《PMSF对TOCP诱发OPIDN过程中母鸡神经系统内能量状态变化影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《PMSF对TOCP诱发OPIDN过程中母鸡神经系统内能量状态变化影响（75页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：塑垂丝日期：丝互：丝关于学位论文使用授权的声明本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。( 保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：也导师签
2、名：山东大学硕士学位论文P M S F 对T O C P 诱发O P I D N 过程中母鸡神经系统内能量状态变化的影响研究生周贵珍导师谢克勤教授中文摘要目的建立磷酸三邻甲苯酯( t d o r t h o e r e s y lp h o s p h a t e ，T O C P ) 诱导迟发性神经毒性( o r g a n o p h o s p h o r u se a s t e r - i n d u c e dd e l a y e dn e u r o t o x i c i t y ，O P I D N ) 及受苯甲基磺酰氟( p h e n y l m e t h a n e
3、 s u l f o n y lf l u o r i d e ，P M S F ) 保护的动物模型，利用萤光素酶生物发光法( f i r e f l y l u c i f e r a s e b i o l u m i n e s c e n c e ，F L B ) 测定成年罗曼母鸡中枢神经系统( c e n t r a ln e r v o u ss y s t e m ，C N S ) 和周围神经系统( p e r i p h e r a ln e l V O U Ss y s t e m ，P N S ) 中三磷酸腺苷( a d e n o s i n et r i p h o s
4、 p h a t e ，A T P ) 的含量，利用高效液相色谱法( h i g h - p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y ，H P L C ) 同时测定实验动物C N S 和P N S 中三种腺苷酸的含量并计算相应的能荷( e n e r g yc h a r g e ，e c ) 值。通过研究提前应用P M S F 对母鸡在T O C P 诱发O P I D N 过程中神经系统内能量状态变化的影响，进一步探讨T O C P 诱发O P I D N 的分子机制。方法1 建立T O C P 诱发O P I D
5、 N 及受P M S F 保护的的动物模型：成年罗曼母鸡8 0 只，随机分为T O C P 组( n = 4 0 ) 及P M S F + T O C P 组( I F 4 0 ) ，每组又随机分为染毒后d 0 、d5 、d1 0 、d1 5 和d 2 1 组( n = 8 ) ，其中T O C P 组的d 0 组为正常对照组。P M S F + T O C P 组4 0 只动物，一次摹c6 0m g & gP M S F ( 溶于D M s 0 ) ；2 0 h 后，两个d 0 组以外的其它“只实验动物，一次p 0 7 5 0 m g k g T O C P 。在染毒后相应的时间点处理各组动
6、物。2 观察实验动物O P I D N 症状：密切观察实验动物染毒前后一般状况的变化，每隔4d 测量体重，每天观察其O P I D N 症状并按8 级评分标准进行评价。3 测定实验动物神经组织中A T P 的含量：利用F L B 检测实验动物在各时间点大脑、小脑、脊髓、坐骨神经及胫腓神经组织中的A T P 含量。山东大学硕士学位论文4 测定实验动物神经组织中三种腺苷酸的含量并计算E C 值：利用H P L C 检测实验动物在各时间点大脑、小脑、脊髓、坐骨神经及胫腓神经组织中的A T P 、A D P 及A M P 含量，并计算相应的E C 值以进一步反映神经组织中的能量状态。结果1 实验动物体
7、重的变化T O C P 组动物的体重，与正常对照组相比，染毒后随着时间进展有逐渐降低的趋势，其中染毒后d2 1 降低了2 3 6 3 ( j o O 0 5 ) 。2 实验动物O P I D N 症状的进展T O C P 组动物在染毒后d5 出现间或的双腿运动轻微不协调，d7 出现明显的双腿运动中度不协调，d9 出现严重的、频发的站立和行走困难；之后O P I D N 症状进展迅速，从染毒后d1 2 开始，动物出现双腿实质性至完全性的瘫痪，d2 1所有动物完全瘫痪。P M S F + T O C P 组动物染毒后，与T O C P 组动物相比，O P I D N 症状出现明显延迟且进展相对缓慢
8、：动物从染毒后d1 1 开始出现间或的双腿运动轻微不协调，至d2 1 也未出现双腿实质性的瘫痪。3F L B 检测实验动物神经组织中A T P 含量的变化3 I 大脑组织中A T P 含量的变化T O C P 组动物大脑组织中A T P 含量，与正常对照组相比，染毒后d5 、d1 0均有升高，其中染毒后d5 升高了4 6 1 4 ( P 0 0 5 ) 。P M S F + T O C P 组动物大脑组织中A T P 含量，与其d 0 组相比，染毒后d 5 升高了8 6 8 8 ( P 0 0 5 ) 。”P M S F + T O C P 组动物脊髓组织中A T P 含量，与其d0 组相比，
9、染毒后d5 、d1 0 、d1 5 均有升高，其中d1 0 、d1 5 分别升高了3 7 5 3 ( P 0 0 5 ) ；A M P 含量在染毒后d5 、d1 0 、d1 5 、d 2 1 均有降低，其中d5 、d1 0 、d1 5 、分别降低了8 8 7 ( P 0 0 5 ) ，但染毒后d5 、d1 5 、d2 1 均稍有升高，而d1 0 稍有降低；A M P 含量在染毒后d5 、d 1 0 、d 1 5 均有降低，其中d 1 0 、d 1 5 分别降低了1 3 1 5 ( P 0 0 5 ) ；E C 值，在染毒后d5 、d1 0 、d1 5 、d 2 1 均有升高，其中d5 、d1
10、0 、d1 5 分别升高了1 3 6 1 、1 6 7 3 、3 2 5 6 5山东大学硕士学位论文( 均为P O 0 5 ) ，A M P 含量比正常对照组稍有升高( P 0 0 5 ) 。与其d0 组相比，P M S F + T O C P 组动物脊髓组织中A T P 含量在染毒后d5 、d1 0 、d1 5 均有升高，其中d1 0 、d1 5 分别升高了3 5 8 1 ( 尸 0 0 5 ) ，d 1 0 、d 1 5d2 1 均有降低，其中d 1 0 降低了7 1 3 ( P ，d 2 1 降低了3 3 3 5 ( P 0 0 5 ) 2D e v e l o p m e n to f
11、O P I D Nc l i n i c a ls i g n s1 1 1 ea n i m a l si nT O C Ps e tt o o ko ns l i g h ta n di n f r e q u e n th i n d l i m bi n c o o r d i n a t i o no nd5a n dt h i si n c o o r d i n a t i o nb e c a m em o d e r a t ea n dd e f i n i t eo nd7 ；a n i m a l ss h o w e ds e v e r ea n df r e q
12、u e n td i f f i c u l t yi nw a l k i n ga n ds t a n d i n ge r e c to nd9 ，a n ds i n c et h e nt h eO P I D Nc l i n i c a ld e v e l o p e dq u i c k l y ；s o m ea n i m a l sb e g a nt ot a k eo nv i r t u a lp a r a l y s i so nd1 2 ，a n da l la n i m a l ss h o w e dc o m p l e t ep a r a l
13、y s i so nd2 1 ；T h ea n i m a l si n t o x i c a t e dw i t hT O C Pi nP M S F + T O C Ps e t c o m p a r e dt oT O C Ps e t ,t o o ko nO P I D Nc l i n i c a ls i g n ss i g n i f i c a n t l yl a t e ra n dt h es i g n sp r o g r e s s e dm u c hs l o w l y ：t h ea n i m a l st o o ko nl i g h ta
14、 n di n f r e q u e n th i n d l i m bi n c o o r d i n a t i o no nd1 1 ，n ov i r t u a lp a r a l y s i sw e r eo b s e r v e do nd2 1 3A l t e r a t i o no f A T Pc o n c e n t r a t i o ni nt h ea n i m a ln e r v o u ss y s t e m , d e t e c t e db yF L B3 1A I t e r a t i o no f A T Pc o n c e
15、 n t r a t i o ni na n i m a lc e r e b r u m1 0山东大学硕士学位论文I nT O C Ps e t , t h eA T Pc o n c e n t r a t i o ni na n i m a lc e r e b r u m ，c c l l p a r e dt ot h en o r m a lc o n t r o lg r o u p 。w a gi n c r e 勰c do np o s t - d o s i n gd5a n dd1 0 ，i n c r e 嬲e db y4 6 1 4 o nd5 ( P O 0 5 )
16、 I nP M S F + T O C Ps e t ，t h eA T Pc o n c e n t r a t i o ni na n i m a lc e r e b r u m , c o m p a r e dt oi t sd 0g r o u p ，w a gi n c r e 弱e db y8 6 8 8 ( P 0 0 5 ) I nP M S F + T O C Ps e t ，t h eA T Pc o n c e n t r a t i o ni na n i m a ls p i n a lc o r d ，c o m p a r e dt o山东大学硕士学位论文i t sd0g r o u p ，w a sr e s p e c t i v e l yi n c r e a s e db y3 7 5 3 ( P O 0 5 ) I nP M S F + T O C Ps e t ，c o m p a r e dt oi
