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1、一般分析方法可以分成两大类，一是绝对的方法，另外就是相对的方法。绝对的方法是不需要使用标准品的。可是相对的分析方法就需要使用标准品了。 借着与标准品在同一条件下的比较，就可以完成对样品的定性与定量。所以如何来决定标准品自然就成为很重要的课题。一般的标准品可以分成几类，分别讨论如下。对於一个崭新的分子(new molecular entity)，我们首先是需要完成纯化的制备，然后完成分析分子的物理特征（physical characterization)。纯化的制备方法可根据分子而使用不同的方法。譬如小分子而言，可以使用一般的再结晶方法。当然最理想还是使用制备色谱。不管使用何种纯化的方式，在做物
2、理特征定性之前，我们必须取得高纯度的样品。而一般纯度就是使用高效液相色谱来做初步的决定。换句话说就是取得色谱纯度(chromatographic purity，也就是我们说的homogeneity)。要决定色谱纯度，自然需要开发出色谱的方法。一般可以使用梯度或等度方法，唯一的要求就是要能够检测到所有可能存在 0.1%以上的杂质。有了这种方法，我们必须调整进样量，使我们能够检测到 0.1%的杂质。根据峯面积的百分比，我们可以求得主峰的色谱纯度。一般的要求就是要达到 99.9% 以上。换句话说就是只有单一主峰的存在。这也是使用制备色谱纯化标准品的主要原因。这一类的标准品，我们叫做原始标准品(pri
3、mary reference standard)。取得此类标准品后，就需要做一系列的化学构造鉴定。一般使用 UV/Vis, FT-IR, NMR, MS, X-Ray等等来确定分子的结构式。然后就需要使用绝对的分析方法来做化学定量。对小分子可以使用DSC, 酸碱滴定，NMR, 电化学，也可以使用元素分析等。使用元素分析就是做 C, H, 等等元素的分析。然后根据分子的理论值来计算标准品的化学纯度。当然，我们还需要其他的无机成分（如水，阴阳离子等）以取得标准品含量的物质平衡(material balance)。如此，我们就可以知道这个原始标准品的化学纯度(chemical purity)。一般原
4、始标准品的制备是很花时间，所以不需过多的量。一般有个 20-30 毫克就足够使用了。主要的用途就是用於鉴定化学构造及纯度。一旦有了原始的标准品，我们就可以拿这个标准品，用色谱方法来定量了。另外一类的标准品就是所谓药典标准品 (compendial standard)。这种标准品相当的昂贵。其实这类标准品就可以视为上述的原始标准品。只是我们可以直接使用，而不需要经过上列的构造鉴定程序。一般可向美国的 USP, 欧洲的 EP 采购。每一个标准品都带有使用的手续。譬如贮存的情况，是否在使用前需要干燥，干燥的时间等等。这些标准品都是假设是 100%纯度。换句话说我们如果制备 1.00 微克每毫升，那相
5、对的浓度就是 1.00。这类的标准品的保存期是一直到下一个批号的标准品上市以前。也就是说一旦新的一个批号标准品出来后，前一个批号的标准品就自然的作废了。前面提到这类的标准品相当的昂贵，为了有充足的标准品做一般实验，因此就必须选择所谓的工作标准品 (working standard)。这一类的标准品也可以称为二级标准品(secondary reference standard)。工作标准品，可以选择一般的原料药，或着市面上出售的化学药品。一般我们都是选用某一个批号的化学原料药。可以取出 100 克的药量，发配一个标准品的批号。然后使用高效色谱的方法，用前述的原始或药典标准品来定量工作标准品的纯度
6、。这个纯度就是化学纯度。有一点需要注意的就是这个工作标准品的纯度可能不会到 99.9%，他的色谱纯度也许也不高。但是我们仍旧可以使用，只要我们能够从正确的色谱方法取得有重复性的纯度。当然这个标准品的稳定性，保存方法，保存期是可以参考化学原料药来处理。最后一类的标准品就是色谱工作液标准品 (working standard solution)。我们在做色谱分析的时候，一般是需要配制新鲜的工作标准液。每次配制标准液，需要秤量样品，稀释。自然会介入许多不必要的误差。而且每天配制，不同的分析人员也会介入不同的误差。因此，我们可以考察色谱工作液 (HPLC working standard soluti
7、on) 的稳定性。第一次，可以配制两个标准液。考察两个样品的重复性，准确性与精确度。精确度可以从两个样品的响应系数取得。通过检验后，可以贮存於冰箱当中（或需要防光照射） 。每隔一星期，可用重新配制标准液来考察贮存的老标准液的稳定性。这样继续考察，自然就可以决定工作标准液的稳定期了。只要在 稳定期内，我们就可以使用已配制的标准液来执行色谱的分析。这样就可以避免每次称重，稀释等等繁杂的手续了。如果，样品稳定就可以直接使用药典标准品，因为一般我们使用的量非常小，而且药典标准品的稳定期也是有期限的。比较考察工作标准品（或原料药）的稳定性，还是省去许多繁复的手续。以上就是我对标准品的使用方法。最重要的就是一旦决定了标准品，完全考察鉴定标准品的构造是必须的。小分子的标准品鉴定是比较简单的。其他的大分子，譬如蛋白质，肽类，高分子等等的标准品就比较复杂了。而且我们在这里所讨论的就是从化学构造来看标准品，并没有考虑到活性的问题。对于蛋白质一类的分子，标准品就有两大类，一类就是关于化学构造，另外一类就是考察活性的标准。自然在制备这两种标准品的方法是不同的。以后再慢慢的讨论，如何指定蛋白质，肽类，高分子的标准品。
