条斑紫菜中一种琼胶多糖的分离纯化及鉴定

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1、条斑紫菜中一种琼胶多糖的分离纯化及鉴定!张伟云陈颢汪水娟谭仁详(南京大学生物科学与技术系南京!“#$%) 费修绠(中国科学院海洋研究所青岛!? 谱的分析, 该多糖主要由琼胶二糖结构单元和它的生物前体组成, 以琼胶二糖为主。关键词条斑紫菜, 多糖, 分离纯化,“%=*?!“# $%*4EF=B) B/6DC2 +.E;*GE/FHC ,F*I;/FJ(-($#./(*. “0 1,“2“3,42 54,(*4( *6 7(4%*“2“3(#+,.FJ!“#$%) L)M I;E*2,FJ(4(*“2“3FJ0/6!0, R/7 ,1? /F/PQ7;7,34“ ;7 :/;FPQ O6:-67,

2、0 6S /J/56T;67,,/F0 /P;?紫菜是一种营养价值较高的海藻, 它作为人类食用及药用已有上千年历史。我国民间早就利用紫菜来泻火降血压, 并治疗一些淋巴结核病症等。近年来的研究发现, 紫菜的各种功效大多数是由紫菜中多糖成分起作用的, 而进一步搞清楚紫菜中多糖的组成、 结构及在体内的合成途径等, 对于更好地利用紫菜这一丰富资源具有一定的参考价值。!作者简介: 张伟云, 女, “$W$ 年硕士毕业, 现为南京大学生物科学与技术系博士研究生。 收稿日期: “$*#*“!接受日期: “$*#$*!责任编辑: 姜联合植物学通报!#,9: (X) : Y!$ Z Y%Y! ! ! ! ! !

3、 ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! !-%,*(+( ./00(1,* “2 .“1*(, !#48) ,将提取液与有机溶剂 (氯仿与正丁醇体积比 8?!) 混合, 比例为 8?!, 剧烈振荡 $“ A., 离心, 去除沉淀。重复此过程若干次, 直至上清液中无蛋白质被测出。浓缩至小体积, 冷冻干燥得粗多糖。!“$多糖的纯化!“$“!离子交换柱层析 将 !“ / 粗多糖溶解在 8 B 蒸馏水中, 然后加到 CD5$3 (E,=. 产品) 层析柱 ($F42

4、G $“ 2) 上, 流速为 $“ BH,, 用 !8“ B (约 !F8 倍柱体积) 的蒸馏水 ()I 4F“) 洗脱, 以部 分收集器收集。从各管取样, 用苯酚5硫酸法显色后在 %#“ . 测吸光值的方法来检测多糖 (张惟杰, !#),O;P Q5$“ (6,+52A 产品) 层析柱 ($F4 2G 4“ 2) 上, 以 “F“$ *BHL MNB 溶液洗脱, 流速为 !8 BH,。同样 用部分收集器收集, 苯酚5硫酸法检测得到两个多糖组分 (67! 和 67$) , 分别收集, 透析脱盐并冷冻干燥。!“$“$纯度鉴定 将上述 67! 约8 / 溶解在少量“F“8 *BHL MNB 溶液中

5、, 在!F4 2G 8“ 2 的 :;)+*1;%3“植物学通报!J 卷!“ 层析柱上以 #$#% 3?) 记录红外吸收光谱。!“%分子量测定 一般来说, 多糖分子量分布呈分散性的特点, 其分子量大小表现为连续的变化, 所以多糖的分子量大小一般是指它的平均分子量。本研究以凝胶柱层析法, 通过与标样比较,测定该琼胶的平均分子量。分别称取 A.,BHI.,BJH !“ 层析柱上以 #$2 HI.,BJH% 期张伟云等:条斑紫菜中一种琼胶多糖的分离纯化及鉴定852!“ 柱层析只出现单一峰, 表明它已是纯的单一组分。它的紫外可见光谱除 #$% 8 的 U)ILH。*4:- 降解的降解产物经气相色谱分析

6、, 绝大多数为半乳糖, 有少量赤藓糖和甘油, 其摩尔比为 N%V#VH。这说明多糖 ?# 的骨架主要是以 #“D 位连接的半乳糖, 或 #“H 位连接的 D, !1内醚1半乳糖组成, 有少量 #“H 位连接的半乳糖。甘油可能由侧链末端产生。HD2植物学通报#N 卷!“#多糖的$% 等, #7?#) 。根据异头碳的核磁共振峰信号的强弱, 可以推断出在此多糖中琼胶二糖的含量较高, 而其前体含量较低。图 $多糖 !“# 的核磁共振谱图 AB,$#$% () ;:AIC :C.C;DAJB EJAD 等, #7?#) , !“# 中各碳原子核磁共振信号与化合物的大致对应关系见表 #。%讨论本实验所提取

7、并纯化的这种多糖, 其硫酸基含量相当低, 是一种接近中性的多糖。由文献所知 (高洪峰等, #778; #77+) , 硫酸基主要存在于琼胶二糖前体的“# 1( 周慧萍8陈琼华8#9?9.: 紫菜多糖抗衰老作用的实验研究: 中国药科大学学报8#“; 1$ 周慧萍8陈琼华8#9?9: 紫菜多糖对机体细胞的保护作用: 中国药科大学学报8#“;( $ 周慧萍8陈琼华8#992: 紫菜多糖的抗凝血和降血脂作用: 中国药科大学学报8#!;( $(2 张惟杰主编8#9?B: 复合多糖生化研究技术8上海=上海科学技术出版社8( B 高洪峰8纪明侯8曹文达8#991: 南、 北方坛紫菜多糖结构特征的比较研究:

8、海洋与湖沼8#$;A A9 高洪峰8纪明侯8曹文达8#99: 不同生长期坛紫菜多糖中组分含量的变化: 海洋与湖沼8#$;A A29 74.6C3 & D8 E3F.3 E G8 H,IJ5K ) &8 #9?#: L#$E MHN 6JF/O 5P 65Q, .R.4%4,I.J,/ -5IO6.CC3.4S/, P45Q M,T U,.I.K/ 6,.T,/6: !“#$% &()* %&=#29A #2A &S05K D +8 )S-VSK &8 #9A: +-,CJ45-35J5Q,J4SC /,J,4QSK.JS5K 5P WSCSK.I RIOC5/6: !+,- &()* #=#2

9、91 #29? +,VV.I H8 XFW,KK, D !8 ),R4.K/ !8 +5Q4,J 78 H5II,J D8 H5F4./S%YSW,4K.F/ L8 Z,4/F6 H8 #99$: &S4,CJ 6J4FCJF4.I S/,KJSPSC.JS5K 5P -5IO6.CC3.4S/,6 P45Q 4,/ .IR., O GN QSC456-,CJ45QJ,4O = )5C.IS.JS5K 5P .R.4 SK Y4.CSI.4S. W,44FC56. 6,CJS5K6: ./0123/) !3$,*!#!=# #2 +J.F L H8 #9(A: N,Q5W.I 5P -45J,

10、SK6: +,W.R Q,J35/: .($24# &,152641 &()* $=A (贵州环保科技 杂志 122# 年征订启事贵州环保科技 系贵州省环保系统唯一一家环境保护专业性科技期刊, 国内统一刊号:EMA1%#2#N。本刊主要登载: 环境科研、 环境监测、 环境管理、 环境工程、 环境经济、 环境医学、 环境分析化学及生态环境等方面的科研、 技术报告及学术论文, 可供从事环境科研、 监测、 工程技术和管理的人员参考, 对从事相关专业教学及学习的高等院校师生, 亦有一定的参考价值。贵州环保科技 为季刊, 季末月下旬以前出刊, 每期定价 :22 元, 全年定价 #(:22 元, 单位或个人可随时订阅。(#) 银行信汇: 户名: 贵州省环境保护科学研究所开户银行: 贵阳市工商行南明支行帐号: ?2A?%1#信汇凭证请写明 贵州环保科技 订书(1) 邮汇直接寄:贵州环保科技 编辑部收($) 本刊编辑部通讯地址: 贵阳市新华路 B2 号 (旧号 #?) 贵州省环保所内, 邮编: AA2221, 电话:(2?A#) AA29$(1() 也可到邮局订阅, 邮发代号: (%A9。$植物学通报#B 卷

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