仅见大量阴性杆菌极少链球菌仅见大量阴性杆菌极少链球菌诊断意见：诊断意见：III度菌群失调度菌群失调三三.菌群比结果报告的讨论菌群比结果报告的讨论1.是否该增加细菌总量的内容？是否该增加细菌总量的内容？2.是否有必要增加外观，性状这类的描述？是否有必要增加外观，性状这类的描述？3.是否可以在电话里回答医生，观察细菌比例的动 态变化更为重要？是否可以在电话里回答医生，观察细菌比例的动 态变化更为重要？4.大便中出现单一真菌或铜绿，肺克等有必要做药 敏试验吗？大便中出现单一真菌或铜绿，肺克等有必要做药
9、 敏试验吗？大便样本有必要做抗酸染色吗？大便样本有必要做抗酸染色吗？小结：临床抱怨实验室结果不准确，多数原因出自痰样本培养结果！涂片检查简便易行（做不做，做什么！）注意与感染的相关性是今后应该加强的工作之一！小结：临床抱怨实验室结果不准确，多数原因出自痰样本培养结果！涂片检查简便易行（做不做，做什么！）注意与感染的相关性是今后应该加强的工作之一！不加选择的检测不加选择的检测优势菌就是感染菌优势菌就是感染菌抗感染免疫知识抗感染免疫知识涂片涂片 Smear培养培养 Culture感染感染 InfectionSCI很时髦的工作哦！很时髦的工作哦！谢谢大家谢谢大家欢迎访问：欢迎访问： 我国最大的临床微生物专业论坛我国最大的临床微生物专业论坛www.CLSI(微生物之家） 我国最大的医院感染控制论坛微生物之家） 我国最大的医院感染控制论坛(上海国际医院感染控制论坛）上海国际医院感染控制论坛）
