非水相酶促合成癸酸偏甘油酯的研究

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1、!“ 卷 # 期 $%$ 年 ! 月生物工程学报 !“#$%(: -;3?),非水相酶促合成癸酸偏甘油酯的研究夏咏梅!方云!“章克昌$石贵阳$王征远!(江南大学!化学与材料工程学院;$生物工程学院,无锡$!A%4#)摘要对无溶剂非水相中癸酸与甘油的酶促酯化反应进行了研究, 发现 3- 等!以 6)0(* 5#%“%#脂肪酶催化癸酸与甘油酯化, 无溶剂相中 #%? 后癸酸转化率达 “5K; FRR8 等4以 8“#9(:)J-8 公司) 。其余分析用试剂均为分析纯或色谱级。除特别说明外, 所有反应原料使用前均经过分子筛脱水处理。固定化 !+$4#4+ +$/7+*0/#0 脂肪酶 (EFC, 聚

2、合物载体) , 橄榄油水解酶活为1%IJ; 固定化 6)0(* 5#%“%# 脂肪酶 (DDC, 无机材 料载体) , 橄榄油水解酶活为 15%IJ, 均由 *+ */0;UV 公司赠送。38R3, $#2% 型 NBCE, T?;-8Y? ZS。!“#方法!“#“!癸酸转化率的测定: 吸取反应物样品约 %)!H %)4J 于三角瓶中, 加 !%-C 25K酒精使溶解并终 止反应。以酚酞为指示剂用 *8MN 标准溶液滴定。 转化率! !% (;% ;I 5=7 的筒形玻璃反应器中, 用磁力搅拌使之均匀混合, 转速为 (11?97:6, 在水浴恒温下封闭反应 (考察脱水方式时除外) 至癸酸转化率

3、不再升高为终点。水的加入量以甘油质量为基准, 加酶量以癸酸质量为基准。#结果与讨论#“!不同脂肪酶的催化活性 图 / 为分别以 #$%,D7;,) 。 ,97;,) , 加酶量 /11S9F 癸酸, 封闭物系反应温度 %12。为保障数据的精确性, 在考察初速度效应时将加酶量降为 1S9F 癸酸并对不同加水量的初始反应速率曲线进行回归分析以求出初速度。图 初始加水量对平衡转化率和初速度的影响A:F8GNNM=J ;N :6:J:“, T“JM? =;6JM6J :6 F,I=M?;, ;6 JLM MKJM?:N:=“J:;6由图 可知, 甘油初始加水量在 /%C以下时封闭物系内反应初速度随加水

4、量增大而加快, 甘油初始加水量在 /C时初速度最快。甘油初始加水量在 /%C以上时平衡转化率有所降低, 说明此时水解作用逐渐明显, 因此综合考虑平衡转化率和反应初速度可选择 /C为最佳甘油初始加水量。#“$反应物摩尔比对癸酸转化率的影响 加水量固定为甘油质量的 /C, 加酶量 /11S9F癸酸, 封闭物系反应温度 %12。不同反应物摩尔比(甘油D癸酸) 对反应的影响如图 8? AB8C8?=81: = D8CCB: 012=BB=81A 8: 1E: A0!(281: 8: 1E: A0=CB B=?8:( -4 8: ?21A A0“(281: 8: 1E: A0=CB B=?8:( 34

5、8: ?21A A0!“#加酶量对癸酸转化率的影响 维持加水量为甘油质量的 “#$, 甘油与癸酸摩尔比为 “+“, 封闭物系反应温度 )%*, 不同加酶量下的反应结果如图 - 所示。当加酶量在 % F “%)(0+2: )/10#) /)#, (.+2: .+2) ? #-4*(/, + ?: 5 +0 =+%5% “(,#-$ )/10#) /)#, 3#*A#- *A( #04* 5A #- )2+4( 4;4*(.3#*A 5%5BC #-#*#/2 3/*(0 )+-*(-*,+22+3(, #- +1(- 4;4*(.?% “(,#-$ /22 *A( )/10#) /)#, /*

6、*A( D($#-#-$ #- +1(- 4;4*(.3#*A 5?C #-#*#/2 3/*(0 )+-*(-*% “(,#-$ 58E + )/10#) /)#, /* *A( D($#-#-$ *A(- *A( 0(./#-,(03#*A#- *A( #04* 5A #- )2+4(, 4;4*(. 3#*A 5%5BC #-#*#/2 3/*(0)+-*(-*,+22+3(, #- +1(- 4;4*(. +0 ?A *A(- 7-,(0 E.F$ +0 /-+*A(0 ?A如曲线 5 所示, 按第一种方式起始反应速度较快但后续反应速度低于第二种方式 (曲线 ?) , 表明反应初期甘油

7、大量过量时酶活可能有所损失。F+GH也发现当甘油浓度达到 I!C时所用脂肪酶迅速失活。为此设计了曲线 的反应: 封闭物系中甘油和癸酸的摩尔比定为 ?: 5, 反应初期将 58E 癸酸与甘油均质后加入脂肪酶, 其余癸酸 5A 内流加完毕,待癸酸转化基本达到平衡后改敞开物系。这样既避免了反应初期高浓度甘油的抑制作用, 又降低了起始加水量, 综合这两点就有可能做到既不外加水又缩短反应时间。曲线 表明反应 ?A 达到封闭反应的最大平衡转化率 (此平衡曲线在图 ! 中未示出)后, 转敞开物系反应 ?A 癸酸转化率即达 IB%5C, 然后在 E.F$ 下减压反应 ?A 癸酸转化率达 I9%IC。!“#$%

8、 8*Q*?J8A8T59 A8=6F5 855 F;F5*( ! “# $%895F DF8?* -./%/- 012+3-,! “# $%;:)2 V ) 0 B5J;,O687E B9A575DT,X? R686FF?895 F;55 F;F5*,! “# $%;6 4 +( R598D*Q7H6887H 75Q895F J; 7H5*876A 6Q*? 8Q7H65678?895F J; A8=6F5 8F8F ?: =6A* ?8A 8H 5*=56D5 =?=?DF H;9?=H?J87*5*J6567?( “20%, 5%+75895F 8?6KD5?DF *5986( 8( 9

9、 :()3%3,;1)03%67 +4 ?%2(6 ./13607 (无锡轻工大学博士论文) ,$“8,-018:8768?567887 6789 8H 75?A 855 F;F5* 6F FD9859( /8=6F5F :?*83)1/+#+.-3 4.;) ?: 8 7?A( PB/ 9?5F 5FF 8F %, 0QF=578:878; 8?9D7( R57H66;859 PB/ =6QA;( G(U3 ?: 766A;87 678C8; ?: PB/ 57?C559 6:5 2 J67H5F ?: 5678?678?J?56F5 6789 C6AD5 ?: =?9D7 :?* () *

10、88:8768? C67DD* ? 95H;968 F85C5F 6AA 95H;965 5:578C5A;( R?A6 68? ?: 5676F8?87 6789 JD 8895( W8H 7568?7?AF,H5 5678?8?9 7?DA9 J5 FH?Q56*6876AA;;7?F8?87 6789 567H59 G(3 8?A 76=65F,8:8768?E 6F FD=?59 =686AA; J; 6?* I65 I7857H =?c57(Y?(GQ7“0Q“$Q“2) (!P?5F=?( 5A:)GQ2%“Q2)G!$“;Z6b:)GQ2%“Q2)G!$“;aQ*68A:;*b86dD*87H(59D0!G 期夏咏梅等: 非水相酶促合成癸酸偏甘油酯的研究

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