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1、2009-11-261第十三章第十三章基因治疗基因治疗2009-11-262手术治疗手术治疗手术治疗手术治疗?矫正畸形矫正畸形矫正畸形矫正畸形?器官和组织移植器官和组织移植器官和组织移植器官和组织移植?手术切除肿瘤组织手术切除肿瘤组织手术切除肿瘤组织手术切除肿瘤组织2009-11-263羊水中甲基丙二酸含量增高，胎儿可能患甲基丙羊水中甲基丙二酸含量增高，胎儿可能患甲基丙羊水中甲基丙二酸含量增高，胎儿可能患甲基丙羊水中甲基丙二酸含量增高，胎儿可能患甲基丙 二酸症，会引起新生儿发育迟缓和酸中毒，应在出二酸症，会引起新生儿发育迟缓和酸中毒，应在出二酸症，会引起新生儿发育迟缓和酸中毒，应在出二酸症，会
2、引起新生儿发育迟缓和酸中毒，应在出 生前和出生后给母体和患儿注射大量生前和出生后给母体和患儿注射大量生前和出生后给母体和患儿注射大量生前和出生后给母体和患儿注射大量VBVB1212。?出生前治疗出生前治疗出生前治疗出生前治疗药物治疗药物治疗药物治疗药物治疗原则：原则：原则：原则：补其所缺补其所缺补其所缺补其所缺去其所余去其所余去其所余去其所余2009-11-264患儿甲状腺功能低下，应给予甲状腺素终患儿甲状腺功能低下，应给予甲状腺素终患儿甲状腺功能低下，应给予甲状腺素终患儿甲状腺功能低下，应给予甲状腺素终 生服用，以防患儿智能和体格发育障碍。生服用，以防患儿智能和体格发育障碍。生服用，以防患儿
3、智能和体格发育障碍。生服用，以防患儿智能和体格发育障碍。?症状前治疗症状前治疗症状前治疗症状前治疗?出生前治疗出生前治疗出生前治疗出生前治疗原则：原则：原则：原则：补其所缺补其所缺补其所缺补其所缺去其所余去其所余去其所余去其所余药物治疗药物治疗药物治疗药物治疗2009-11-265?现症病人治疗现症病人治疗现症病人治疗现症病人治疗?症状前治疗症状前治疗症状前治疗症状前治疗?出生前治疗出生前治疗出生前治疗出生前治疗原则：原则：原则：原则：补其所缺补其所缺补其所缺补其所缺去其所余去其所余去其所余去其所余药物治疗药物治疗药物治疗药物治疗2009-11-266饮食疗法饮食疗法饮食疗法饮食疗法原则：原则
4、：原则：原则：禁其所忌禁其所忌禁其所忌禁其所忌?产前治疗产前治疗产前治疗产前治疗?现症病人治疗现症病人治疗现症病人治疗现症病人治疗2009-11-267基因治疗基因治疗基因治疗基因治疗(gene therapy)(gene therapy)运用运用运用运用DNADNA重组技术重组技术重组技术重组技术修复患者细胞中有修复患者细胞中有修复患者细胞中有修复患者细胞中有缺陷的基因，使细缺陷的基因，使细缺陷的基因，使细缺陷的基因，使细胞恢复正常功能而胞恢复正常功能而胞恢复正常功能而胞恢复正常功能而达到治疗疾病的目达到治疗疾病的目达到治疗疾病的目达到治疗疾病的目的。的。的。的。2009-11-268基因治
5、疗的策略基因治疗的策略基因治疗的策略基因治疗的策略基因修正基因修正基因修正基因修正(gene correction)(gene correction)：定点导入外源正定点导入外源正定点导入外源正定点导入外源正 常基因，代替有缺陷的基因，对靶常基因，代替有缺陷的基因，对靶常基因，代替有缺陷的基因，对靶常基因，代替有缺陷的基因，对靶 细胞基因组无任何改变。属于直接细胞基因组无任何改变。属于直接细胞基因组无任何改变。属于直接细胞基因组无任何改变。属于直接 治疗。治疗。治疗。治疗。基因添加基因添加基因添加基因添加(gene augmentation)(gene augmentation)：非定点导入外
6、非定点导入外非定点导入外非定点导入外 源正常基因，而没有去除或修复有源正常基因，而没有去除或修复有源正常基因，而没有去除或修复有源正常基因，而没有去除或修复有 缺陷的基因。属于间接治疗。缺陷的基因。属于间接治疗。缺陷的基因。属于间接治疗。缺陷的基因。属于间接治疗。2009-11-269?体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得 到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。基因治疗的基本方式基因治疗的基本方式基因治疗的
7、基本方式基因治疗的基本方式2009-11-2610?生殖细胞基因治疗：可根治遗传病，使生殖细胞基因治疗：可根治遗传病，使生殖细胞基因治疗：可根治遗传病，使生殖细胞基因治疗：可根治遗传病，使 有害基因不再在人群中散布。有害基因不再在人群中散布。有害基因不再在人群中散布。有害基因不再在人群中散布。?体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得体细胞基因治疗：使患者症状消失或得 到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。到缓解，但有害基因仍能传给后代。基因治疗的基本方式基因治疗的基本方式基
8、因治疗的基本方式基因治疗的基本方式2009-11-2611?外源基因高效正确的表达。外源基因高效正确的表达。外源基因高效正确的表达。外源基因高效正确的表达。?外源基因的安全导入；外源基因的安全导入；外源基因的安全导入；外源基因的安全导入；基因治疗的关键基因治疗的关键基因治疗的关键基因治疗的关键2009-11-2612?疾病的发病机制及相应基因的结构功能疾病的发病机制及相应基因的结构功能疾病的发病机制及相应基因的结构功能疾病的发病机制及相应基因的结构功能 清楚清楚清楚清楚基因治疗的条件基因治疗的条件基因治疗的条件基因治疗的条件?已克隆正常基因，且明确该基因表达与已克隆正常基因，且明确该基因表达与
9、已克隆正常基因，且明确该基因表达与已克隆正常基因，且明确该基因表达与 调控机制调控机制调控机制调控机制?导入基因具有合适的受体细胞，并能有导入基因具有合适的受体细胞，并能有导入基因具有合适的受体细胞，并能有导入基因具有合适的受体细胞，并能有 效表达效表达效表达效表达?具有安全有效的转运载体和方法具有安全有效的转运载体和方法具有安全有效的转运载体和方法具有安全有效的转运载体和方法2009-11-2613病毒介导转移法病毒介导转移法病毒介导转移法病毒介导转移法病毒介导基因转移病毒介导基因转移病毒介导基因转移病毒介导基因转移 (virus mediated gene (virus mediated
10、gene transfer)transfer)是指以病毒为载体，将外源性目的基因是指以病毒为载体，将外源性目的基因是指以病毒为载体，将外源性目的基因是指以病毒为载体，将外源性目的基因通过基因重组技术，组装到病毒载体上，并使重通过基因重组技术，组装到病毒载体上，并使重通过基因重组技术，组装到病毒载体上，并使重通过基因重组技术，组装到病毒载体上，并使重组病毒感染受体宿主细胞，完成基因转移。组病毒感染受体宿主细胞，完成基因转移。组病毒感染受体宿主细胞，完成基因转移。组病毒感染受体宿主细胞，完成基因转移。2009-11-2614逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒(retrovirus)(retr
11、ovirus) 优点优点?能高效转染宿主细胞，转染率可达能高效转染宿主细胞，转染率可达能高效转染宿主细胞，转染率可达能高效转染宿主细胞，转染率可达100100?宿主范围广泛宿主范围广泛宿主范围广泛宿主范围广泛?可转染大量细胞并长期停留，病毒基因和所可转染大量细胞并长期停留，病毒基因和所可转染大量细胞并长期停留，病毒基因和所可转染大量细胞并长期停留，病毒基因和所 载的外源基因都能表达载的外源基因都能表达载的外源基因都能表达载的外源基因都能表达? 缺点缺点?病毒容量有限病毒容量有限病毒容量有限病毒容量有限(7 kb)(7 kb)?随机插入随机插入随机插入随机插入?有致癌作用有致癌作用有致癌作用有致
12、癌作用?仅对分裂期细胞有效仅对分裂期细胞有效仅对分裂期细胞有效仅对分裂期细胞有效2009-11-26155 5 LTR LTR LTR 3LTR 3 U3U3R RU5U5U3U3R RU5U5小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒(Mo(Mo- -MLV)MLV)gag pol envgag pol env病毒核心病毒核心病毒核心病毒核心逆转录酶逆转录酶逆转录酶逆转录酶外壳蛋白外壳蛋白外壳蛋白外壳蛋白 抗原基因抗原基因抗原基因抗原基因基因基因基因基因基因基因基因基因逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒(retrovirus)(retrovirus)?逆转录病毒载体的构建
13、逆转录病毒载体的构建逆转录病毒载体的构建逆转录病毒载体的构建( ( ( (缺陷型病毒缺陷型病毒缺陷型病毒缺陷型病毒) ) ) )2009-11-26165 5 LTR LTR LTR 3LTR 3 U3U3R RU5U5U3U3R RU5U5小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒(Mo(Mo- -MLV)MLV)外源目的基因外源目的基因逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒(retrovirus)(retrovirus)?逆转录病毒载体的构建逆转录病毒载体的构建逆转录病毒载体的构建逆转录病毒载体的构建( ( ( (缺陷型病毒缺陷型病毒缺陷型病毒缺陷型病毒) ) ) )200
14、9-11-2617逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒(retrovirus)(retrovirus)?逆转录病毒载体的包装逆转录病毒载体的包装逆转录病毒载体的包装逆转录病毒载体的包装RNARNA- - - -Helper virusHelper virusPackaging cellPackaging cellRNARNAPackaging Packaging proteinproteinVirusVirusRecombinant virusRecombinant virus+ +2009-11-2618DNADNA病毒病毒病毒病毒 优点优点?插入插入DNA片段较长片段较长?宿主范围广，
15、不需要正在分裂的细胞宿主范围广，不需要正在分裂的细胞?不整合，减少插入突变的潜在危险不整合，减少插入突变的潜在危险? 缺点缺点?需反复给药需反复给药?具有免疫原性具有免疫原性2009-11-2619?复制缺陷型病毒复制缺陷型病毒复制缺陷型病毒复制缺陷型病毒?腺病毒腺病毒腺病毒腺病毒(adenovirus)(adenovirus)载体的优点载体的优点载体的优点载体的优点?可感染分裂和非分裂细胞可感染分裂和非分裂细胞可感染分裂和非分裂细胞可感染分裂和非分裂细胞?病毒颗粒稳定，易于浓缩和纯化病毒颗粒稳定，易于浓缩和纯化病毒颗粒稳定，易于浓缩和纯化病毒颗粒稳定，易于浓缩和纯化?可导入多种靶细胞，并持续表达可导入多种靶细胞，并持续表达可导入多种靶细胞，并持续表达可导入多种靶细胞，并持续表达?无致癌性无致癌性无致癌性无致癌性DNADNA病毒病毒病毒病毒2009-11-2620靶细胞的选择靶细胞的选择靶细胞的选择靶细胞的选择?易于取材易于取材易于取材易于取材?便
