SPEHPLC法同时快速测定血浆中更昔洛韦、阿昔洛韦和喷昔洛韦的浓度

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1、学位论文独创性声明本人声明,所呈交的学位论文系在导师指导下独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果也不包含本人己用于其他学位申请的论文或成果。与我。同r 作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明,愿意承担以F 责任和后果:1 、交回学校授予的学位证书:2 、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报;3 、本文按照学校规定的方式,对因不当取得学位给学校造成的名誉损害,进行公开道歉。4 、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名日期:年月日学位论文版权使用

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3、速测定赢浆中更昔洛书、 阿巷洛韦秘喷昔洛韦的浓度攮矮爨熬:建立网避块逮浏定虫装中核萤类抗瘸凑麴更替洛韦、融黄漆韦、喷昔洛书浓度的方法。方法:盘装样晶用A c c u B O N DI IO D S - C 8 ( 1 m L x1 0 0 r a g ) 涸魍萃墩小柱净化,经S i n o c h r o mO D S B P 色谱柱( 2 5 0 r a m x 4 6 r a m ,5 胂) ,在柱温4 0 。C 对,嗣0 0 1 5 m o l + L - 1 磷羧二氢锻( 稀磷酸调p H 3 1 4 ) 一单醇( 9 0 :1 0 ) 作为流动棚,以1 0 m L m i n l 的流

4、速,用岛嘌呤作内标,在如= 2 7 0 r i m和沁m = 3 7 3 n m 处,用荧党检测姥进行梭测。缩果,在本实验的条件下,三种药物洗脱时间不超过1 0 r a i n ,各药秘之间能达完全分离,鸟嘌岭与爨酱洛韦、更营涤韦与阿诗洛韦、婀营洛书与喷营洛韦的分离度分剐为5 1 ,4 0 ,4 8 ;更蓊洛韦、黼营洛书、喷曹洛韦的线性方程测定分别为:Y = 0 0 2 4 9 4 7 + 0 0 8 4 4 0 0 C ( r = O 。9 9 9 2 ) ,Y = 0 0 1 6 3 4 2 + 0 。0 7 8 9 6 8 C ( r = O 9 9 9 9 ) ,Y = 0 0 3 8

5、 8 5 9 + 0 4 4 0 3 4 C ( r - - - - 0 9 9 9 8 ) ;线性范围分别为O 1 0 - 一5 0 O 趣m L ,O 。1 0 - , 5 0 O I l g m L l ,0 , 0 4 2 0 0 # g 。m L 一:裣溺碾( S N - - 3 ) 分掰为0 0 5 p g 。m L “ 1 ,O 0 5 v , g + m L l ,0 , 0 l t g m L “ 1 ;各样品萃取回收率均大于7 0 * 0 ,方法回收攀在9 0 0 r - - 1 1 0 之间,日内和日间精密度豹R S D 均小于8 。鳍论:本方法简便、快速、准确、灵敏,阿

6、用于核苷类抗病毒药的盘药浓度测定,为核替豢抗病毒药豹合疆餍药、蓊代动力学鞋及生耪羁麓度的研究提供了科学的依据。关键谲;受茜洛书,阿营洛韦,喷莆涤韦,露糯攀驳,离散滚褐色谱法A b s t r a c to b i e c t i v e :T od e v e l o par a p i da n ds i m p l eH P L Cm e t h o df o rt h es i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no f a c i c l o v i r , g a n c i c l o v i ra n dp e n c i d

7、o v i rl r lp l a s m a ,M e t h o d s :T h ep l a s m as a m p l e sw e r ep u r l f l e db ys o l i d - p h a s ee x t r a c t i o nc a r t r i d g e s T h ec o m p o n e n t sw e r es e p a r a t e dO naC J sc o l u m nw i t ham o b i l ep h a s eo f0 0 1 5 t o o l L p h o s p h a t eb u f f e r

8、( a d j u s t e dt op H 3 1 4w i t hd i l u t ep h o s p h o r i ca c i d ) - C H 3 0 H ( 9 0 :1 0 ) a taf l o w - r a t eo f1 O r a L r a i n - 1 , t e m p e r a t u r e s 敷蘸钓。C 。a n dm e a s u r e db yf l u o r e s c e n c ed e t e c t i o nu s i n ga l le x c i t a t i o nw a v e l e n g t ho f2

9、7 0 n ma n da ne m i s s i o nw a v e l e n g t ho f3 7 3 n m G u a n i n ew a sc h o s e na st h ei n t e r n a ls t a n d a r d 。R e s u l t s :A l lc o m p o n e n t sw e r ee l u t e di n1 0m i n u t e sa n ds e p a r a t e de a c ho t h e r T h er e s o l u t i o n sb e t w e e ng u a n i n ea

10、n dg a n c i e l o v i r g a n c i c l o v i ra n da c i c t o v i a e i c l o v i ra n dp e n c i c l o v i rw e r e5 1 ,4 。 4 8 ,r e s p e c t i v e l y T h el i n e a r te q u a t i o n sw e r eY = O 0 2 4 9 4 7 + 0 0 8 4 4 0 0 C ( r - - - O 。9 9 9 2 ) f o rg a n c i c l o v i r Y = 0 0 1 6 3 鸵+

11、o ,0 7 8 9 6 8 C ( r - - 0 。9 9 9 9 ) f o r a e i c l o v i r a n d Y = 0 。0 3 8 8 5 9 + 0 4 4 0 3 4 C( r = O 9 9 9 8 ) f o rp e n c i c l o v i r ,r e s p e c t i v e l y T h el i n e a r i t yr a n g e df r o mO 1 0t o5 0 。O t g + m L lf o rb o t hg a n c i e l o v i ra n da e i c t o v i ra n df

12、r o mO 0 4t o2 0 O z g m U lf o rp e n c i c l o v i r r e s p e c t i v e l y A tas i g n a l - t o - n o i s er a t i oo f3 :1 ,t h ed e t e c t i o nl i m i tw a s0 0 5 # g m L “ f o rb o t hg a n c i c l o v i ra n dc i e l o v i ra n dO 0 1 # g m L “ f o rp e n c i e l o v i r , r e s p e c t i

13、 v e l y T h ee x t r a c t i o nr e c o v e r i e so ft 氛e s ed r u g sw e T ea l lh i g h e rt h a n7 0 a n dm e t h o dr e c o v e r i e sv a r i c df r o m9 0 t o1 1 0 T h ep r e c i s i o n ( R S D ) o f w i t h i n - d a ya n db e t w e e n - d a yw e r ea l ll e s st h a n6 ,C o n e l u t i o

14、 n :T l l i sm e t h o n di ss i m p l e ,r a p i d ,a c c u r a t ea n ds e n s i t i v e I tc a l lb ea p p l i e dt od e t e r m i n et h ec o n c e n t r a t i o n so fg a n c i c l o v i r , a c i c l o v i ra n dp e n c i c l o v i ri np l a s m as i m u l t a n e o u s l ya n dr a p i d l y ,

15、 a n dc a nh et h u ss u i t a b l ef o rt l s ei nm o n i t o r i n gt h e r a p e u t i cd r u g s ,s t u d y i n gp h a r m a e o k i n e t i c sa n db i o a v a i l a b i l i t i e si nh u m a n K e yW o r d s :g a n c i c l o v i r ,a c i c l o v i Lp e n c i c l o v i r , s o l i d - p h a s e

16、e x t r a c t i o n H P L C2蚕= 篙赢裟呐萋 | 懒戛一羽出西医强度毖甄土堂位避奎前言阿昔洛韦a c i c l o v i r ( A C V ) ,化学名为9 一( 2 - 羟乙氧甲基) 鸟嘌呤,更昔洛韦g a n c i c l o v i r ( G C V ) ,化学名为9 一( 1 ,3 一二羟基一2 一丙氧甲基)鸟嘌呤,喷营洛韦p e n c i c l o v i r ( P C V ) ,化学名为9 一 ( 4 羟基一3 一羟甲基)丁基 乌嘌呤,是目前临床上常用的核苷类抗病毒药,它们和内标物鸟嘌呤的化学结构见图l 。这三种药物进入细胞后,均先被磷酸化为三磷酸化合物,然后通过抑制病毒D N A 聚合酶活性,进而抑制病毒D N A 的合成和复制“1 。在临床中阿昔洛韦主要用于单纯疱疹病毒感染、带状疱疹、免

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