《型雄性不育系与保持系》由会员分享，可在线阅读，更多相关《型雄性不育系与保持系（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、王世刚， 博士研究生， 沈阳农业大学园艺学院， 沈阳市东陵路 !“# 号，!#!$!， % 胶条技术出现以后， 双向电泳的分辨率和重复性得到了极大的提高， 能实现大规模的蛋白质分离。经多代回交转育的不育系和对应保持系， 它们的细胞核基因相同， 只是细胞质的差异通过与核基因互作决定了育性的不同， 利用不育系和保持系为试验材料可以消除因品种间的遗传差异对试验结果的影响。本试验选取辣椒细胞质雄性不育系及对应保持系花期叶片作为研究对象进行全蛋白质组分析， 用“B 分析软件进行比较分析， 发现两者花期叶片蛋白质整体上的差异， 为细胞质雄性不育机理的探讨提供参考。$% 材料与方法$1 $% 材料试验于 “
2、#? 年在北京 5#! 医院、 沈阳农业大学和辽宁东亚种子科学院蔬菜育种基地进行。辣椒;E/3F 等 电 聚 焦 电 泳 仪（:G 4 H9B 公 司 生 产） ， A3+IFJ33K!# 扫 描 仪（:G 4 H9B 公司生产） ， AHGL%9M N) ;I* 垂直电泳仪 （:G 4 H9B 公司生产） ， 恒温循环器， 高速台式离心机， ?， ! # $） ， 重悬浮沉淀“液氮与,6 .水浴中反复冻融 , 次 （每融 ! 次涡旋振荡 -345）“0 .、 -“ “ 1 2 离心 !“ 345， 取上清液供双向电泳分析。! - -A双向电泳分析A采用重新泡涨法 （45B2C:;C/DE;F
3、G495）6进行上样， 泡涨液母液 !“ 37 含 *39:7)!H;CF， 0 # %=939J/C59:K:LC， 双蒸水； 胶条采用 IMN ) O453） ， 用 X4:4W 水洗几次，用含 6“ #乙腈的 -6 339:7)!碳酸氢铵溶液 6“ 8!“ $7 浸泡胶片， 涡旋振荡 -“ 345， 弃去溶液， 重复， 直至胶片中的蓝色褪尽。还原、 烷基化： 真空离心干燥 -“ 345， 使胶片完全脱水， 加入 !“ 339:7)!$， 6S .水浴还原 ! /， 66 339:7)!碘代乙酰胺室温黑暗烷基化06 345。酶解： 用含6“ #乙腈的 -6 339:7)!碳酸氢铵溶液清洗，
4、 脱水， 加入 -6$7 修饰的胰蛋白酶溶液 （!“ 52 $7 溶于 -6 339:7)!碳酸氢铵） ， ,( .酶解过夜。肽提取： 振荡条件下， 用含有 - 6 # $R 型不育系线粒体多肽进行研究发现， 孕穗期线粒体多肽中， 不育系缺少 “. () 多肽复合物， 后证实该多肽复合物由分子量相同但等电点分别为 8HC L， ?FDEC8;=C996 B， 3;DT6GC?20. F G， F.HE=/48E/40， #*#， #“ （#） ： !* (67# 司智海， 刘植义7 普通小麦 W 型细胞质雄性不育系及其保持系线粒体多肽的电泳比较研究 D 7 遗传学报， #*#， #% （#）
5、：) ($(,/9X.=M FE/M.=M， X.=M Y2， W.=M Y4=M， L .07 （Z400M 4N Q4KL/820L2K， FE=9.=M ?MK/820L2K.0 =/K:/L9， /.4=/=M #$#6#）.2*(%-* :/=M LH4,;/-=:/4=.0 M0 08LK4VE4K:/: （!U,J?O+）.=; C?U,W_,CF .=.09:/:， -.V: 4N 0.N VK4L/=:NK4- 89L4V0.:-/8 -.0 :LK/0/L9 （ZCF）.=; -./=L./=K 0/=: 4N VVVK HK 43L./=; .=; .=.09:/:;7 WE K:20L: /=;/8.L;LEK HK :K.0 ;/NNK=L VK4L/= :V4L:， HE/8E -.9 3 K0.L; L4 -.0 :LK/0/L9 4N 34L.=9， ;/:L/=M2/:E/=M LE 0.: 4N ZCF.=; -./=L./=K 0/=: ;2K/=M N04HK/=M7=$1 ;)(72 JVVK， Z9L4V0.:-/8 -.0 :LK/0/L9（ZCF） ， .N VK4L/=:， WH4,;/-=:/4=.0 M0 08LK4VE4K:/: （!U,J?O+）6#
