《胚胎注射-精氨酸和-鸟氨酸对肉仔鸡早期肠道发育影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《胚胎注射-精氨酸和-鸟氨酸对肉仔鸡早期肠道发育影响（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、2 0 0 9 年 第 4 5 卷 第 1 期营养饲料N u t r i t i o na n dF e e d s t u f f s摘要：为探讨胚胎注射 ?-精氨酸和 ?-鸟氨酸对肉仔鸡早期肠道发育的影响， 试验选用 2 0 0 枚孵化 1 8d 的艾维因肉仔鸡活胚蛋， 随机分成 4 个处理组， 每个处理组 5 个重复， 每个重复 1 0 枚蛋。 处理组 I 不注射任何营养物质作为对照， 处理组 I I 、 I I I 、 I V分别向羊膜腔内无菌注射 ?-精氨酸 （0 . 5 % ） 、 ?-鸟氨酸 （0 . 5 % ） 、 ?-精氨酸 + ?-鸟氨酸 （0 . 2 5 % + 0 .
2、2 5 % ） 营养液 1m L 。结果表明： 与对照组相比， 其他各处理组的肉仔鸡早期肠道黏膜形态学结构都得以改善 （? 0 . 0 5 ） ， 故不设生理盐水对照组。注射完毕后用灭菌石蜡密封蛋壳上的注射孔， 再将胚蛋放入孵化器内，在温度 3 6 . 9 和相对湿度为 6 8 %的条件下孵化， 自然出雏时， 准确记录每只小鸡的出壳时间。1 . 3 饲养管理对出壳雏鸡进行编号后， 饲养在育雏笼内， 雏鸡出齐后 2h 同时开食， 使用市售肉鸡全价配合饲料， 自由采食和饮水， 使用全天光照， 温度3 3 3 5 ， 湿度控制在 6 5 %左右， 密度为 5 0 只 / m2。1 . 4 肠道组织形
3、态学检测分别于出壳后 2 h 、 7 2 h和 7 d ， 每个重复随机选取 1 只小鸡进行屠宰， 迅速取1 . 5 c m十二指肠 （距幽门 1 c m处） ， 空肠 （卵黄囊蒂前端2 c m处） ， 回肠 （回盲瓣前端 2 c m处） 4 , 经 P B S 清洗内容物， 置于 1 0 %中性福尔马林液中 2 4 h 以上, 将固定好的组织经脱水透明浸蜡包埋修块切片展开贴片等一系列处理后，用苏木精 -伊红 （H a e m a -t o x y l i na n dE o s i n , H . E .） 染 色 制 成 组 织 切 片 ， 在O L Y M P S B X - 4 1 T
4、 F 光学显微镜下，每个部位的组织切片上， 随机选 1 0 个典型视野( 绒毛完整， 走向平直) ， 采用 H P I A S - 1 0 0 0 高清晰度彩色病理图文报告分析系统测量每个视野中最长绒毛的高度 （V H ） 、 相应的隐窝深度 （C D ） ，并 计 算 绒 毛 高 度 与 隐 窝 深 度 的 比 值（V H / C D ） 。1 . 5 肠道隐窝增生率的测定每个重复随机选取出壳后 2 4h没开食的小鸡 1只，腹腔注射 0 . 1m L5 0 0 g / m L的秋水仙素溶液， 作用是将小肠中正在增殖的隐窝细胞抑制在分裂中期， 3h后处死，按 1 . 4同样的取样和制作方法制成
5、切片， 改用 S c h i f f ?s 试剂染色， 在光学显微镜下， 每个样品取 1 0个隐窝观察处于分裂中期的肠隐窝细胞的数量， 取均值， 计算肠道隐窝增生率 5 。 C C P R计算方法: 每个肠腺处于有丝分裂中期的细胞数 / 肠腺暴露于秋水仙素的时间，在本试验中为 3h 。1 . 6 数据处理试验结果采用 E x c e l 建立数据库并生成纯文本数据文件， 采用 S P S S 1 5 . 0统计软件包对试验结果进行 A N O V A方差分析和 D u n c a n ?s 多重比较（? 0 . 0 5 ) 。对于空肠， I I 、 I I I 、 I V组的 V H比对照组
6、I 提高5 1 . 3 5 %、 2 3 . 8 1 %、 4 2 . 7 6 % （? 0 . 0 5 )（见图 1 ） ， I I 、 I I I 、 I V组的 V H / C D显著比对照组 I 高 4 1 . 0 3 %、 2 3 . 4 4 %、 2 6 . 3 7 % （? 0 . 0 5 ) ，对照组的 C D明显比 I I 、 I I I 、 I V组深，分别深2 2 . 8 4 %、 3 7 . 2 0 %、 2 3 . 5 7 %（? 0 . 0 5 ) ， 而对照组 I 的 C D则比其他各组都深 （? 0 . 0 5 ） ， 处理组 I I I ， I V的 C D极
7、显著低于对照组 I 1 6 . 0 2 %和 2 7 . 1 6 %( ? 0 . 0 5 ） 。对于空肠， 各处理组 V H差异不显著 （? 0 . 0 5 ） ，对照组 I 的 C D极显著深于全部胚胎注射组 （? 0 . 0 5 ） 。对于回肠，全部胚胎注射组的 V H与对照组 I相比分别提高 2 3 . 7 6 %、 2 2 . 8 9 %、 3 3 . 2 8 %，均差异极? ?表 ?胚胎注射 ?精氨酸和 ?鸟氨酸对肉仔鸡出壳后 ? ? 肠道组织形态学的影响处理组?处理组?处理组?处理组?图 ?肉仔鸡出壳后 ? ? 空肠组织形态结构图 （?）2 62 0 0 9 年 第 4 5 卷
8、第 1 期N u t r i t i o na n dF e e d s t u f f s 营养饲料? ? ? ? ?表 ?胚胎注射 ?精氨酸和 ?鸟氨酸对肉仔鸡出壳后第 ? 天肠道组织形态学的影响显著 （? 0 . 0 1 ） ， 处理组 I I 和 I I I 的 C D极显著低于对照组 I 3 2 . 8 9 %、 1 8 . 5 6 % （? 0 . 0 1 ） 。全部胚胎注射组 V H / C D均极显著高于对照组 （? 0 . 0 1 ） ， 分别提高 6 7 . 5 5 %、 5 1 . 0 3 %、 3 6 . 8 7 %。2 . 2 胚胎注射 ?-精氨酸和 ?-鸟氨酸对肉仔
9、鸡早期肠道隐窝增生率 （C C P R ） 的影响出壳后 2 4h小鸡的 C C P R情况见表 4 。I I 、 I I I 、 I V组十二指肠的C C P R比 对 照 组 分 别 提 高 了 6 2 . 6 0 %、 1 2 2 . 3 6 %、4 3 . 5 0 % （? 0 . 0 1 ） ，各处理组之间都有差异 （? 0 . 0 5 ） ；与对照组相比， I I 、 I I I 、 I V组空肠的 C C P R分别提高了 3 8 . 9 1 %、 5 6 . 4 9 %、 3 3 . 8 9 % （? 0 . 0 1 ） ， I I I 组比 I I 、 I V组高（? 0 .
10、 0 5 ） ；处理 I I 、 I I I 、 I V组回肠的C C P R 比 对 照 组 分 别 提 高 了 8 4 . 4 6 %、 6 2 . 1 5 %、4 9 . 4 0 % （? 0 . 0 1 ） ， 组比、 I V组高 （? 0 . 0 5 ） 。表 ?胚胎注射 ?精氨酸和 ?鸟氨酸对肉仔鸡早期肠道隐窝细胞增生率的影响?讨论3 . 1 胚胎注射 ?-精氨酸和 ?-鸟氨酸对肉仔鸡早期肠道组织形态学的影响小肠上皮是一个复杂的系统， 在生长发育过程中， 随着基因表达上皮增殖细胞不断地自我更新和分化。有试验指出，鸡胚胎注射碳水化合物、蛋白质后 4 8h内发育显著加速， 出壳时可达到
11、与对照组鸡出壳后 2d相同的肠道发育水平, 这一结果表明鸡胚注射可通过启动出壳前肠道的发育来加速鸡的早期生长和成活 6 。研究显示精氨酸和鸟氨酸均可通过生成多胺来增加胃肠黏膜细胞膜 K通道的表达， 进一步通过复杂网络促进纤维增殖及细胞迁徙定植， 促进细胞增殖， 加速蛋白质合成， 在胃肠黏膜生长、 发育、 成熟、 修复等环节起到关键作用 7 。本试验研究初步结果表明，胚胎注射 ?-精氨酸、 ?-鸟氨酸以及 ?-精氨酸 + ?-鸟氨酸 （0 . 2 5 %+ 0 . 2 5 % ） 混合物都对肉仔鸡早期肠道黏膜形态学的发育有明显作用， 但各营养液发挥作用的时间， 肠段以及程度上都有差异。 与处理组
12、 I I I 和 I V比， 处理组I I 的作用时间长、 范围广， 在肉仔鸡出壳后 2h十二指肠、 空肠的 V H以及空肠的 V H / C D ， 7 2h 十二指肠和回肠的 V H ， 十二指肠和空肠的 C D以及十二指肠的 V H / C D ，第 7天十二指肠的 V H和回肠的 C D以及 V H / C D都显示出更优的特性。与处理组 I I 和 I V相比， 处理组 I I I 则在出壳后 2h 的 C D以及 V H / C D ，7 2 h空肠的 V H和 V H / C D上显现出比处理组 I I 和I V更大的优势。相对于处理组 I I 和 I I I ，处理组 I V发挥作用的时间比较晚， 只有在出壳后 7 2h回肠和第 7天十二指肠和空肠的 V H以及 V H / C D上表现出明显优势，且作用效果多数处在处理组 I I ， I I I 与对照组之间， 加性效应不明显。因此，注射 ?-精氨酸、 ?-鸟氨酸以及 ?-精氨酸 + L -鸟氨酸 （0 . 2 5 %+ 0
