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1、优化短短芽孢杆菌施用技术对番茄和辣椒 幼苗生长的影响车建美 刘 波* 刘国红 陈倩倩 张海峰（福建省农业科学院农业生物资源研究所，福建福州350003）摘 要：从不同施用方式、不同浓度及不同施用次数等方面优化短短芽孢杆菌 FJAT-0809-GLX 的施用技术，并研究其对番茄和辣椒幼苗的施用效果。结果表明，短短芽孢杆菌叶面喷施和灌根结合施用显著增加了辣椒幼苗的株高和茎粗，处理 14d 后株高净增长为 20.00cm，茎粗净增长为 0.16mm。不同浓度短短芽孢杆菌均能促进番茄和辣椒幼苗的生长，其中稀释 500倍对番茄幼苗的促生效果最好，稀释 10 倍对辣椒幼苗的促生效果最好。短短芽孢杆菌不同灌
2、根次数对番茄和辣椒幼苗生长的影响不同，灌根 23 次对番茄幼苗生长效果较好，灌根 2 次对辣椒幼苗生长效果最好。关键词：短短芽孢杆菌 FJAT-0809-GLX；番茄；辣椒；幼苗生长等是微生物肥料中的常用菌种，对促进植物生长，提高抗病能力与品质具有明显效果（曹凤明等，2008；鲍朋和许章峰，2013；Asarietal.，2016；Islametal.，2016；Mengetal.，2016；Xuetal.，2016） 。短短芽孢杆菌（Brevibacillus brevis）属于短芽孢杆菌属，在自然界中广泛存在，由于其不含内毒素，能够形成芽孢，环境适应力强，具有较强与土著微生物的竞争力等 （
3、Panwaretal.， 2000） ， 在环保、生防、化工、食品等方面得到了很好的应用（黄学等，2006；葛慈斌 等，2009；Cheetal.，2015） 。研究表明，喷施短短芽孢杆菌 FJAT-0809-GLX 的菌体、发酵上清液及发酵液的番茄幼苗叶片数明显增加，茎长和茎粗也显著高于对照（车建美等，2015） ，但目前对其在田间的具体施用方法还未进行优化研究。为获得更好的田间施用效果，本试验从不同喷施方式、不同喷施浓度及不同喷施次数等方面研究短短芽孢杆菌 FJAT-0809-GLX 的施用技术及最适施用效果，以期为其田间的施用提供技术指导。1 材料与方法1.1 试验材料 试验于 2016
4、 年 8 月在福建省农业科学院农业车建美，女，博士，副研究员，专业方向：生物防治，E-mail：* 通讯作者（Correspondingauthor） ： 刘波， 男， 博士， 研究员， 博士生导师，专业方向：微生物生物技术与农业生物药物，E-mail：收稿日期：2017-07-21；接受日期：2017-10-13基金项目：福建省自然科学基金项目（2014J06012） ，农业部公益性行业（农业）科研专项（201303094） ，福建省农业科学院青年英才计划项目（YC2015-7） ，农业部农业微生物资源收集与保藏重点实验室开放基金资助项目（MRCP-2016-1）近年来，随着化学肥料和农药的
5、大量使用，许多环境问题不断出现，如大量不可再生能源浪费、土壤板结、农作物品质降低、土壤肥力下降及农田有机质不足等（曾玲玲等，2009） 。微生物肥料具有改善土壤、促进植物生长等优势，同时对环境无污染，具有广泛的应用前景（葛诚和吴薇，1994；葛均青等，2003） 。微生物肥料种类很多，包括细菌类肥料、放线菌类肥料以及真菌类肥料等，其中细菌类肥料中以芽孢杆菌居多（葛均青等，2003；Kloepperetal.，2004；Ort zcastroetal.，2008；张艳群 等，2013；Goswamietal.，2014；Cherif-Silinietal.，2016） 。地衣芽孢杆菌（Bacil
6、lus licheniformis） 、解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens） 、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） 、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）和巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）4343研究论文中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES2018（4） ：43-47中国蔬菜学术论文下载 www. c n v e g . o r g生物资源研究所微生物研究中心育苗室进行。供试短短芽孢杆菌 FJAT-0809-GLX 为本所农业微生物研究中心保存。辣椒幼苗（阿拉特） 、 番茄幼苗（金石王）和土壤均从厦
7、门如意生物科技公司购买。供试培养基为 NA 培养基。1.2 试验方法1.2.1 菌株发酵 从冻存管中取 10L 短短芽孢杆菌 FJAT-0809-GLX 菌液于 NA 平板中，划线，30培养 24h。用灭菌牙签挑取单菌落于 50mL 液体培养液，30、170rmin-1培养 24h。以 1%的接种量向装液量为 200mL 的 1L 三角瓶中加入发酵培养液，30、170rmin-1培养 48h，采用梯度稀释法统计菌体数量为 2.8108cfumL-1。1.2.2 短短芽孢杆菌不同施用方式对辣椒幼苗生长的影响 辣椒幼苗室内种植 7d 后，将短短芽孢杆菌发酵液（1108cfumL-1）稀释 100
8、倍施用。共设 3 个处理，处理 1：叶面喷施，CK1：喷水对照；处理 2：灌根，CK2：水灌根对照；T3：叶面喷施 + 灌根，CK3：叶面喷水 + 水灌根对照。每个处理 4 盆，每盆 4 株，3 次重复。叶面喷施用量为 20mL，灌根量为 100mL。分别于处理后 0d 和 14d测定幼苗株高、茎粗、叶片大小及叶片数，计算净增长量。1.2.3 短短芽孢杆菌不同浓度处理对番茄和辣椒幼苗生长的影响 番茄幼苗和辣椒幼苗种植 7d 后，将短短芽孢杆菌发酵液（1108cfumL-1）分别稀释 10、100、500、1000、10000 倍。采用无菌水作为对照。每处理 7 盆，每盆 2 株，3 次重复。灌
9、根量为 50mL。分别于处理后 0d 和 14d 测定幼苗株高、茎粗、叶片大小及叶片数。1.2.4 短短芽孢杆菌不同灌根次数对番茄和辣椒幼苗生长的影响 番茄幼苗和辣椒幼苗室内种植 7d后，采用短短芽孢杆菌发酵液稀释 100 倍对幼苗进行灌根处理。共设 4 个处理， T1： 定植时灌根 1 次；T2：定植时灌根 1 次，7d 后灌根 1 次，共 2 次；T3：定植时灌根 1 次，7d 和 15d 后各灌根 1 次，共 3 次；T4：定植时灌根 1 次，7、15、30d 后各灌根 1 次，共 4 次。采用无菌水作为对照。每处理10 盆，每盆 2 株，3 次重复。灌根量为 50mL。分别于处理后 0
10、、42d 测定幼苗株高、茎粗、叶片大小及叶片数，计算净增长量。1.2.5 数 据 处 理 试 验 数 据 采 用 SPSS 统 计 软件 one-wayANOVA 进行分析，差异显著性采用Duncan 氏新复极差法进行多重比较，以 P 0.05作为差异显著性判断标准。2 结果与分析2.1 短短芽孢杆菌不同施用方式对辣椒幼苗生长的影响从表 1 可以看出，叶面喷施 + 灌根处理的辣椒幼苗株高和茎粗显著增加，施用 14d 后辣椒株高净增长达到 20.00cm，茎粗净增长达到 0.16mm。3 种处理方式的叶片数和叶片长度均显著增加，叶面喷施处理的辣椒幼苗叶片宽度显著增加。灌根和叶面喷施结合使用对辣椒
11、幼苗生长的促进作用更好。表 1 短短芽孢杆菌不同施用方式对辣椒幼苗生长的影响处理净增长量株高/cm茎粗/mm叶片数/片叶片长/mm叶片宽/mm叶面喷施18.250.27b0.290.07a37.500.95a66.700.19a26.580.27aCK120.750.11a0.250.06a34.500.31b47.231.25b17.520.18b灌根19.250.30a0.280.04a35.750.82a53.350.16a19.370.16aCK219.750.84a0.190.05a32.250.17b52.400.12b19.440.16a叶面喷施 + 灌根20.000.92a0.
12、160.03a32.500.11a55.640.22a18.730.11aCK312.500.69b0.060.02b22.500.11b50.060.33b18.890.13a注：表中同列数据后不同小写字母表示差异显著（P 0.05） ，下表同。2.2 短短芽孢杆菌不同浓度处理对番茄和辣椒幼苗生长的影响2.2.1 不同浓度处理对番茄幼苗生长的影响 从表 2 可以看出，短短芽孢杆菌发酵液稀释 100 倍和 500 倍处理的番茄株高净增长显著高于对照及其他处理，净增长分别达 20.29cm 和 19.71cm。稀释500 倍处理的茎粗和叶片数显著高于对照和其他处理。稀释 10、100、500、1
13、000 倍处理均能显著促4444研究论文中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES中国蔬菜学术论文下载 www. c n v e g . o r g进叶片长度的增长。总体来看，短短芽孢杆菌发酵液稀释 500 倍对番茄幼苗促生效果最好。2.2.2 不同浓度处理对辣椒幼苗生长的影响 从表3 可以看出，不同浓度短短芽孢杆菌发酵液对辣椒幼苗生长均具有明显的促进作用，其中稀释 10 倍效果最明显，株高的净增长达 21.25cm，茎粗的净增长达 0.37mm，叶片数、叶长和叶宽均显著高于对照。2.3 短短芽孢杆菌不同灌根次数对番茄和辣椒幼苗生长的影响2.3.1 不同灌根次数对番茄幼苗生长的影响 从表
14、4 可以看出，短短芽孢杆菌灌根 2 次（T2）和 3 次（T3）处理的番茄幼苗株高、茎粗、叶片数和叶片宽度净增长明显高于对照和其他处理。其中灌根 3 次处理的株高净增长最大，达 54.40cm，叶片宽度和长度净增长也最大，分别达 4.50mm 和 6.60mm；灌根 2 次处理的茎粗和叶片数净增长最大，分别达到1.28mm和13.80片。 从总体来看， 灌根23次对番茄幼苗生长促进效果最好。2.3.2 不同灌根次数对辣椒幼苗生长的影响 从表5 可以看出，短短芽孢杆菌不同灌根次数对辣椒株高影响不显著。灌根 2 次（T2）和 3 次（T3）处理表 2 不同浓度短短芽孢杆菌对番茄幼苗生长的影响稀释倍
15、数净增长量株高/cm茎粗/mm叶片数/片叶片长/mm叶片宽/mm1018.001.23b0.450.05c5.570.11c3.140.06b2.290.06a10020.290.14a0.560.02b6.570.27b2.430.12d2.000.05b50019.710.41a0.740.03a7.000.21a2.860.04c2.000.06b100017.430.08b0.210.04e5.570.06c3.290.06a1.860.05c1000017.430.52b0.460.03c5.430.09c2.140.04e1.430.06dCK14.860.03c0.380.03d4.860.06d2.140.03e2.290.11a表 3 不同浓度短短芽孢杆菌对辣椒幼苗生长的影响稀释倍数净增长量株高/cm茎粗/mm叶片数/片叶片长/mm叶片宽/mm1021.250.12a0.370.05b28.500.26a59.880.21a25.580.09b10020.250.10b0.440.02a23.250.21c53.350.12b22.09
