《捕获法ELISA检测TPIgM抗体在各期梅毒的诊断及疗效观察方面的临床应用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《捕获法ELISA检测TPIgM抗体在各期梅毒的诊断及疗效观察方面的临床应用（37页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、目录舢删删Y 17 6 1 9 t l f l l 4 I I I I I l 3 l l l lJ 3 J I I l l l一、摘要中文论著摘要1英文论著摘要5二、英文缩略语9三、论文前言10 U刖舌l+ 材料与方法1 1结果1 4讨论“17结论2 0四、本研究创新性的自我评价2 1五、参考文献2 2六、附录综j 苤2 4在学期间科研成绩3 3致谢3 4个人简介3 5中文论著摘要捕获法E L I S A 检测T P I g M 抗体在各期梅毒的诊断及疗效观察方面的临床应用目的梅毒是由梅毒螺旋体( T r e p o n e m a p a l l i d u m ，T P ) 引起的一种性
2、传播疾病，其主要通过性行为和血液传播，也可通过胎盘母婴垂直传播。近年来我国的梅毒发病率有逐年上升的趋势。梅毒患者是梅毒的惟一传播源，对梅毒进行早诊断、早治疗是控制其蔓延至关重要的一个环节。梅毒螺旋体可侵犯全身各脏器，造成多器官病变、功能失常、组织破坏，甚至死亡，对人们的健康构成了严重的威胁。由于梅毒螺旋体具有较强的传染性和病程的复杂性，且梅毒在早、中期临床表现不显著，常常造成病人对病情的忽视，给病人身体健康带来极大的危害，也使梅毒的传播更为加快。血清学检测是诊断梅毒的重要实验室检测方法。目前梅毒的血清学检测方法主要有两种：一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验，如快速血浆反应素环状卡片试验( R P
3、R ) 、甲苯胺红不加热血清试验( T I m S T ) 等，此类试验检测的是心磷脂抗体，为非特异性抗体检测试验，常用作梅毒的筛查试验，亦可用于梅毒的疗效观察、复发及再感染。由于此类实验受多种因素影响，常出现生物学假阴性和假阳性结果，对一、三期梅毒的阳性率不高，因此仅适于二期梅毒的诊断，而不适于诊断一、三期梅毒，包括潜伏梅毒、神经梅毒的诊断。作疗效观察时，常出现血清学固定，使临床医生难以判断治疗终点。另一类是梅毒螺旋体抗原血清实验，如梅毒螺旋体血球凝集试验( T P H A ) 、梅毒螺旋体明胶凝集试验( T P P A ) 、荧光密螺旋体抗体吸收试验( F T A A B S ) 、梅毒螺
4、旋体酶联免疫吸附试验( T P E L I S A )等，这类试验的敏感性高、特异性强，临床常用此类试验作为梅毒的确认试验。但是此类试验检测的是梅毒螺旋体I g G 抗体和I g M 抗体，而I g G 抗体长期存在，血清反应持续存在阳性，不能用作梅毒治疗的疗效观察。因此迫切需要寻求一种敏感性高、特异性强的梅毒早期检测方法，为临床早期诊断、早期治疗及驱梅治疗后的疗效观察提供确切的实验依据。抗梅毒螺旋体I g M 抗体是梅毒感染最早产生的抗体，患者一般感染后两周即可从血清中测出，因此是梅毒早期感染并活动的标志。经有效治疗后I g M 抗体消失，晚期潜伏梅毒患者出现I g M 抗体阳性，需要考虑是
5、否再感染或体内未清除病灶再燃的情况。此外，T P I g M 抗体对诊断先天性梅毒和神经梅毒具有重要意义由于I g M 抗体的分子量较大，不能透过胎盘屏障和血脑屏障等天然屏障，如若在新生儿血液中或成人脑脊液中检测到T P I g M 抗体，则可诊断先天性梅毒或神经性梅毒。目前认为T P I g M 抗体测定可用于：梅毒的早期诊断；梅毒治疗后的疗效观察；梅毒复发或再感染的判断；新生儿胎传梅毒的诊断；神经梅毒的诊断。本研究旨在探讨各期梅毒患者血清抗梅毒螺旋体I g M 抗体的检测情况和临床意义，并评价捕获法E L I S A 检测T P I g M 抗体对各期梅毒治疗后的随访意义。随着分子生物学、
6、免疫学和基因工程技术的迅速发展，随着基因工程技术制备梅毒螺旋体特异蛋白抗原的成功，T P I g M 抗体检测已经逐渐应用于实验室诊断中。但是目前各实验室对捕获法E L I S A 检测T P I g M 抗体检测方法应用于临床的评估较少，并且我国学者对T P I g M 抗体在疗效观察方面的研究开展的也较少。本实验通过大量的临床样本验证了捕获法E L I S A 检测对早期梅毒的诊断具有较高的灵敏度和特异性，在疗效观察方面优于R P R ，是一种良好的早期梅毒诊断和疗效观察的实验室指标，为我国日趋严峻的梅毒防治工作的改善奠定理论和实验基础。材料与方法一、实验材料本实验所有标本均来自沈阳市第六
7、人民医院性病门诊患者血清；快速血浆反应素环状卡片试验( I 冲R ) 试剂盒购自上海荣盛生物技术有限公司：梅毒螺旋体明胶凝集试验( T P P A ) 试剂盒购自日本富士株式会社；梅毒螺旋体I g M 抗体酶联免疫吸附试验( T P E L I S A ) 试剂盒由北京热景生物有限公司提供；2高速离心机( S i g m a ，U S A ) ；酶标仪( B I O R A DM o d e l6 8 0 ) ；洗板机( B I O - R A DM o d e l15 7 5I m m u r lW a s h ) ；电热恒温培养箱( D I 冲9 0 8 2 ，上海森信实验仪器有限公司公司
8、) ；微样加样器( E p p e n d o r ，G e r m a n ) 。二、实验方法1 、收集患者血清样本。2 、采用快速血浆反应素试验( I 冲R ) 和梅毒螺旋体颗粒凝集试验( T P P A )检测初诊未治疗患者血清，进行筛查和确认。3 、采用捕获法E L I S A 检测初诊梅毒患者梅毒螺旋体I g M 抗体，并与T P P A相比较。4 、对T P - I g M 阳性患者，于正规驱梅治疗1 个月、3 个月、6 个月、1 2 个月后分别采用R P R 及捕获法E L I S A 跟踪监测，进行疗效评估，分析两种方法的优缺点。结果1 、T P - I g M 检测阳性率在二
9、期梅毒组中最高，可达1 0 0 ；其次是一期梅毒，阳性率为7 0 8 ，结果经卡方检验，差异无统计学意义。两期合并的阳性率为9 0 4 。在潜伏期梅毒捕获法E L I S A 检测T P I g M 抗体的阳性率仅为2 3 3 ，显著低于早期梅毒( 庐1 2 4 2 ，P 0 0 5 ) 。在潜伏期梅毒T P P A 、捕获法E L I S A 的敏感性分别是9 8 8 、3 0 2 ，捕获法E L I S A 检测的敏感性明显低于T P P A 的敏感性，差异有显著性( 产1 2 0 5 6 ，P O 0 5 ) 。捕获法E L I S A 检测T P - I g M 抗体在潜伏期梅毒的阳性
10、率最低，仅为3 0 2 ，明显低于一期和二期梅毒，结果经卡方检验，差异有统计学意义( 庐1 2 4 2 ，P O 0 5 ) 。在潜伏期梅毒T P P A 、捕获法E L I S A 的敏感性分别是9 8 8 、3 0 2 ，捕获法E L I S A 检测的敏感性明显低于T P P A 的敏感性，差异有显著性( ，= 1 2 0 5 6 ，P O 0 5 ) 。见表3表3 ，1 2 8 例梅毒患者血清标本T P P A 、捕获法E L I S A 检测结果1 5蝴汝曩I 盟T l P n图l ，捕获法E L I S A 和T P P A 检测各期梅毒敏感性的比较三、6 4 例梅毒血清I 州抗体
11、阳性患者治疗后，不同时间血清R P R及捕获法E L I S A 阴转率的比较经规范驱梅治疗后，一期梅毒的R P R 于3 个月开始转阴，其3 个月、6 个月1 2 个月的阴转率分别为2 1 畅、7 1 4 、9 2 8 ，有2 列出现血清学固定，维持在1 ：2 的水平；一期梅毒的捕获法E L I S A 从一个月开始有转阴的病例，其1 个月、3 个月、6 个月、1 2 个月的阴转率分别为7 1 、3 5 7 、9 2 8 、1 0 0 。二期梅毒R P R 从3 个月开始有转阴病例，其3 个月、6 个月、1 2 个月的阴转率分别为8 3 、3 1 8 、8 3 3 。二期梅毒的捕获法E L
12、I S A 亦是从3 个月开始有转阴的病例，其3 个月、6 个月、1 2 个月的阴转率分别为8 3 、3 3 3 、9 1 6 。潜伏期梅毒R P R 治疗后从3 个月开始有转阴病例，其3 个月、6 个月、1 2 个月的阴转率分别为3 8 、2 6 9 、4 6 1 ；其捕获法E L I S A 是从1 个月开始有转阴的病例，治疗后1 个月、3 个月、6 个月、1 2 个月的阴转率分别为3 8 、3 8 、1 1 5 、5 0 。1 6表4 ，治疗后不同时间捕获法E L I S A 和R P R 转阴数的比较2 52 0薅 蔓1 5亟 辞l - 1 0餐5O1 月3 月6 月1 2 月治疗时问
13、图2 ，治疗后不同时间捕获法E L I S A 和R P R 的转阴趋势讨论+ 一期( T 卜I g M )二期( T P - I g M )潜伏期( T P I g u ) 一一期( R P R ) 一二期( R P R ) 一潜伏期( R P R )梅毒是由梅毒螺旋体感染人体后引起的一种性传播疾病，主要通过性接触、血液传播及母婴垂直传播。近年来梅毒有逐渐蔓延的趋势，危害较大，已经成为一个严重的公共卫生闻趔。梅毒螺旋体的重要致病因子包括1 2 种膜蛋白和几种溶血素 2 1 。当人体感染梅毒螺旋体后，会发生一系列的血清免疫反应变化，产生两类抗体1 3 】。一类是非特异性抗心磷脂抗体( 即反应素
14、) ，它是宿主对感染损伤的局部组织或细胞释放的心磷脂类物质发生的免疫应答，从理论上认为有损伤即可引起应答，也会随着病情的好转逐渐下降甚至消失。此类实验常用作梅毒的初筛和疗效观察。另一类是宿主对梅毒螺旋体外膜蛋白等抗原刺激发生免疫应答，产1 7生梅毒螺旋体特异性抗体I g M 和I g G 。本法敏感性和特异性较高，因此此类实验主要用于确认试验，但由于I g G 在体内持续存在，不能作为疗效观察或判断复发与再感染的指标。本实验中的R P R 检测的是第一二类抗体，有报道显示1 1 2 】反应素的消长曲线与梅毒的临床症状相关性良好，抗体效价随着病情的变化常与梅毒的活动相平行。从本实验结果可看到随着病情好转，除有2 例患者出现血清学固定外，其余的抗体效价均逐渐下降或消失。但R P R 试验不是梅毒的特异性实验，易出现生物学假阳性，可见于多种疾病，如结核、猩红热、恶性肿瘤及类风湿、系统性红斑狼疮和其他的自身免疫性疾病等。T P P A 、捕获法E L I S A 检测的是梅毒螺旋体特异性抗体。鉴于T P P A 的敏感性高、特异性强，目前临床上常用此试验作为梅毒的确认试验，从我们的实验结果显示T P P
