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1、哮喘患儿哮喘患儿 PBMCPBMC 产生产生 IL-4IL-4、IL-6IL-6 和和 IL-10IL-10 水平及意义水平及意义中国免疫学杂志 1999 年第 7 期第 15 卷 临床免疫学作者：符 州 杨锡强 李成荣 王莉佳 张儒谊 陈坤华单位：符 州 杨锡强 王莉佳 张儒谊 陈坤华 重庆医科大学儿童医院，重庆 400014；李成荣 深圳市儿童医院，深圳518020中国图书分类号 R725.6哮喘是儿童反复发作的常见疾病，因其诱因多，机制复杂，给防治带来很大困难。近有学者提出 T 辅助细胞亚群(Th1 和Th2)功能失衡与哮喘发病密切相关1 ，我们拟通过测定哮喘患儿外周血单个核细胞(PBM
2、C)产生 Th2 类细胞因子的能力，进一步阐明 Th 细胞功能失衡在发病中的作用。1 材料与方法1.1 病例选择 哮喘组 20 例，为符合婴幼儿哮喘诊断标准的住院患儿2 ，男女各 10 例，年龄 8 个月3 岁，平均2.2 岁。正常对照组 15 例，为随机选择健康儿童，无个人和家族特应症病史，男 8 例，女 7 例，年龄 6 个月2.8 岁，平均 2.0岁。1.2 标本收集 入院 24 h 内静脉采血，肝素抗凝，常规分离单个核细胞，调细胞至 1106 ml-1，加 PHA 100 g/ml，37 5%CO2 孵箱中培养 48 h，收上清贮存在-20用于细胞因子检测。同期完成正常对照标本收集。1
3、.3 细胞因子测定 采用双抗体夹心 ELISA 方法。人 IL-10 试剂盒购于美国 Genzyme 公司，IL-4、IL-6 试剂盒分别购于深圳晶美生物工程有限公司和第四军医大学免疫学教研室，方法见说明书。1.4 统计学方法 检测结果以 xs 表示，采用显著性 t检验及直线相关分析法。2 结果2.1 哮喘患儿 PBMC 产生 IL-4、IL-6、IL-10 水平 哮喘患儿 PBMC 经 PHA 刺激后，IL-4、IL-6、IL-10 水平分别为123.361.3，225.488.2，89.257.0 pg/ml，明显高于正常对照组(53.819.9，86.050.1，42.429.6 pg/
4、ml)，t=3.88，4.43，2.52，P0.01，0.01，0.05。2.2 3 种细胞因子间相关分析 将哮喘组 IL-4、IL-6、IL-10 测定值进行直线相关分析，发现 IL-4 与 IL-10 间存在高度正相关，r=0.628，t=3.42，P0.01，而 IL-4 与 IL-6、IL-6 与 IL-10 间相关性不明显(P0.05)。3 讨论Th 细胞按其分泌细胞因子不同而分为 Th1 和 Th2 两亚群，前者分泌 IL-2、IFN-，后者分泌 IL-4、IL-5、IL-6、IL-10。正常时两者维持一定平衡，一旦失衡则可能导致疾病。本研究表明，在哮喘发作期，PBMC 产生 IL
5、-4、IL-6、IL-10 水平明显增高，表现出 Th2 功能亢进。IL-4 为 B 细胞增殖活化及IgE 产生所必需，其异常分泌导致 IgE 过量产生，在哮喘型变态反应中起重要作用。此外，IL-4 还能刺激肥大细胞增殖，抑制 Th1 分泌 IFN-，这些在哮喘发病中可能都具有作用3 。IL-6 除协同 IL-4 促进 IgE 合成外，还可能通过增强哮喘效应细胞上 CD23 表达，促使炎症细胞激活和炎症介质释放。IL-10能抑制 IL-2、IFN- 合成，促进 IL-4、IL-5 分泌和 B 细胞增殖，故在哮喘发病中的作用颇受重视。有学者发现 IL-10 能增强哮喘患者螨诱导的 PBMC Ig
6、E 合成，与 IL-4 有协同作用4 。本实验也显示哮喘患儿 PBMC 产生 IL-10 增多，且与 IL-4 水平呈高度相关，揭示 IL-10 异常分泌在哮喘发病中有重要作用。据此，在哮喘防治中应重视对失衡的细胞因子进行矫正，如通过研制调节 Th1Th2 功能平衡的药物，或 Th2 类细胞因子及受体拮抗剂用于哮喘防治，使其失衡的细胞因子网络恢复正常。本课题受阿斯特拉儿童哮喘研究基金资助作者简介：符 州，男，34 岁，博士，主治医师，主要研究小儿呼吸系统疾病及变态反应疾病；杨锡强，男，59 岁，教授，博士生导师，主要研究小儿临床免疫学及分子生物学；李成荣，男，46 岁，教授，主要研究小儿肾脏疾
7、病及分子生物学4 参考文献1 Kline J N, Hunninghake G W. T-lymphocyte dysregulation in asthma. Proc Soc Exp Biol Med, 1994;207:2432 全国儿科哮喘协作组.儿童哮喘诊断标准和治疗常规.中华儿科杂志，1993；31(4)：2223 杨锡强.细胞因子在支气管哮喘发病机理中的作用.中华儿科杂志，1993；31(6)：3734 Kawano Y， Noma T. Dual action of IL-4 on mite antigen-induced IgE synthesis in lymphocytes from individuals with bronchial asthma. Clin Exp Immunol, 1995;102:389收稿 1997-12-08 修回 1998-04-02
